LacS基因原核表达载体构建及重组蛋白表达

一一。 母鸡
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Hale Waihona Puke ８ ６ ４ ２
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０ ０ ） 低 蛋 白质 水 平 时 ， 加 能 量 对 增 重 不 会 产 生 促 进 作 ．５ 。 增 用 ， 而 有 一 定 的 抑 制 作 用 。能 量 和 粗 蛋 白 质 平衡 对 日增 重 反 影 响 显 著 （ ＜０ ０ ）在 各 个 阶 段 无 论 是 低 能 组 还 是 高 能 组 ， Ｐ ．５ ， 只要 有适 宜 的 蛋 能 比 ， 能 表 现 出 较 好 的 生 长 性 能 ， 只有 都 但 在 最 佳 蛋 能 比时 ， 能 表 现 出最 佳 的 阶段 体 重 和 日增 重 。 才 ２ ２ ３ 料 肉 比 分 析 ： 果 显 示 ， 着 日粮 能量 的 提 高 ， ． ． 结 随 公母 鸡 的料 肉 比下 降 ， 并 不 都 是 以 高 能 高 蛋 白质 组 为 最 好 ， 但 适 宜 的 能 量 与 蛋 白 质 平 衡 对 料 肉 比影 响 显著 （ ＜０ ０ ） 营养 Ｐ ．５ 。 水 平 对 料 肉比 的影 响 主 要 表 现 在 快 速 生 长期 。 ２２ ４ 每 克 增 重 所 消 耗 的 能 量 与 蛋 白 质 情 况 ： 表 ３可看 ．． 从
化 大肠 杆 菌 Ｒ ￣ｅａ 去 水四 环 素 诱 导 后 ， 液 裂 解 离心 亲 和 层 析 获得 重 组 蛋 白 ， ｓｅｎ ｂｏ 证 实 ＬａＳ在 大 肠 杆 菌 ｏ ｔ， 菌 ｗｅｔｒ ｌｔ ｃ
Ｒ ｓｅ ｏｓ ｔ 高效 表 达 。 ａ能 关键 词 ： ａＳ 克 隆 ； 核表 达 载 体 ； 组 蛋 白 Ｌｃ ； 原 重
龄
图 １ 日增 重 模 拟 曲 线
２ ２ 能 量 和 粗 蛋 白 质 水 平 对 生 产 性 能 的 影 响 ．
各 阶 段 日粮 能 量 和 粗 蛋 白质 水 平 对 宁 海 土鸡 生 产 性 能 的影 响 如 表 ３所 示 。 在 第 一 阶 段 ， 公 鸡 日粮 能 量 水 平 为 当 １ ． ５ ＭＪ ｋ ， 蛋 白含 量 为 ２ ．３ ２ ２ ／ ｇ粗 Ｏ Ｏ ％时 ， 鸡 日采 食 量 最 大 ， 公 Ｅ增 重 最快 ， 末体 重 也 为 最 大 ， 同 一 能 量 水 平 下 ， 鸡 的 ｔ 期 且 公 生 长 性 能并 不 是 随 着 粗 蛋 白含 量 的 增 加 而增 强 ； 当母 鸡 饲 喂 相 同 日粮 时 ， 出现 类 似 的生 长 现 象 。在 第 二 阶 段 当公 鸡 日 也 粮 能 量 水平 为 １ ． １ＭＪ ｋ ， 蛋 白含 量 为 １ ． ９ 时 ， 鸡 ２ ７ ／ ｇ 粗 ９４ ％ 公
【 要 】克 隆得 到硫 矿硫 化 叶 茵 中的糖 苷酶 基 因 Ｌ ｃ ， 用 原 核 表 达 载 体 ｐ Ｓ —ＩＡ ２构 建 重 组质 粒 ｐ Ｋ 摘 ａＳ 利 ＡＫ Ｂ ＡＳ
一
１ Ａ一２ Ｌ ｃ 酶 切 和 测 序 鉴 定 证 实 Ｌ ｃ Ｂ ａＳ， ａ Ｓ基 因 成 功插 入 且 基 因 阅读 框 正确 。 重 组 质 粒 ｐ Ｋ—Ｉ Ａ一２一Ｌ ｃ ＡＳ Ｂ ａ Ｓ转
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４・
《 海 畜 牧 兽 医通 讯 》 ２ １ 上 ０ ０年 第 ４期
Ｌｃ ａＳ基 因原核 表 达载 体构 建 及 重 组 蛋 白表达
白 俊 张 东 刘 羿 羿 李 璐 杨 杰 周 欢 敏 （ 蒙 古 农 业 大 学 动 物 遗 传 育种 重 点 实 验 室 内蒙 古 呼 和 浩 特 ０ ０ １ ） 内 １０ ８
出 ， 第 一 、 阶段 随着 日粮 能量 和 粗 蛋 白质 水 平 的 上 升 ， 在 二 公 母 鸡 每 克 增 重 所 消耗 的 蛋 白质逐 步 增 加 ， 所 消耗 的 能量 呈 而 下 降 趋 势 ； 第 三 阶段 ， 着 日粮 能 量 水 平 的提 高 ， 克 增 重 在 随 每 所 消 耗 的 能 量 在 增 加 且 所 消 耗 的 蛋 白质 也 有增 加 的 趋 势 。
乳 糖 ｌｃｏ ｅ是 哺乳 动物 乳 汁 中特 有 的一 种 双 糖 ， 牛乳 ａ ｔｓ 在
于 肠 道 内缺 乏 所 需 的 乳 糖 酶 ， 者是 由 于 乳糖 酶 的 活 性 已 减 或 弱 而 造 成 的 。 据估 计 ， 球 约 ７ ％ 的成 年 人 体 内乳 糖 酶 的 活 全 ５ 性 有 减 弱 的 迹 象 。 该 症 状 发 生 的 概 率 在 北 欧 约 ５ ， 在 一 ％ 而 些 亚 洲 及 非 洲 国 家 则 超 过 ９ ％。 简 单 的 说 ， Ｏ 乳糖 不 耐 症 就是 缺 乏 乳 糖 酶或 其 活 性 不 足所 造 成 的状 况 ， 种 酶是 用 来 消化 这
＊ 为通 讯 作 者 。 基 金项 目 ： 内蒙 古 自然 科 学 基金 项 目。
中含 乳 糖 为 ４ ６ ～４ ７ ， 乳 中 含 乳 糖 为 ６ ～８ 。乳 ％ ．％ 人 ％ ％ 糖 不耐 症 Ｌ ｃｏｅｉｔｌ ａ ｃ 指 人 体 不 能 分 解 并 代 谢 乳 糖 ａｔｓ ｎｏｅ ｎ ｅ是 ｒ （ 见 于 牛奶 及 其 他 奶 制 品 中 ） 饮 用 牛 奶 等奶 类 后 乳 糖 不 能 常 ， 被 分解 吸 收 ， 糖 进 入 结 肠 后 ， 肠 道 细 菌 分 解 ， 生 大 量 乳 乳 被 产 酸、 甲酸 等短 链 脂 肪 酸 和 氢 气 ． 成 渗 透 压 升 高 ， 肠 腔 中 的 造 使
水 分增 多 ， 起腹 胀 、 呜 、 绞 痛 直 至 腹 泻等 现 象 。这 是 由 引 肠 肠
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一
公鸡
２． ２ 对 体 重 和 日增 重 的 影 响 ： 验 结 果 表 明 ， ２． 试 日粮 能量 和 粗 蛋 白质 水 平 对公 母 鸡 期 末 体 重 和 日增 重 有 显 著 影 响 （ Ｐ＜