肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析

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ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ｎｔｓｒｓａｃＩｈｉｅｅｒｈ，ｗｅｃｎｓｒｃｅｕｋｒｏｔｃｘｅｓｏｎｐａｍｉｆＦａｓｉｌｐａｔｃＧＳＴｎｎｎａｙｚｄｏｔｕｔｄｅａｙｉｅｐｒｓｉｌｓｄｏｃｏａｈｅｉａｇｅｅａｄａｌｅｔｍｍｕｎｅｃｔｅｏｂｉｎｔｒｔｉ．ＴｈｅｇｌｔｔｉＳｔａｆｒｓＧＳＴ）ｇｅｏｈｅｉｏｇｎｉｉｙｏｆｒｃｍｎａｐｏｅｎｕａｈｏｎｅ－ｒｎｓｅａｅ（ｎｅｆＦ．ｈｅｐａｔｃｐｌｙｅｔｉｐｏｔｎｙｉａａｄｈｅｍｒａｔｐｒｔｃｉｅｒｅａａｉｔｔｏｍｓｉｆｃｉ．ＩｈｉｅｅｃＧＳＴａｍｐｌｆｅｏｅｔｖｏｌｇｎｓｈｅｗｒｎｅｔｏｎｎｔｓｒｓａｒｈ，ｗｓａｉｉｄｂｙＰＣＲｒｆｏｍｈｅｐｔＥＴ３０ — ａＦｈＧＳＴ，ａｄｔｅｎ— ｎｈｎｉ
重组质粒ｐＴ３ａｈＳ为模板，用ＰＲ技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽转移酶基因（Ｔ）连接真核表达载体ｐＧＰＥ０— ＧＴＦ利ＣＧＳ，ＥＦ— Ｎ１构建重组质粒ｐＧＰＧＳ转染Ｈｅ，ＥＦ－Ｔ，ｌ胞，光显微镜下观察绿色荧光，ｅｔｒｌｔｇ检测重组蛋白表达情况。结ａ细荧Ｗｓｅｎｂｏｉｔｎ果重组质粒ｐＧＦ — Ｓ在Ｈｅａ细胞中获得了表达，ｅｔｒｌｔｉＥＰＧＴｌＷｓｅｎｂｏｔｇ结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感ｎ
冉旭华，晓波，闻王春仁，娣孙中武，晓娟，刘，李王密
摘要：目的构建肝片吸虫谷胱甘肽转移酶（Ｔ）ＧＳ的真核表达载体，究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的研
中国人兽共患病学报
２１１，２７（１Ｏ１）
ＣｈｉｅｅＪｕｒ１ｏｎｓｎａｆＺｏｏｓｓｏｎｏｅｉ０５０
文章编号：０２６４２１）１０５３１０ —２９（０Ｔ真核表达载体构建及重组蛋白活性分析＊Ｓ
中图分类号：３３２文献标识码：￥８．Ａ
ＣｏｔｕｔｏｎｅｋａｙｔｃｅｐｅｓｏａｍｉｆＦａｃｏｌｅｎｓｒｃｉｎｏｕｒｏｉｘｒｓｉｎｐｌｓｄｏｓｉａｈｐａｔｃｉａ
（．ｒｈａｔｒｓｒｉｅｓｔ，ＨｅｌｎＪａｇＡｃｒｅｙｏｒｃｌｕａｃｅｃｓ，Ｈａｂｎ１０３１ＮｏｔｅｓｅｔｙＵｎｖｒｉｙＦｏｉｏｇｉｎａｄｆＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅｅｒｉ００，Ｃｈｎ５ｉａ；２ＣｏｌｇｆＡｎｍａｉｎｅａｄＴｃｎｌｇ．ｌｅｅｏｉｌＳｃｅｃｎｅｈｏｏｙ，ＨｅｌｎＪａｇＢａｉｉｏｇｉｎｙＡｇｒｃｌｕａｉｅｓｔｉｕｔｒｌＵｎｖｒｉｙ，Ｄａｉｇ１３１，Ｃｉａ）ｑｎ６３９ｈｎ
染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫ＧＳ真核表达载体构建成功，核表达产物可与自然感染的Ｔ真
山羊阳性血清发生特异性反应，有生物学活性，做为分子疫苗的候选进行进一步的研究具可关键词：片吸虫；Ｓ基因；核表达；性分析肝ＧＴ真活
ＧＳｇｎｅａｎａｙｉｎｒｃｍｂｎａｏｅｎＴｅｎｄａｌｓｓｏｅｏｉｎｔｐｒｔｉ
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