紫外可见分光光度计简介
紫外可见分光光度计基本知识
紫外可见分光光度法简介
紫外-可见分光光度法简介紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visible spectrophotometry, UV-VIS)，它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析, 所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。
按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。
紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长（频率小）的光线能量小，波长短（频率大）的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
吸收光谱描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。
紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。
最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。
朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。
这个定律表示：当一束具有I0强度的单色辐射照射到吸收层厚度为b，浓度为c的吸光物质时，辐射能的吸收依赖于该物质的浓度与吸收层的厚度。
其数学表达式为：式中的A 叫做吸光度；I0为入射辐射强度；I为透过吸收层的辐射强度；（I/I0）称紫藤为透射率T；ε是一个常数，叫做摩尔吸光系数，ε值愈大，分光光度法测定的灵敏度愈高。
紫外-可见分光光度计有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器[1]。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
紫外可见分光光度计 普析
紫外可见分光光度计普析紫外可见分光光度计（UV-Vis spectrophotometer）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域的研究和实验中。
本文将从紫外可见分光光度计的原理、应用以及操作步骤等方面进行介绍。
一、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计是利用物质对紫外可见光的吸收特性进行定量分析的仪器。
根据光的波长范围，可分为紫外光区和可见光区两部分。
紫外光区的波长范围为200-400 nm，可见光区的波长范围为400-800 nm。
紫外可见分光光度计的工作原理是通过光源产生的光经过样品后，被光电二极管或光电倍增管接收，形成光谱图，再通过计算机进行数据处理和分析。
在分析过程中，样品溶液的吸收特性会使光强发生变化，根据吸光度与物质浓度之间的线性关系，可以通过测量吸光度来确定物质的浓度。
二、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计在科研和实验中有着广泛的应用。
以下是其中几个常见的应用领域：1. 生物化学分析：紫外可见分光光度计可用于蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度测定和纯度分析，如蛋白质含量的测定、核酸的纯度检测等。
2. 药物分析：紫外可见分光光度计可用于药物的含量测定、质量控制和稳定性研究，如药物溶液的吸光度测定、药物的光解动力学研究等。
3. 环境监测：紫外可见分光光度计可用于水质、大气和土壤等环境样品的污染物分析和监测，如水中重金属离子的测定、大气中挥发性有机物的测定等。
4. 食品安全检测：紫外可见分光光度计可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的检测，如食品中硝酸盐含量的测定、食品中防腐剂的测定等。
三、紫外可见分光光度计的操作步骤使用紫外可见分光光度计进行实验时，需要按照以下步骤进行操作：1. 打开仪器电源，并预热一段时间，使光源和光电二极管稳定工作。
2. 根据实验需要选择合适的光源和检测器，设置光的波长范围。
3. 取一定量的样品溶液，注入样品池中，并调节样品池的位置，使光线通过样品溶液。
紫外可见分光光度法简介
A=lg1/T=lgI0/It
二、朗伯-比尔定律 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有 吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光 物质浓度、液层厚度乘积成正比，即
A= κ cl 式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光 波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l 为透光液层厚度。
子时，可引起吸收峰的位移和吸收强度的改变，这些基团称为助 色团。如苯环的一个氢原子被一些基团取代后，苯环在254nm处 的吸收带的最大吸收位置和强度就会改变。
化合物 苯 氯苯 溴苯 苯酚 苯甲醚
取代基
max / nm 254
Cl 264
Br 262
OH 273
OCH3 272
m ax
300 320 325 1780 2240
1.定性分析 每一种化合物都有自己的特征光谱。测出未
知物的吸收光谱，原则上可以对该未知物作出定 性鉴定，但对复杂化合物的定性分析有一定的困 难。
2.纯度的鉴定 用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便
的。
如蛋白质与核酸的纯度分析中，可用 A280/A260的比值，鉴定其纯度。
3.结构分析 紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的
光源不是点光源，比色皿光径长度不一 致，光学元件的缺陷引起的多次反射等，均 造成光径不一致，从而与定律偏离。
紫外-可见分光光度计
一、主要部件的性能与作用 基本结构:
光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 ↑ 样品
1 光源
在紫外可见分光光度计中，常用的光源 有两类：热辐射光源和气体放电光源
热辐射光源用于可见光区，如钨灯和 卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如 氢灯和氘灯。
结构分析，但利用紫外吸收光谱鉴定化合物 中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。
紫外可见分光光度计范围
紫外可见分光光度计范围紫外可见分光光度计是一种常见的实验仪器，广泛应用于生化分析、环境监测、医学研究等领域。
它能够测量样品在紫外和可见光波段的吸光度，通过测量吸光度的变化，可以得到样品的浓度、反应动力学等重要信息。
紫外可见分光光度计的工作原理是基于光的吸收现象，下面我们来详细了解一下它的工作原理和应用范围。
紫外可见分光光度计的工作原理是基于比尔-朗伯定律，即吸光度与溶液中物质的浓度成正比。
当光通过样品时，样品中的物质会吸收一部分光，剩下的光通过样品溶液。
光度计会测量通过的光的强度，通过计算吸光度与浓度的关系，可以得到样品中物质的浓度。
紫外可见分光光度计的主要组成部分包括光源、样品室、光栅和光电传感器等。
紫外可见分光光度计的应用范围非常广泛。
在生化分析中，紫外可见分光光度计可以用于测量蛋白质、核酸、糖类等生物大分子的浓度。
通过测量吸光度的变化，可以得到样品中生物大分子的浓度，从而实现对生物大分子的定量分析。
在环境监测中，紫外可见分光光度计可以用于测量水中的污染物浓度。
通过测量水样的吸光度，可以判断水中是否含有有害物质，并对水质进行评估。
在医学研究中，紫外可见分光光度计可以用于测量药物的浓度。
通过测量药物的吸光度，可以监控药物在体内的代谢过程，从而指导药物的使用。
除了测量样品的浓度，紫外可见分光光度计还可以用于研究样品的光学性质。
在材料科学中，紫外可见分光光度计可以用于研究材料的光学吸收、反射和透射等性质。
通过测量材料在不同波长下的吸光度，可以得到材料的光学带隙、能带结构等重要参数。
在化学反应动力学研究中，紫外可见分光光度计可以用于测量化学反应的速率。
通过测量反应物或产物的吸光度随时间的变化，可以得到反应的速率常数和反应级数等信息。
总结一下，紫外可见分光光度计是一种常见的实验仪器，广泛应用于生化分析、环境监测、医学研究等领域。
它通过测量样品在紫外和可见光波段的吸光度，可以得到样品的浓度、反应动力学等重要信息。
紫外可见分光光度计的作用
紫外可见分光光度计的作用一、什么是紫外可见分光光度计？分光光度计是一种用于测量物质对光的吸收或透射性能的仪器。
其中，紫外可见分光光度计是应用于紫外光和可见光波段范围内的分光光度计。
它可以测量物质在不同波长下的吸收光强，从而得到吸收光谱和透射光谱，进一步分析样品的特性和成分。
二、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律。
根据这个定律，物质溶液中所吸收的光强与物质浓度成正比，也与光程和物质的摩尔吸光度相关。
通过调节不同波长的入射光，获得样品在不同波长下的吸光度值，可以得到样品吸收光谱。
三、紫外可见分光光度计的工作原理紫外可见分光光度计由光源、光栅、样品室、检测器和计算机组成。
具体工作原理如下：1. 光源光源产生连续的光谱，通常使用氘灯或钨灯作为光源。
紫外光区域使用氘灯，可见光区域使用钨灯。
2. 光栅光栅是紫外可见分光光度计的核心部件，它可以分散光线，使不同波长的光分开。
具体来说，光线经过光栅后，会被分成不同颜色的光，形成连续的光谱。
3. 样品室样品室用于放置待测样品。
样品室透光窗口的材料可以根据不同实验需要选择，例如石英或玻璃。
通过调节样品室中的路径长度，可以改变样品对光的吸收程度。
4. 检测器检测器接收样品室中透射或反射的光，并将光信号转换为电信号。
常用的检测器包括光电二极管（photodiode）和光电倍增管（photomultiplier tube）。
5. 计算机计算机用于控制光源、记录检测器输出和进行数据处理。
通过计算机软件，可以实时显示吸收光谱，并进行数据分析和处理。
四、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计具有广泛的应用范围，以下列举了几个常见的应用领域：1. 生物化学和分子生物学在生物化学和分子生物学中，紫外可见分光光度计可以用于测量DNA和蛋白质的浓度。
通过测量样品在260纳米波长处的吸收光强，可以确定DNA的浓度。
同时，通过测量样品在280纳米波长处的吸收光强，可以确定蛋白质的浓度。
紫外可见分光光度计范围
紫外可见分光光度计范围紫外可见分光光度计是一种常用的实验室仪器，用于测量物质在紫外和可见光区域的吸收和透射能力。
它可以帮助科学家和研究人员分析和确定物质的结构、浓度和反应性质。
本文将介绍紫外可见分光光度计的原理、应用范围和使用注意事项。
一、原理紫外可见分光光度计基于物质对不同波长光的吸收能力不同的原理。
当物质受到光的照射时，会吸收特定波长的光，使其能级发生跃迁。
通过测量物质对光的吸收程度，可以得到物质的吸收光谱。
紫外可见分光光度计利用光源发出连续的光，经过样品后，光会被检测器检测到，产生一个光谱图。
根据光谱图上的吸收峰值的强度和波长，可以推断出物质的浓度和化学结构。
二、应用范围紫外可见分光光度计广泛应用于各个领域的科研和实验室工作中。
以下是一些常见的应用范围：1. 化学分析：紫外可见分光光度计可以用于测定溶液中金属离子、有机物和其他化合物的浓度。
通过测量吸收峰值的强度，可以快速准确地确定样品中物质的含量。
2. 生物医学研究：紫外可见分光光度计可以用于测量DNA、蛋白质和其他生物大分子的浓度和纯度。
这对于研究细胞生物学、遗传学和药物研发等领域非常重要。
3. 环境监测：紫外可见分光光度计可以用于监测水和大气中的污染物。
通过测量样品中污染物的吸收能力，可以评估环境质量并制定相应的污染治理措施。
4. 食品安全：紫外可见分光光度计可以用于检测食品中的添加剂、农药残留和重金属等有害物质。
这对于保障食品安全和消费者健康非常重要。
三、使用注意事项在使用紫外可见分光光度计时，需要注意以下事项：1. 样品处理：样品应根据实验要求进行适当的处理，如稀释、过滤和提取等。
这样可以确保测量结果的准确性和可靠性。
2. 光程选择：光程是光通过样品的距离，通常使用1 cm的光程。
如果样品浓度较低，可以选择更长的光程以增加吸光度。
3. 波长选择：根据实验需求选择合适的波长范围进行测量。
紫外光谱通常在200-400 nm范围内进行，可见光谱通常在400-800 nm范围内进行。
紫外可见分光光度计功能详述
紫外可见分光光度计功能详述紫外可见分光光度计（UV-Vis分光光度计）是一种用于研究物质的吸收、透射和反射光谱特性的仪器。
它由光源、光栅、样品室、检测器和数据处理单元等组成。
以下是对其功能进行详述。
1.宽波长范围：紫外可见分光光度计可以在紫外至可见光范围（190-1100nm）内进行光谱扫描。
这个范围涵盖了大部分无机和有机物质的吸收区域，因此可以用于许多领域的应用，例如化学、物理、生物和环境科学等。
2.定量分析：紫外可见分光光度计可以通过测量样品的吸光度来定量分析物质的浓度。
它根据比尔－朗伯定律，即吸光度与样品溶液浓度成正比关系，利用这个关系可以推导出样品的浓度。
3.质量控制：在工业生产中，紫外可见分光光度计可以用来监测原料、中间产品和最终产品中的成分变化。
通过测量样品吸光度的变化，可以及时探测到质量问题，并从而采取相应措施进行调整。
4.物质识别：每种物质都有其特有的光谱吸收特性。
紫外可见分光光度计可以根据物质的特征光谱图在样品中识别和鉴别物质。
这在犯罪现场分析、药物识别以及食品和饮料检测中具有重要意义。
5.动力学研究：紫外可见分光光度计可以配合温度控制装置，对吸收光谱在时间上的变化进行实时监测和分析。
这使得它在动力学研究中的应用非常广泛，例如反应动力学、酶动力学和酸碱滴定等。
6.样品稳定性研究：紫外可见分光光度计可以用来评估某个物质在不同环境条件下的稳定性，例如光照、温度和湿度等。
通过对光谱形状和吸光度的变化进行分析，可以判断物质的稳定性和降解机制。
7.溶液动力学研究：紫外可见分光光度计可以配合流动注射技术，对溶液中吸收光谱的变化进行测量。
这在药物溶解度、胶体稳定性和离子浓度测定等方面有广泛应用。
8.数据处理功能：紫外可见分光光度计通常配备有数据处理软件，可以进行光谱数据的处理、分析和报告生成。
这使得数据的处理更为方便和高效。
总之，紫外可见分光光度计作为一种重要的光谱分析仪器，具有广泛的应用领域和功能。
紫外可见分光光度计介绍
紫外可见分光光度 计可以用于定性分 析，确定物质是否 存在或含量多少。
定性分析可以帮助 研究人员了解物质 的性质、结构、组 成等信息。
定性分析可以应用于 化学、生物、医学、 环境等领域，对物质 进行定性分析。
定性分析还可以用 于检测物质的纯度、 杂质等，确保产品 质量和安全。
01
02
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定量分析
电信号经过放大和处理，得 到样品的吸光度。
吸光度与样品浓度之间存在 一定的关系，通过标准曲线
可以计算出样品的浓度。
光路结构
光源：提供紫外可见光 单色器：将光源分解为单色光 样品池：放置待测样品 检测器：接收样品吸收后的光信号 信号处理：将检测到的信号转换为吸光度或透光率 显示与记录：显示测量结果，记录数据
测量方法
光源：提供紫外可 见光，激发样品中
的分子或原子
检测器：检测样品 吸收光后的强度变 化，转化为电信号
单色器：将光源发 出的光分解成单色
光
样品池：放置样品， 吸收单色光
数据处理：将电信 号转化为吸收光谱，
进行分析和计算
结果输出：显示样 品的紫外可见吸收 光谱，提供定量和
定性分析结果
定性分析
定量分析：
1 通过测量吸 光度值，计 算样品浓度
应用领域：
2 化学、生物、 医学、环境 等领域
定量分析方法：
3 标准曲线法、 标准加入法、 内标法等
定量分析特
4 点：准确、 快速、灵敏、 稳定
应用领域
01
化学分析：用于分析化学物质，如蛋 02
环境监测：用于监测水质、大气、土
白质、核酸、氨基酸等
壤等环境因素
光源故障：检查光源是否正常， 必要时更换光源
紫外可见分光光度计的性能特点介绍
紫外可见分光光度计的性能特点介绍紫外可见分光光度计是一种用于分析和测量样品中吸收和透射光的仪器。
它主要应用于化学、生物、食品等领域，具有广泛的应用价值。
在此，我们将详细介绍紫外可见分光光度计的性能特点。
1. 波长范围广紫外可见分光光度计的波长范围通常为190-1100nm，可用于检测紫外至可见光区间的吸收谱线。
在化学分析和生物学实验中，通常使用低波长紫外光(200-400nm)、中波长紫外光(200-300nm)和可见光(400-800nm)进行检测。
由于波长范围广，紫外可见分光光度计能够更精确地测量样品中的吸收率和透过率，从而准确地分析和判断样品的特性。
2. 分辨率高紫外可见分光光度计的分辨率一般为0.1nm，可用于准确地测量样品光谱的细节和变化。
高分辨率可实现更精细的分析，减少光谱图像中峰之间的重叠，提高了数据的可靠性。
3. 灵敏度高紫外可见分光光度计具有高灵敏度，可检测非常小的样品浓度变化。
它通常使用扫描速率较慢的方式测量光谱，从而提高检测的精度和可靠性。
此外，高灵敏度还可缩短操作时间，提高实验效率。
4. 稳定性好紫外可见分光光度计通常采用恒温控制系统，可以稳定保持光源的温度，从而保持光源的持续亮度，提高实验数据的可靠性。
此外，配备高品质的材料和部件，还能有效缓冲温度变化或机械振动对仪器的影响。
5. 操作简便紫外可见分光光度计的操作简单易学，可用于化学实验室的各种需求。
它具有友好的图形用户界面，方便用户查看数据和实验结果。
同时，通用的样品室和灵活的样品架也使得操作更为便捷。
在不同的实验需要下，用户可自定义样品装置(比如：样品台、紫外石英池、石英微量池和吸收池等)，以适应不同类型的实验样品。
总结紫外可见分光光度计作为一种通用的分析检测仪器，其性能特点越来越受到人们的关注。
广泛适用于化学、生物等领域的样品分析和检测，是实验室必备的仪器之一。
在实验过程中，需要根据具体的实验需求和标准，合理地选择不同类型和不同品牌的紫外可见分光光度计。
紫外可见分光光度计详细介绍
紫外可见分光光度计详细介绍紫外可见分光光度计是一种用于测量物质在紫外和可见光波段吸收和发射光线的仪器。
它通过测量试样溶液中吸收或发射的光的强度来确定物质的浓度或化学性质。
紫外可见分光光度计广泛应用于化学、生物、环境科学等领域，为科学研究和工业生产提供准确的光谱数据。
紫外可见分光光度计的工作原理是基于比尔定律。
根据比尔定律，溶液中吸收光的强度与溶液中溶质的浓度成正比。
光度计通过测量入射光和透射光之间的差异来确定溶液中溶质的浓度。
紫外可见分光光度计通常由光源、样品室、光栅、光电探测器和信号处理器等组件构成。
紫外可见分光光度计的光源通常是一种连续光源，如氘灯或钨灯。
紫外光源通常使用氘灯，可见光源通常使用钨灯。
这些光源能够提供广谱的光线，覆盖紫外到可见光波段。
样品室是紫外可见分光光度计中的一个重要组件，用于容纳样品溶液。
样品室通常是一个透明的石英或玻璃室，能够使光线通过并与样品作用。
光栅是紫外可见分光光度计中的一个关键组件，用于分散光线并选择特定波长的光。
光栅通常是一个反射式光栅，由许多平行的凹槽组成。
当光线通过光栅时，不同波长的光会被分散成不同的角度，从而实现波长选择的功能。
光电探测器是紫外可见分光光度计中的另一个关键组件，用于测量透射光的强度。
常用的光电探测器包括光电二极管（photodiode）和光电倍增管（photomultiplier tube）。
光电探测器将透射光转换为电信号，并传送给信号处理器进行处理和显示。
信号处理器是紫外可见分光光度计中的一个重要部分，用于接收和处理光电探测器传输的电信号。
信号处理器通常包括放大器、滤波器和数据记录设备。
放大器用于放大光电探测器输出的微弱电信号，滤波器用于滤除噪声和干扰信号，数据记录设备用于记录和显示测量结果。
使用紫外可见分光光度计进行测量通常需要先进行基线校准。
基线校准是通过测量空白溶液（即不含目标物质的溶液）来确定仪器的零点。
校准后，将待测样品溶液放入样品室中，选择适当的波长和测量模式，然后测量透射光的强度。
紫外可见分光光度计使用指南
紫外可见分光光度计使用指南紫外可见分光光度计（UV-Vis spectrophotometer）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析仪器。
本文将为您详细介绍紫外可见分光光度计的使用指南，旨在帮助您正确操作和掌握这一仪器。
一、仪器简介紫外可见分光光度计主要由光源系统、样品室、光栅系统、检测器以及数据处理等部分组成。
其中光源系统提供所需的可见光和紫外光源，而样品室则是放置待测样品的空间。
此外，光栅系统用于分光，检测器用于检测光的强度变化，而数据处理则是对光谱进行处理和分析。
二、准备工作1. 确保仪器处于水平放置，并连接好电源和通电。
2. 打开仪器软件，并确保与电脑连接正常。
3. 清洁样品室，确保无尘和杂质，并待样品室干燥后再使用。
4. 校准仪器，以确保准确的测量结果。
三、测量操作步骤1. 软件选择：在电脑上的仪器软件上选择适当的测量模式，比如吸光度或者特定波长测量模式。
2. 光程设定：根据测量样品的类型和浓度，设置合适的光程。
3. 参考峰设定：使用纯溶剂或空白试样设定参考峰，以进行准确的吸光度测量。
4. 样品处理：将待测样品制备好，确保样品质量、浓度和体积的准确性。
5. 样品吸收测量：将样品放置于样品室中，点击软件“开始测量”按钮，记录吸光度的数值。
6. 数据处理：对测得的吸光度数据进行处理和分析，如绘制吸光度-波长曲线等。
四、注意事项1. 避免污染：使用洁净的试剂和仪器操作，避免样品和试剂污染，以免影响测量结果。
2. 防护措施：避免将有害物质接触到皮肤、眼睛或吸入，注意个人防护。
3. 清洁仪器：测量结束后，及时清洁仪器，保持仪器的良好状态。
4. 保养维护：定期进行仪器的保养和维护，如更换灯泡、校准光程等。
5. 数据备份：重要的测量数据需及时备份和存档，以防数据丢失。
五、故障排除1. 仪器无法通电或启动：检查电源和插线是否正常连接，确保电源供应稳定。
2. 光谱异常或不稳定：检查光源是否需要更换，清洁样品室和光栅，确保光谱信号正常。
紫外可见分光光度计的介绍
紫外可见分光光度计的介绍
紫外可见分光光度计，是一种用于测定液体、气体、固体在紫外光、可见光区域内吸收或透过率的光学仪器。
它可以精确测量样品的吸光度、透过率、反射率等参数，应用于生化、化学、医药、环境、食品等领域的分析和检测。
紫外可见分光光度计的原理是将一束光线经过分光镜拆分成多个波长的光线，经过样品后，样品会吸收或透过部分光线，被干涉光谱仪接收，并将其转换成电信号。
通过测量样品与参照物（空气或去离子水）之间的比较读数，计算出样品的吸光度值。
紫外可见分光光度计的主要特点是：准确性高、灵敏度高、重复性好、分辨率高、操作简单、数据处理快速等。
根据使用范围和波长范围的不同，紫外可见分光光度计可以分为紫外分光光度计、可见分光光度计和紫外可见分光光度计。
紫外可见分光光度计具有广泛的应用。
在生物学领域，可以用于蛋白质、核酸、酶、细胞器等的测定；在医学领域，可以用于药物、体液等的检测；在环境保护领域，可以用于水质、大气污染等的监测；在食品工业中，可以用于食品添加剂、营养成分、产物残留等的检测。
除此之外，紫外可见分光光度计还可以与色谱仪、电泳仪等联用，提高对样品的准确测定，从而满足更高的实验需求。
总之，紫外可见分光光度计是一种重要的实验仪器，具有广泛的应用和推广前景。
它不仅能够提高实验效率和准确度，还可以为相关领域的研究和探索提供重要的技术支持。
第三节课紫外-可见分光光度计
利用UV-Vis吸收光谱法进行化合物的定性鉴 别，一般采用对比法。
➢1．比较法 通常以未知纯试样的紫外吸收光谱图与标准纯试样 的紫外吸收光谱图，或与标准紫外吸收光谱图比较 进行定性。
对比吸收光谱的特征数据（max、max） （在相同溶剂中）
对比吸收光谱的一致性max、 max、峰形均须一致
(1) Woodward-Fieser经验规则
可用于计算共轭烯烃及，-不饱和羰基化合物的 *跃迁的最大吸收波长，计算时以母体生色团 的最大吸收波长λmax为基数，再加上连接在母体 π电子体系上的不同取代基助色团的修正值。
升级版本：
母体是异环的二烯烃或无环多烯烃类型
λ/nm
基数 217
母体是同环的二烯烃或这种类型的多烯烃
基数 253
（注意：当两种情形的二烯烃体系同时存在时，选择波长较长的为其母体系 统，即选用基数为 253nm）
器
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
示
吸收 池
二、基本部件
1、光源
作用：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱 要求: 具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使
用寿命。 可见区：白炽光源如钨灯或碘钨灯
波长范围 320~2500nm 紫外区：气体放电灯，如低压直流氢放电灯或
氘放电灯 波长范围 180~375nm 因玻璃对紫外光有吸收，所以应用石英窗
27
28
(2) Scott经验规则
它用于计算苯甲酸、苯甲醛或苯甲酸酯等芳 香族羰基衍生物R－C6H4－COX的λmax 。计算方 法与伍德沃德规则相同。
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2.对共轭体系延长的问题
共轭体系的延长就是在母体的基础上, 每增加一个 共轭双键, 其修正值加30 nm。常见错误是认为除了 母体以外, 只要有双键就要算作共轭体系的延长, 而 忽略了双键必须和母体形成共轭体系。
紫外可见分光光度计原理及应用
紫外可见分光光度计原理及应用紫外可见分光光度计是一种常用的光谱仪器，主要用于测量样品溶液的吸光度。
它利用紫外可见光的吸收特性来分析物质的结构和浓度，并在化学、生物、药学和环境监测等领域有广泛的应用。
紫外可见分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律和兰伯特-比尔定律。
紫外可见分光光度计的工作原理是利用可见光和紫外光穿过溶液时，溶液中的分子或离子会吸收特定波长的光线。
光的吸收会使得光通过溶液的强度减弱，即溶液中的吸光度增加。
光度计测量的就是经过溶液前后的光强度差值，也就是吸光度。
从而根据吸光度的变化来推断溶液中所含的分析物的浓度或结构。
紫外可见分光光度计可以在190nm至1100nm的波长范围内测量光强度的变化。
常用波长为190nm至800nm之间。
紫外可见分光光度计的光源通常是一束连续的白光，经过光栅或棱镜分散成不同波长的光束，然后通过一个进样室和样品溶液接触。
样品溶液会吸收特定波长的光，其余波长的光会通过样品溶液，最后被一个光敏探测器接收。
光敏探测器会将光信号转换成电信号，并转化成数字信号通过计算机处理。
应用方面，紫外可见分光光度计广泛应用于化学、生物、药学和环境监测等领域。
在化学领域，它可以用于分析溶液中化合物的浓度，并用于酸碱度的测量。
生物领域常用紫外可见分光光度计来测量DNA和蛋白质的浓度，以及酶促反应的速率。
在药学领域，它用于药物的质量控制，测量药物和其他添加剂在制剂中的含量。
在环境监测领域，紫外可见分光光度计被用于测量水体和大气中污染物的浓度，如有机物、重金属和氮浓度等。
总之，紫外可见分光光度计利用吸光度的测量原理，能够准确测量样品溶液中特定波长的光线的吸收程度，从而推断出溶液中所含的分析物的浓度或结构。
它在化学、生物、药学和环境监测等领域中都有重要的应用价值，并在科学研究和工业生产中发挥着重要的作用。
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可/可见分光光度计
紫外光 紫外光区：200~400nm 比色皿材质：石英 紫外光区光源：氘灯或氢灯 可见光区：400~800nm 比色皿材质：玻璃\石英 可见光区光源：钨灯 朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其数学表示式如下： A=KbC A：吸光度，描述溶液对光的吸收程度； K：摩尔吸光系数，单位L•mol-1•cm-1； b：液层厚度，通常以cm为单位； C：溶液的摩尔浓度，单位mol•L-1; 1.光源：在整个紫外光区或可见光区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 2.单色器：是将光源辐射的复合光分成单色光的光学装置。是分光光度计的心脏部分。一般由夹缝、色散元件及透镜系 统组成。其中，最关键部分为色散元件。 3.吸收池：用于盛装试液的装置。吸收材料必须能够透过所测光谱范围的光。规格有0.5、1.0、2.0、3.0、5.0cm。分 析测定时，比色皿要经过配套性检验合格后才能投入使用。比色皿配套性的要求：两两比对，测定值≤0.005A 4.检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电管、光电倍增管、光电二极管、光电 摄像管等。 要求：灵敏度高、响应时间短、噪声水平低、稳定性好。 5.显示器：将监测器输出的信号放大并显示出来的装置。 常用的液晶数字指示窗口和计算控制显示。