紫外可见分光光度计的校正
紫外可见分光光度计的校正
紫外可见分光光度计的校正一、仪器概况名称：T6紫外可见分光光度计编号：05073厂家：北京普析通用仪器有限责任公司型号：T6新世纪二、仪器结构光源、单色器、样品吸收池、检测器和信号显示系统。
三、实验项目1、仪器波长准确度的检验和校正（1）粗检在吸收池位置插入一块白色硬纸片，调节波长按钮，从720nm 慢慢调至420nm,每隔10nm观察并记录出口狭缝射出的光线颜色。
与书P51做比较（2）细检a.在吸收池内垂直放入镨钕滤光片，以空气为参比。
调节波长为500nm，仪器调零后，将镨钕滤光片置于光路上，读取吸光度值。
从500nm到540nm波段每隔2nm测一次吸光度值，记录各吸光度值和相应的波长标示值，找出吸光度值最大时相应的波长标示值，当(入max-529)<3nm时，为合格注意：每改变一次波长，都应重新调空气参比的零点。
b.在吸收池滴三滴液体苯，盖上吸收池盖，以空气做参比，从波长230nm调至260nm,每隔2nm测一次吸光度值，记录吸光度值和相应的波长。
测得的结果与苯的标准光谱曲线书P64做比较。
2.光电流的稳定性检查3.吸收池的配套性检查4.皿差5.吸光度A的准确度的检验6.杂散光的检验四、实验数据处理1、仪器波长准确度的检查和校正（1）粗检波长/nm 720 710 700 690 680 670 660 650 640 630 620 颜色红红红红红红红橙橙橙橙波长/nm 610 600 590 580 570 560 550 540 530 520 510绿绿绿绿绿绿颜色橙橙黄黄黄绿波长/nm 500 490 480 470 460 450 440 430 420青蓝蓝蓝紫紫紫紫颜色蓝绿结论：经观察出口狭缝射出的光的颜色，与书P51对比相符，所以合格。
（2）细检a.镨钕滤光片500 502 504 506 508 510 512 514 516 518 520 波长/nmA 0.159 0.172 0.190 0.219 0.258 0.342 0.387 0.380 0.335 0.305 0.314522 524 526 528 529 530 532 534 536 538 540 波长/nmA 0.403 0.505 0.538 0.580 0.599 0.581 0.555 0.491 0.377 0.269 0.265结论：入max测=529nm所对应的最大吸收值是0.599，与镨钕滤光片的吸收峰的最大吸收波长在529nm处相符，（入max测-529）=0<3nm,所以合格b.苯蒸气波长/nm 230 232 234 236 238 240 242 244 246A 0.253 0.302 0.313 0.313 0.308 0.339 0.447 0.427 0.395 波长/nm 248 250 252 254 256 258 260 262A 0.606 0.436 0.396 0.641 0.374 0.318 0.483 0.321结论：入1=236nm，A1=0.313，入标1=236.4nm,△入1=0.4nm<3nm,所以合格入2=242nm,A2=0.447,入标2=241.6nm，△入2=0.4nm<3nm，所以合格入3=248nm,A3=0.606,入标3=247.1nm，△入3=0.9nm<3nm,所以合格入4=254nm，A4=0.614,入标4=252.9nm,△入4=1.1nm<3nm,所以合格入5=260nm,A5=0.483,入标5=258.9nm,△入5=1.1nm<3nm，所以合格2.光电流稳定性检查波长/nm 370 790时间11:14一11:17 11:20一11:23透射比跳动范围99.92一100.7% 99.97一99.98%结论漂移量为0.78，超过数显仪器所允许末位数变动±1，所以不合格漂移量为0.1，在数显仪器所允许末位数变动±1内，所以合格3.吸收池的配套性检查透射比/% 100.0 99.36结论△T=100.0一99.36=0.64%>0.5%,所以吸收池不配套测得皿差值为0.0025.吸光度A的准确度的检验（1）以1:100硫酸溶液做参比，测定硫酸铜溶液的吸光度。
1紫外可见分光光度计期间核查方法
1紫外可见分光光度计期间核查方法紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外可见光区域的吸光度。
在实验室中，对仪器的准确性和稳定性进行定期核查十分重要，以确保测量结果的准确性和可靠性。
以下是紫外可见分光光度计核查的方法和步骤。
1.校准仪器首先，需要使用校准溶液对紫外可见分光光度计进行校准。
选择一种已知浓度和吸光度的参考溶液，如工作曲线中的标准溶液。
在不同浓度下测量吸光度，并利用标准曲线进行校准。
确保校准过程中环境条件的稳定性，如温度、湿度等。
2.检查光源检查和确保光源的正常运行。
使用光源检测器来测量光源的强度和稳定性。
将光源放置在所需波长下进行测量，并记录测量结果。
比较测量结果与光源的规格要求，确保光源的工作正常。
3.检查检测器使用检测器标定溶液进行检测器的校准。
使用已知浓度的参考溶液，测量吸光度，并利用已知的吸光度值对检测器进行校准。
确保检测器的灵敏度和线性范围。
4.检查光学路径使用标定溶液检查和校正光学路径。
在没有样品的情况下，使用标定溶液进行测量，并根据标准吸光度值进行校正。
确保光学路径的准确性和一致性，以提高测量结果的精确性。
5.检查进样系统检查进样系统的正常运行。
确保进样系统能够正确吸取和释放样品，并且不会产生干扰或污染。
使用已知浓度的标准溶液进行进样系统的校准，以确保准确的进样和测量。
6.清洁和维护定期清洁和维护仪器，以确保仪器的性能和工作效率。
定期清洁光学元件，如光栅、镜片等，以去除灰尘和污垢。
定期校正仪器以保持其工作性能和准确性。
总结：在使用紫外可见分光光度计之前和定期使用期间，进行核查并校准仪器是保证测量结果准确性和可靠性的关键。
通过校准仪器、检查光源和检测器、检查光学路径和进样系统，并定期进行清洁和维护，可以确保仪器的正常运行和测量结果的准确性。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计在使用过程中，由于多种原因会引起波长或杂散光检定误差，导致测量结果不准确，为了得到更为准确的实验结果，必须进一步控制紫外可见分光光度计检定误差。
本文结合作者工作经验，以紫外可见分光光度计检定原理作为切入点，对常见误差来源进行分析，并对如何有效控制此类误差进行了讨论关键字：紫外可见分光光度计；检定误差；控制紫外可见分光光度计是以被测物质在不同波长范围内，对光的吸收度反应作为物质分析依据的设备。
为满足物质测量的需求，其具有高灵敏度、操作简便等特点。
紫外可见分光光度计在使用中依据JG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程，其计量性能需要满足诸多要求，包括波长误差、波长重复性、噪声与漂移、透射比重复性、基线平直度、电源电压适应性、最小光谱带宽、透射比最大允许误差，另外还包括杂散光和吸收池配套性等10项)，其中，波长最大允许误差、杂散光及透射比最大允许误差是紫外可见分光光度计评价的关键指标。
本文旨在对上述关键指标加以分析探讨。
1紫外可见分光光度计的检定1.1波长示值误差检定在波长示值误差检定中，依据规程要求通常需要对9种物质进行检定。
在日常的检定环节，一般应综合考虑携带、保存及使用的便捷性，通常选择氧化钬滤光片和错妆滤光片实施检定。
氧化钬滤光片在波长吸收峰值点上较为完整，而错钕滤光片当波长低于400nm时无吸收峰，且不会出现尖锐的吸收峰，因此在检定时需要综合两者的特点配合使用。
在具体的检定中，氧化钬滤光片适用于200～700nm波长，错钕滤光片普遍用于700～900nm波长四。
在检定实施之前，应针对波长点进行调节，将其设置为零度和满度，然后在样品光路中放置标准物质，并沿同一波长方向对标准物质实施透射比值逐步测量，以获得相应的峰值波长数据。
波长示值误差属于标准值与实测平均值间的差值，以各波段对应的波长示值误差的最大值为准。
1.2 透射比示值误差检定对照JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程要求，在透射比示值误差检定中，其标准物质包括透射比标称值分别为10％、20％，30％的光谱中性滤光片，紫外光区透射比滤光片以及重铬酸钾标准溶液等，其中，按照各波长的特点及要求，可以在检定时进行划分，如：235nm、257nm、313nm、350nm。
紫外-可见分光光度计的校正
实验一紫外-可见分光光度计的校正及使用分光光度计定性分析一、实验目的1. 了解紫外和可见光光度计的构造；2. 学会分光光度计的波长准确度和吸收池配套性检验方法；3. 了解紫外和可见光光度计的校正基本方法；4. 掌握利用分光光度计对物质进行定性分析。
二、实验学时3学时三、仪器与试剂1、仪器紫外-可见分光光度计；镨钕滤过片；容量瓶（50mL）；天平；烧杯（200mL）；2、试剂去离子水； 95%乙醇；防晒霜；苯；质量分数0.006000%重铬酸钾的0.001mol/L高氯酸标准溶液：称取已经干燥过的重铬酸钾60.00mg，移入1L容量瓶中，用蒸馏水溶解，加入1mL的1.0mol/L高氯酸，再用蒸馏水稀释溶液质量为1000.0g，避光密封保存。
四、实验原理紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对物质进行定性和定量测定。
利用紫外分光光度法对物质进行定性分析：选择合适的溶剂（非极性），使用有足够纯度单色光的分光光度计，在相同的条件下测定相近浓度的待测试样和标准品的溶液的吸收光谱，然后比较二者吸收光谱特征：吸收峰数目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置等；分子结构相同的化合物应有完全相同的吸收光谱。
紫外-可见分光光度计的主要部件包括光源、波长选择器、吸收池、检测器及测量系统等。
1. 光源：能发射所需波长范围的光的器件。
可见光源常用钨丝灯(或碘钨灯)，波长范围约为320～2500nm；紫外光源常用氢灯(或氘灯)，波长范围约为200～350nm。
2. 波长选择器：能从光源辐射光中分离出一定波长范围光的器件。
通常为滤光片、棱镜或光栅。
固定波长选择器常用滤光片，连续变化波长选择器常用棱镜或光栅。
3. 吸收池：盛放待测样品溶液的容器。
该容器应具有两面互相平行、透光且有精确厚度的平面。
按材质可分为玻璃和石英两种。
玻璃吸收池用于可见光波长范围的测定；石英吸收池用于紫外光及可见光波长范围的测定。
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程紫外可见分光光度计操作流程及校准方法紫外分光光度计就是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。
物质的吸取光谱就是物质中的分子和原子吸取了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸取光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线，可依据吸取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计认真操作流程及校准方法:一、紫外可见分光光度计光度测量在模式选择屏幕中选择 1.Photometric光度选项，将显示参数配置屏幕；用GOTOWL键设定测量波长；按F2键设定进样掌控；按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕；如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO—ZERO键，将测量值置为OABS（100%）；二、紫外可见分光光度计校正开机预热10分钟足矣；放入黑块和标样（没有的本身配），关闭盖子；校0；把灯光对着黑块，把透光度调0；把灯光对标样，将吸光度调到100%；三、参比溶液介绍参比溶液又称空白溶液。
测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相像的溶液。
通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。
有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必需保证其不影响测试。
常常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必需经过纯化将其除去。
否则将影响测定结果。
四、紫外可见分光光度计使用注意事项1.开机前应先预热15分钟，然后开机自检；2.湿度要掌控在75%左右，温度在5～30度之间；3.仪器要稳压电源，接地要好。
并且避开阳光直接照射；5.常见故障及处理方法：光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭；透过率“100%”旋到底了。
紫外可见分光光度计技术与检定
紫外可见分光光度计技术与检定1. 引言1.1 紫外可见分光光度计技术与检定概述紫外可见分光光度计是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域。
它利用紫外可见光谱的原理，通过测量物质对不同波长光的吸收和透射来确定样品的浓度和性质。
紫外可见分光光度计具有操作简单、结果快速、精确度高等优点，被广泛用于质量控制、环境监测、医药研究等领域。
在使用紫外可见分光光度计时，检定是至关重要的环节。
检定可以确保仪器的准确性和可靠性，保证实验结果的准确性和可重复性。
紫外可见分光光度计的检定方法包括校准、线性检定、精密度检定等，其中线性检定和灵敏度检定是常见的检定项目。
紫外可见分光光度计技术与检定的发展一直致力于提高仪器的测量精度、降低测量误差、扩大适用范围。
随着科学技术的不断进步，紫外可见分光光度计在分析检测领域的应用越来越广泛，未来有望在生物医药、食品安全、环境监测等方面展现更多的应用前景。
2. 正文2.1 紫外可见分光光度计技术原理紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析仪器，可以通过测量样品对不同波长的光的吸收程度来确定物质的浓度或结构。
其原理主要是基于比尔-朗伯定律和光谱吸收原理。
在紫外可见光区域，物质分子吸收特定波长的光能量，导致电子跃迁至更高的能级，这种吸收现象随着波长的变化而变化，形成特征光谱。
分光光度计通过将光源发出的连续光谱分解成单一波长的光，经过样品后再通过检测器检测透过的光强度，从而得到样品的吸收光谱。
紫外可见分光光度计的工作原理可以简单描述为：光源发出的光经过单色器选择特定波长的光，然后通过样品后到达检测器，最后转换成电信号。
根据比尔-朗伯定律，吸光度与溶液中物质浓度和溶液厚度成正比，因此可以通过吸光度值推导出物质的浓度。
总的来说，紫外可见分光光度计技术原理是基于物质对特定波长光的吸收特性，通过测量吸收光谱来分析样品中物质的浓度或结构。
这一原理为化学分析提供了重要的工具，广泛应用于各个领域的科学研究和工程实践中。
紫外可见分光光度计的波长的校正
紫外可见分光光度计的操作规程1．调整（1）在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。
（2）将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）。
调波长调节器至所需波长。
（3）开启电源开关，指示灯亮，选择开关置于“T”，调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右，预热20min .2．校正（1）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），调节[0% T]旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上吸收池盖，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光率[100% T] 旋钮，使数学显示为“100.0”。
（2）如果显示不到“100”，则可适当增加电流放大器灵敏度档数，但应尽可能使用低档数，这样仪器将有更高的稳定性。
当改变灵敏度后必须重新校正“0”和“100”。
（3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后，如将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使数字显示为“.000”，即可进行下面吸光度A的测量4．结束测量完毕，关闭电源，将各调节旋钮恢复至初始位置。
取出吸收池洗净，晾干，存于专用盒内。
注意事项：（１）使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋钮之功能。
（２）仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。
（３）如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可工作。
（４）仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。
（５）当仪器停止工作时，关掉电源，电源开关需同时切断，并罩好仪器。
紫外可见分光光度计噪声和漂移方法
紫外可见分光光度计噪声和漂移方法紫外可见分光光度计是基于物质对紫外-可见光谱区的光选择性吸收特性而设计的精密光学仪器。
它通过测量样品对特定波长光的吸收程度，来推断出样品的浓度或其他化学性质。
然而，在实际应用中，由于仪器本身、环境因素以及操作条件等多种原因，分光光度计的测量信号往往会受到噪声和漂移的干扰，从而影响测量结果的准确性。
因此，对紫外可见分光光度计的噪声和漂移进行深入研究，并找到合适的校正方法，对于提高仪器的性能具有重要意义。
一、紫外可见分光光度计噪声分析1. 噪声的定义和分类噪声是指与有用信号无关的、随机变化的电信号。
在紫外可见分光光度计中，噪声可以分为两类：白噪声和有色噪声。
白噪声是一种具有均匀且连续频谱的噪声，其特点是在任何两个相同的时间间隔内，噪声的能量都是相等的。
有色噪声则是指频谱不均匀的噪声，它在某些频率上的能量高于其他频率。
2.噪声的来源紫外可见分光光度计中噪声的来源主要有以下几个方面：(1)光源噪声：由于光源本身的不稳定性，如光源老化、灯丝振动等，会导致光强发生随机变化，从而产生噪声。
(2)光电探测器噪声：光电探测器在将光信号转换为电信号的过程中，会不可避免地引入噪声，如热噪声、散粒噪声等。
(3)电路噪声：仪器的电路中，由于电阻、电容等元件的热运动，会产生热噪声。
(4)环境噪声：如电磁干扰、机械振动等外部环境因素也可能引入噪声。
3.噪声对测量的影响噪声会使分光光度计的输出信号产生随机波动，从而降低信号的信噪比（SNR），影响测量结果的准确性。
特别是在低浓度样品的测量中，噪声的影响尤为显著。
二、紫外可见分光光度计漂移分析1. 漂移的定义漂移是指仪器在稳定条件下，输出信号随时间发生的缓慢而无规则的变化。
在紫外可见分光光度计中，漂移通常表现为基线的不稳定，即在没有样品的情况下，仪器的输出信号也会发生缓慢变化。
2.漂移的来源紫外可见分光光度计中漂移的来源主要有以下几个方面：(1)光源漂移：光源长时间工作后，由于发热、老化等原因，其发射光谱和光强会发生变化，导致基线漂移。
紫外分光光度计的校正方法
紫外分光光度计的校正方法我们知道，分光光度法的最重要的一个物理化学量是吸光度。
为了获得准确的研究结果，准确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。
一般，分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。
偶然误差影响测量的精密度，可通过足够数量测量的统计处理来减少;系统误差影响测量结果的准确度，可在大体相同实验条件下，用比较一种物质的准确测量结果，使系统误差统一起来。
而分光光度计的系统误差对测量吸光度的影响是可以检查和校正的。
关于操作误差，多数情况下，通过严格按操作程序测量、仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。
关于仪器的系统误差，可通过对分光光度计的定期校正来克服，若所需准确度很高的测量，则必须天天校正。
校正内容：1.波长的准确度试验以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间误差表示，应在±1.0nm范围内。
可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正。
2.吸收度的准确度试验3.杂散光的试验4.波长重现性试验5.分辨率试验吸光度的校正方法：校正吸光度常用一很纯物质一定浓度的溶液为标准，且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对，为了使标准液吸光度不受测定波长的微移动而有改变，常选择具有较平滑吸收高峰的物质，同时要求溶液稳定，且在相当的波长范围内吸收度的改变符合Beer-Lambert定律，常用硫酸铜、硫酸铵钴和硝酸钠或钾的溶液。
铬酸钾溶液是最常用的标准溶液，此溶液在紫外区和可见区均适用。
波长或波数的校正方法：可用具有窄吸收带的溶液，滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。
如果要求很高的精密度时，可用放电灯泡发射的射线来校正。
有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。
苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用，可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中，测其吸收波长，在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。
用各种稀土金属的滤光片，可以很快地校正波长，但准确度不如上述方法高。
常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。
CARY50紫外可见分光光度计校准与维护规程
GMP文件适用范围：适用于CARY50紫外可见分光光度计校准与维护职责：仪器负责人对本规程的实施负责。
内容：1、校准1.1运行确认（OQ）Cary 50型紫外可见分光光度计的运行确认包括：仪器的操作测试和校正，测试内容、测试方法和接受标准详见表1。
表1：Cary 50型紫外可见分光光度计运行确认（OQ）测试1.2性能确认（PQ）使用穿琥宁和胸腺肽溶液作为供试品，确认Cary 50型紫外可见分光光度计符合鉴别要求。
Cary 50型紫外可见分光光度计的性能确认系指重现性测试，测试内容、测试方法和接受标准详见表2。
表2: Cary 50型紫外可见分光光度计性能（PQ）确认测试1.3确认报告确认完成后，确认小组成员根据确认记录起草仪器确认报告，对确认结果进行总结，得出结论，确认报告包括以下内容：●仪器的确认总结；●安装确认、运行确认和性能确认的记录和结果；●确认支持性文件；●确认过程中的偏差及异常情况处理；● SOP的制定（包括操作、校准与维护）；●确认结论；●仪器再确认的要求。
2、维护2.1日常维护2.1.1为了延长光源的使用寿命，在使用时应尽量减少开关次数，短时间工作间隔内可以不关灯。
刚关闭的光源灯不要立即重新开启。
如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。
2.1.2要经常更换单色器盒的干燥剂，防止色散元件受潮生霉。
仪器停用期间，应在样品室和塑料仪器罩内放置防潮硅胶，以免受潮，使反射镜面有霉点及沾污。
同时选择波长应平衡地转动，不可用力过猛。
2.1.3正确使用吸收池，保护吸收池光学面。
不能将光学面与手指、硬物或脏物接触，只能用擦镜纸或丝绸擦拭光学面；不得在火焰或电炉上进行加热或烘烤吸收池。
生物样品、胶体或其他在池体上易形成薄膜的物质要用适当的溶剂洗涤；有色物质污染，可用3mol/L HCl和等体积乙醇的混合液洗涤。
2.1.4电压波动较大时，要配备有过压保护的稳压器。
2.1.5停止工作时，必须切断电源，盖上防尘罩。
仪器操作流程紫外可见分光光度计的校准程序
仪器操作流程紫外可见分光光度计的校准程序在实验室和科研领域中，紫外可见分光光度计是一种常用的检测仪器。
为了确保其测量结果的准确性和可靠性，校准程序是十分必要的。
本文将介绍紫外可见分光光度计的校准程序，包括仪器的准备，校准曲线的绘制以及实验数据的分析和处理。
一、仪器准备在进行紫外可见分光光度计的校准程序之前，首先需要进行仪器的准备工作。
具体步骤如下：1. 检查仪器是否处于正常工作状态，确保光源、检测器和其他部件的正常运行；2. 清洁样品池和光程调控装置，确保表面干净无污染；3. 进行光程校准，使用已经准确校准的样品进行调整，使得仪器光程测量的准确性得到保证；4. 清理检测器并检查其对准是否正确。
以上是对仪器进行准备的基本步骤，确保仪器能够正常运行并提供准确的测量结果。
二、校准曲线的绘制紫外可见分光光度计的校准曲线是根据已知浓度的标准溶液制备的。
通过绘制校准曲线，可以将待测样品的吸光度值转化为相应的浓度值。
下面是校准曲线的具体绘制步骤：1. 准备标准溶液，选取一系列浓度已知的标准溶液，通常为一个线性浓度范围；2. 设置紫外可见分光光度计的波长，一般根据待测物的最大吸收波长进行选择；3. 依次测量不同浓度的标准溶液的吸光度值，并记录下实验数据；4. 根据吸光度和浓度的关系，进行数据的拟合和曲线绘制。
通常使用线性回归或非线性拟合等方法，绘制出校准曲线；5. 利用校准曲线可以将其他未知浓度的样品的吸光度值转化为浓度值。
通过绘制校准曲线，可以为后续的测量提供一个准确可靠的浓度转化标准。
三、实验数据的分析和处理在使用紫外可见分光光度计进行测量时，需要对实验数据进行分析和处理。
下面是一些常用的分析和处理方法：1. 样品浓度的确定：根据校准曲线的拟合方程式，可以通过测量样品的吸光度值来计算其浓度；2. 数据校正：根据实验条件和仪器本身的特性，进行数据校正，如基线校正、空白校正等；3. 数据精度分析：通过多次重复测量同一样品，计算吸光度的平均值和标准偏差，评估测量结果的精度和可靠性；4. 异常数据处理：对于异常数据，需要进行排除或重复测量，保证实验数据的准确性；5. 结果的呈现：最终结果可以采用图表、表格等形式进行呈现，以便于数据的可视化和比较。
紫外分光光度法及uv759s紫外可见分光光度计操作规程
紫外-分光光度法及UV759S紫外-可见分光光度计操作规程*****公司GMP文件一、紫外—可见分光光度法仪器的校正和检定1 波长由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所有的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。
常用汞灯中的较强谱线237.83nm,253.65nm, 275.28nm, 296.73nm, 313.16nm, 334.15nm, 365.02nm, 404.66nm, 435.83nm,546.07nm与576.9nm；或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正，钬玻璃在波长279.4nm, 287.5nm,333.7nm, 360.9nm,418.5nm,460.0nm,484.5nm, 536.2nm与637.5nm处有尖锐吸收锋，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的变化，使用时应注意。
近年来，常使用高氯酸钬溶液校正双光束仪器，以10％的高氯酸为溶剂，配制含4％氧化钬（Ho2O3）的溶液，该溶液的吸收峰波长为241.13nm，278.10nm，287.18nm，333.44nm，345.47nm，361.31nm，416.28nm，451.30nm，485.29nm，536.64nm 和640.52nm。
仪器波长的允许误差为：紫外区±1nm，500nm 处±2nm，700nm 处±4.8nm。
2 吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。
取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。
3 杂散光的检查可按下表所列的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。
对溶剂的要求含有杂原子的有机溶剂，通常均有很强的末端吸收。
紫外、可见分光光度计仪校准作业指导书
取各段波长的δλ最大值作为该段波长的重复性。
紫外、可见分光光度计校准2020年4月1日发布
2020年4月1日实施
调整仪器的透射比为100%，扫描2min，测量图片上最大值与最小值之差（非扫描仪器计量2min内最大值与最小值），即为仪器透射比100%的噪声。
在样品光路中插入挡光板调整仪器透射比为0%，扫描2min，测量图谱上最大值与最小值之差，即为仪器透射比0%的噪声。
3.4.3 自动扫描仪器，按3.4.2要求测试透射比0%和100%噪声后，波长置于500nm处扫描30min，读出扫描图谱包络线中心线的最大值和最小值之差即为仪器的透射比100%线漂移。
3.5最小光谱带宽（校准时根据客户要求选择性做）
3.5.1具有氘灯的仪器选择氘灯的356.1nm特征谱线，没有氘灯的仪器选用汞灯546.1nm （或者253.7nm）的特征谱线，选择最小光谱带宽，按照3.
4.2方法记录氘灯或汞灯的特征谱线图谱，测量半峰宽即为最小光谱带宽。
3.6透射比最大允许误差和重复性
3.6.1 用10%，20%，30%紫外区透射比滤光片分别在235,257,313,350处测量透射比三次。
3.6.2 用10%，20%，30%的光谱中心滤光片分别在440nm，546nm，635nm处，以空气为参比，测量透射比三次。
3.6.3结果计算
3.6.4透射比重复性
3.7 基线平直度（当客户有要求时进行校准）。
紫外可见分光光度计波长校准方法
紫外可见分光光度计波长校准方法
紫外可见分光光度计是常用的分析仪器，在进行分布光谱分析等检测方面有着广泛的
应用，它的准确性对检测结果会产生重要影响。
正确的校正对灵敏度分析的准确性起着至
关重要的作用。
因此，校准是紫外-可见分光光度计的必要程序，以合格确保分光光度计
读数的正确性。
紫外可见分光光度计波长校准的主要步骤是：校准溶液的配置、滤光片的选择、光路
的调整、滤光片的校准和波长的校准等。
1、校准溶液的配置：首先，根据实验要求，选择恰当的校准溶液，如金属离子、二
价离子、有机溶剂等，确定校准溶液的浓度，按规定的容量将溶液放入校准槽中。
2、滤光片的选择：接下来，根据紫外可见分光光度计的波长特性，选择合适的过滤片，安装在光路镜头上。
3、光路的调整：然后，紫外可见分光光度计的工作状态和校准曲线应满足实验要求，如输出电压、光照度等，要确保谐振腔的运行平稳，并为校准曲线所需的各种噪声参数提
供良好的设置条件。
4、滤光片的校准：接下来是滤光片的校准，先将分光光度计仪器放置校准光源，调
整好准确性曲线，控制好滤光片的偏移，并使用校准光源重复多次测量，一旦滤光片偏移
量太大，就要重新调整滤光片，确保校准曲线准确。
5、波长的校准：最后，使用专用的全息校准曲线，根据测量结果确定曲线的准确度，再调整分光光度计的波长，以确保测量的准确性。
总之，紫外可见分光光度计的波长校准是重要的保证检测结果准确的必要过程，必须
严格按照上述步骤进行校准，以免影响检测结果的准确性。
紫外可见分光光度计线性范围的校准
化学分析计量CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE第28卷，第3期2019年5月V ol. 28，No. 3May 2019107doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2019.03.027紫外可见分光光度计线性范围的校准黄彬磊，吴成新，孙凤，朱佳奇(上海市质量监督检验技术研究院，上海 201114)摘要 建立紫外可见分光光度计线性范围的校准方法。
通过实验对紫外可见分光光度计线性范围的校准进行研究，提出了相应的校准方法和技术指标。
采用重铬酸钾标准物质进行校准，测量波长为257 nm 。
线性范围下限不大于1.0×10–3 mg ／mL ，线性范围上限不小于0.10 mg ／mL 。
该校准方法覆盖了JJG 178–2007 《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》 中没有覆盖的吸光度范围，能够实现紫外可见分光光度计全范围吸光度的计量校准。
关键词 紫外可见分光光度计；线性范围；校准；吸光度中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2019)03–0107–04Calibration for the linear range of UV–visible spectrophotometersHUANG Binlei, WU Chengxin, SUN Feng, ZHU Jiaqi(Shanghai Institute of Quality Inspection and Technical Research ， Shanghai 201114， China)Abstract Establish a calibration method for the linear range of the UV–visible spectrophotometer. The calibration of the linear range of the UV–visible spectrophotometer was studied by experiments, and the corresponding calibration methods and technical specifications were proposed. The potassium dichromate standard sample was used in the calibration method with the measurement wavelength of 257 nm. The lower limit of the linear range was not more than 1.0×10–3 mg ／mL, and the upper limit of the linear range was not less than 0.10 mg ／mL. The calibration method covers the range of absorbance not covered by the JJG 178–2007 “Verification Regulation of Ultraviolet, Visible, Near–infrared Spectrophotometers ”, which enables the calibration of the full range absorbance of the UV–visible spectrophotometer.Keywords UV–visible spectrophotometer; linear range; calibration; absorbance1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)首次将朗伯–比耳定律应用于定量分析化学领域，由此诞生了第一台比色计。
紫外可见分光光度计校验程序
紫外可见分光光度计校验程序1主题内容本标准规定了TU-1800SPC紫外可见光分光光度计校验程序。
2适用范围本标准适用于在本公司使用中和维修后待校验的TU-1800SPC紫外可见光分光光度计。
3职责工程部计量管理员：负责到校验期限的仪器的校验协调工作。
校验人员：由法定检测机构的校验人员，进行该仪器的性能检定，并出具有效的检定合格证书（或检定结果通知书）。
4内容4.1外观检查检查仪器各部分组装是否符合要求，联接是否正确，安装环境对仪器工作有无影响等。
4.2各性能指标检测4.2.1波长准确度与重复性检测仪器波长准确度指标为±0.5nm，波长重复性指标为0.2nm。
用光谱测量功能设定参数：扫描参数、速度（中速）、采样间隔（0.1）、能量条件（D 灯，增益5-6）、波长范围（660-480nm）、纵坐标范围（0-100）、仪器参数、光谱带宽（2.0nm）。
然后重复扫描3次，并作峰值检出，氘灯的两个峰标准值为656.1nm和486.0nm。
4.2.2基线平直度检测测试时，用光谱测量功能设定测量参数如下，测光方式（Abs）、扫描速度（慢速）、采样间隔（1nm）、波长范围（1100-200nm）、纵坐标范围（-0.01-0.01）、光谱带宽（2.0nm）。
首先进行基线校正，然后设定波长范围为1100-200nm，进行光谱扫描。
利用查看功能的读光谱图功能的读取曲线的吸收度值，其最大吸收度应符合基线平直度要求。
4.2.3稳定性检测启动仪器，将测试样品放入样品室，进行各指标性能运行，观察其变化，符合<0.002A/h(2nm带宽，500nm处)，则合格。
4.2.4暗电流校正当样品池中插入黑挡块时，透过率为0，选择“应用”菜单“暗电流校正”项，仪器即自动进行暗电流校正。
4.3性能确认由校验人员将测试结果与标准进行比较，确认其是否合格。
4.4校验结果处理4.4.1经校验合格的仪器，由法定校验检测机构出具检定合格证和发放检定合格标志，并由计量管理员贴在仪器的明显位置。
紫外可见分光光度计的操作和使用
紫外可见分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、药物等领域的实验仪器，它可以用来测量样品对紫外和可见光的吸收情况，从而得到样品的吸光度和浓度等重要参数。
在科研实验室和生产现场中，紫外可见分光光度计的操作和使用技巧非常重要，正确的操作可以确保实验结果的准确性和可靠性。
下面将介绍紫外可见分光光度计的操作和使用方法：一、准备工作1.1 样品的制备：首先要准备好需要测量的样品，确保样品的制备符合实验要求，并且样品溶液的浓度和透明度在光度计测量范围内。
1.2 仪器的准备：打开紫外可见分光光度计的电源，将仪器预热至稳定的工作温度，同时检查仪器的灯泡和光栅等部件是否正常。
二、测量操作2.1 校准仪器：在进行测量之前，必须对仪器进行校准，保证测量结果的准确性。
2.2 装样品：将样品溶液分别加入光度计的比色皿或石英比色皿中，注意不要留下气泡或杂质。
2.3 设定参数：根据样品的特性和测量要求，设定光度计的波长、光程和测量范围等参数。
2.4 测量数据：开始测量之后，观察样品的吸光度变化曲线，并记录下稳定的吸光度数值。
三、数据处理3.1 计算浓度：根据测得的吸光度数值，使用比色法或标样法计算出样品的浓度。
3.2 分析结果：根据测得的数据，分析样品的吸收特性和浓度变化规律，得出实验结论。
四、仪器维护4.1 清洁保养：每次使用完毕后，要及时清洁光度计的仪器和光学部件，确保仪器的稳定性和精度。
4.2 故障排除：如果在使用过程中发现仪器出现故障或异常，及时进行故障排除和维修处理。
五、注意事项5.1 防止污染：在操作过程中要注意避免样品污染或交叉污染，确保测量结果的准确性。
5.2 安全操作：使用化学药品和致癌物质时，要做好个人防护，避免对身体造成伤害。
通过以上对紫外可见分光光度计的操作和使用方法的介绍，相信大家对这一实验仪器有了更加深入的了解。
正确的操作和使用方法可以帮助科研人员和实验人员获得准确可靠的实验数据，为科学研究和生产实践提供有力支持。
紫外可见分光光度计的波长校准
紫外可见分光光度计的波长校准
紫外可见分光光度计的波长校准是一种常见的测量技术，现在通常用于实验室测量和监控，用来准确测量涉及各种化学物质的样品。
它可以测量样品中特定元素或物质的含量，测量细微的变化，确定化学反应前后的产物，甚至判断实验室装置是否发生紊乱。
波长校准中用到的一个重要技术是光谱定标，它是指测量时，使用光谱仪和分光仪在可见波长范围内来校准可见分光光度计，以便更快更容易地得到准确的测量值。
校准前，首先要确定测量的范围和精度，然后把可见波长的样本与校准标准放在同一种真空管里，两个参照物组成一个真空腔，称作标定电路。
经过测量，可以得出光的吸收频率以及波长的精确度，校准完毕后，测量就可以靠可见分光光度计得到准确的测量值了。
紫外可见分光光度计的波长校准是将紫外可见分光光度计与校准标准组合，以使测量更准确，提供更准确的实验数据，在各种实验环境中是十分重要的。
只有通过正确的光谱定标，才能确保测量可靠准确，可以更好地应用于各种实验和研究用途，取得更有价值的结果。
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程
岛津UV-2550紫外可见分光光度计操作规程岛津UV—2550紫外可见分光光度计操作规程一、仪器主要指标及结构波长范围（nm）:190～900，双光束二、操作规程1、开机及仪器自检打开紫外光度计的电源，开启电脑，点击“UV Probe”图标，点击页面下端的“连接”，等待仪器自检（全部指标变绿）。
2、扫描光谱⑴．点击“光谱模块”图标而选定光谱模块。
⑵．点击“基线校正”进行基线校正。
⑶．点击“编辑”烦人“方法”选项，或点击“方法图标”显示光谱方法的对话框。
⑷．设置波长范围。
开始：X X Xnm 结束：X X X240nm扫描速度：中采样间隔：1.0nm⑸．点击“仪器常数”标准，在测试目录中选“吸收”，然后点击“确定”。
⑹．点击“开始”仪器开始扫描光谱，然后点击“确定”。
⑺．点击“峰值检测”图标，显示峰值数据。
⑻．点击“数据打印”图标，显示各波长吸收度。
（记下每隔10nm的数据。
）3、吸光度测定⑴．选定光度测定模块：点击“光度测定”图标。
⑵．选定常数：点击“编辑”的“方法”选项，波长设“X X X nm”，单机“加入”。
点击“校准”选项，设定类型为“多点”，WL1选择“X X X”，然后点击“关闭”。
⑶．输入样品信息：点击“标准表”，输入标准样品“ID,浓度”后按“回车键”，点击“读取Std”，就显示出测定结果的吸光度。
重复以上步骤至标准曲线绘制完成。
点击“样品表”，输入样品“ID”后按“回车键”，点击“读取UNK”，就显示出测定结果烦人吸光度。
⑷．点击“保存”，输入“X X X X”文件名保存。
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实训二紫外可见分光光度计的校正
一、实训目的
1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。
2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。
3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。
二、仪器与试剂
1、仪器：紫外-可见分光光度计，石英吸收池（1cm），容量瓶（1000m1），烧杯。
2、试剂：0.0600g→1000ml的K2Cr2O7的硫酸标准溶液（0.005mol/L），NaI溶液（10g/L），NaNO2溶液（50g/L）。
三、实训原理
紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器，备有钨灯及氢灯两种光源，可用于可见及紫外光区。
它是具有色散能力较高的单色器，狭缝可调，可得到较纯的单色光，适用于定性鉴别和定量分析。
新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。
仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。
四、实训操作
1、吸收池配对性试验
每次测定前，应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。
两个吸收池透光率T相差应＜0.5％。
2、波长准确性与重现性
校验波长是否准确，可用谱线校正法。
在吸收池中置一白纸挡住光路，转动波长至486nm附近，遮光观察白纸上蓝色斑。
轻微移动波长，至使此蓝色光斑最亮时止。
根据调整的波长范围观察所得到的相应颜色，并进行对比核对，判断波长的准确性。
3、吸收度的准确性与透光率重现性
在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位器的精度可达到0.2％，但是，由于其他原因，例如电压变化等，实际测得的透光率误差大于0.2％。
一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5％。
透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对，常用的是重铬酸钾。
取在120℃干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg，精密称定，用H2S04溶液(0.005mol／L)溶解并稀释至1000ml，摇匀。
按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。
将测得的吸光度，计算出其吸光系数，取平均值与表中规定值核对，如相对偏差在土1％以内，则透光率准确性好。
K2Cr2O7的H2S04溶液（0.005mol／L)的E cm1%
透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行，即在固定波长、溶液浓度以及狭
逢宽度等仪器工作条件下，多次测量透光率，观察各次测量值的差异。
4、杂散光
（1）用浓度为10g/L的NaI水溶液，1cm石英吸收池，蒸馏水作参比，于220nm波长处测量溶液的透光率。
（2）用浓度为50g/LNaNO2水溶液，lcm石英吸收池，蒸馏水作参比，于380nm波长处测量溶液的透光率。
其透光率应符合下表中的规定（注意：检查杂散光应在校正波长以后进行）。
测量杂散光时规定的透光率值
五、数据处理
1、吸收池配对
（规定T＜0.5％）
2、吸收度的准确性与透光率重现性测量值
（规定准确性误差±0.7%，重现性误差≤0.3%）
3、杂散光
(规定T＜0.8％)
六、注意事项
1、玻璃吸收池只适用于320nm以上及可见光区；石英吸收池适用于紫外光和可见光区。
2、石英吸收池毛玻璃面上方有箭头表示方向。
每次测定时，样品吸收池与空白吸收池
的方向应保持一致。
3、配制K2Cr2O7溶液，应避免还原性杂质及对紫外光有吸收的杂质存在，所用溶剂应为蒸馏水。
七、思考题
1、如何正确使用紫外-可见分光光度计？石英吸收池为什么标有箭头？
2、石英吸收池使用前应如何处理？使用中应如何保护？出师表
两汉：诸葛亮
先帝创业未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此诚危急存亡之秋也。
然侍卫之臣不懈于内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。
诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。
宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。
若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。
侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是以先帝简拔以遗陛下：愚以为宫中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。
将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰“能”，是以众议举宠为督：愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。
亲贤臣，远小人，此先汉所以兴隆也；亲小人，远贤臣，此后汉所以倾颓也。
先帝在时，每与臣论此事，未尝不叹息痛恨于桓、灵也。
侍中、尚书、长史、参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也。
臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。
先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。
后值倾覆，受任于败军之际，奉命于危难之间，尔来二十有一年矣。
先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。
受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故五月渡泸，深入不毛。
今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，攘除奸凶，兴复汉室，还于旧都。
此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。
至于斟酌损益，进尽忠言，则攸之、祎、允之任也。
愿陛下托臣以讨贼兴复之效，不效，则治臣之罪，以告先帝之灵。
若无兴德之言，则责攸之、祎、允等之慢，以彰其咎；陛下亦宜自谋，以咨诹善道，察纳雅言，深追先帝遗诏。
臣不胜受恩感激。
今当远离，临表涕零，不知所言。