芦丁检验方法
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A.1芦丁含量的测定 A.1.1 试剂和溶液
a) 甲醇:色谱级 b) 1%的冰醋酸溶液 c) 芦丁标准品 A.1.2 仪器和设备
高效液相色谱仪,带紫外检测器。 A.1.3 参考色谱条件
a) 色谱柱:C18柱,或其他等效的色谱柱。
b) 流动相:甲醇:1%冰醋酸溶液=32:68,用 0.45µm 滤膜过滤后备用。 c) 进样量:10µL 。 d) 检测波长:257nm 。 A.1.4 分析步骤 A.1.4.1 标准品的制备
精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量,加甲醇制成每1mL 含0.1mg 的溶液。 A.1.4.2 试样液的制备
精密称定样品10mg ,置100mL 容量瓶中,加适量的甲醇,超声溶解30分钟,冷却后用甲醇稀释至刻度,摇匀,过滤后上样。 A.1.4.3 测定
分别精密吸取标准品溶液和试样液各10µL ,注入液相色谱中,记录色谱图。重复进样两次。 A.1.5 结果计算
根据供试品与标准品的峰面积与浓度的比值,计算试样中含芦丁的百分含量。
P C
A C A ⨯⨯⨯11
…………………………(A.1) 式中:
C 1——标准品的浓度,mg/mL ; A ——试样的峰面积值,mV ; C ——试样的浓度,mg/mL ; A 1——标准品的峰面积值,mV ; P ——标准品的百分含量。
1、色谱柱:C
柱;
18
2、检测波长:350nm;
3、流速:1.0 mL/min;
4、流动相
先配制0.5%磷酸水;
A:50 mL乙腈加入磷酸水至1 L;
进样:10μl
称样量:取25mg标准品用80%甲醇溶解定容至50ml,微孔滤膜过滤后取滤液进样。