基因治疗

2、基因修复 基因修复是指将致病基因的突变碱基序
列定点纠正，可用来治疗点突变导致的 疾病。但由于纠错效率低的原因，实践 中有相当的难度。
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3、基因增补 将目的基因导入患者体内，其表达产物
能补偿缺陷细胞的功能，可用于隐性遗 传病的治疗。
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4、基因失活 利用反义技术特异性封闭、抑制有害基
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倍增放大作用：siRNA一方面可引导 RISC特异性切割靶mRNA；另一方面， siRNA还可作为引物与靶mRNA结合， 在RNA依赖性RNA多聚酶（RNAdependent RNA polymerase，RdRp）的 作用下合成新的ds-RNA，再次经Dicer 酶切割，形成新的siRNA，并作用于靶 mRNA。
Blaséand Anderson
美国等
1993 中国制定第一部基因治疗质控要点 中国
1997 重组病毒的产业化及其技术改进 至今
美国
4
基因治疗的概念
经典：针对遗传病某一基因缺陷，将 外源基因导入体内予以矫正；
现在：凡是在基因水平上进行操作而 达到治疗疾病的所有疗法
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上世纪九十年代初，一位因ADA(腺苷酸 脱氨酶)基因缺陷导致严重免疫缺损的四 岁女孩，由美国国立卫生研究院用ADA 基因治愈。“基因治疗”研究热从此波 及全世界，起而效颦，为保障人类健康 展现了美好的前景。
奋人心的消息：“世界首个基因治疗药物在中国诞
生”。
深圳市赛百诺基因技术有限公司研制开发的抗癌
新药——“重组人p53腺病毒注射液”（商品名“今又
生”），10月16日获得国家仪器药品监督管理局颁发
的新药证书。这标志着我国在基因治疗药物研制和产
业化方面已达世界领先水平，在国际竞争中抢占了先
机。
赛百诺公司负责人说，这种新药是拥有自主知识
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基因治疗的发展简史
时间
发生事件
研究者
1944 DNA是转化物质
Avery
1953 1963 1979 1980 1990 1992
DNA双螺旋结构模型 遗传密码的破译 重组体DNA技术、基因转染 临床地贫研究 第一个临床试验（ADA)基因 大量癌症临床试验
Watson and Crick Brenner Mulligan and Berg Cline
因表达，可用于一些显性遗传病或肿瘤 的基因治疗。
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Andrew Z. Fire、Craig C. Mello
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1998年Andrew Z. Fire、Craig C. Mello 等发现将很少量的双链RNA注入秀丽线 虫体内，即可高效、特异地阻断/抑制与 双链RNA同源的基因表达，其阻断/抑制 率比纯化后的反义RNA技术高若干个数 量级。双链RNA导入细胞后引起与该段 RNA同源的mRNA发生特异性降解，进 而使相应基因抑制的转录后基因沉默现 象称RNA干扰。
产权的广谱肿瘤基因治疗药品，可望明年一月正式上
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基因治疗的种类
根据靶细胞的类型分类：
1、生殖细胞（germ cell)基因治疗： 2、体细胞（somatic cell)基因治疗
根据基因转移的途径分类：
1、in vivo(活体直接转移或称一步法） 2、ex vivo(回体转移或称二步法）
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基因治疗的策略
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双链RNA特异性核酸内切酶（dsRNAspecific endonuclease，Dicer）切割，形 成21-23nt的双链短干扰RNA（shortinterference RNA，siRNA）， siRNA链 为5’端磷酸化，3’端有二个碱基以非配 对方式悬垂 。
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siRNA与由蛋白及酶类组成的RNA诱导 沉默复合体（RNA-Induced Silencing Complex，RISC）结合后，由于RISC具 有解旋酶活性， siRNA中的正义链和反 义链解旋、解链。随后正义链被降解， 而与RISC结合的反义链则按照碱基互补 配对原则与靶mRNA中的同源序列结合， 并由RISC发挥核酸内切酶作用，在距 siRNA3’断11或12个碱基处切割靶mRNA。
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RNA干扰
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微小RNA（microRNA）
微小RNA（microRNA）大量存在人类 基因组中的非编码RNA，能特异识别成 熟mRNA的3’非翻译区，抑制mRNA的 翻译。
微小RNA（microRNA）1993 年Lee等在 对秀丽线虫进行突变体的遗传分析中首 次发现的不能编码蛋白质，但能时序调 控其胚胎后期发育基因表达的
九、基因治疗 Gene therapy
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（一）、基因治疗的发展简史、概念及背景 （二）、基因治疗的基因导入系统 （三）、基因治疗的途径 （四）、基因治疗的靶细胞研究 （五）、基因治疗在遗传病治疗上的应用和
肿瘤基因治疗 （六）、基因治疗的发展方向
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（一）、基因治疗的发展简史、 概念及背景
1、基因置换
基因置换就是用正常的基因原位置换病变 细胞内的致病基因，使细胞内的突变致病 基因完全恢复正常状态，这种基因治疗方 法最为理想。但这种方法是建立在同源重 组技术基础上的，而目前同源重组虽然在 技术上可行，但重组的效率很低，远没达 到基因治疗要求的水平，在临床试验上就 更无法实现了。
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miRNA:Lin一4。
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2000年Reinhart等在线虫中发现了另一 种重要的具有转录后调节作用的
miRNA:let一7，后来发现了大量类似 RNA，2001年起统一称为miRNA。
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miRNA通常来源于一个大小约为 1000bp的
长链RNA初始转录产物(Pri一miRNA)，Pri一 miRNA分子在细胞核中经过双链RNA特异性 核酸酶Rnaselll一Drosha的作用形成70-100nt的 具有茎环结构的RNA分子(pre一miRNA)。pre 一miRNA在转运蛋白一5(Exportin一5)的作用 下转运至胞质中，被另一个双链RNA特异性 核酸酶Rnaselll-Dicer识别，进一步被切割成长 约22nt的小分子RNA，即成熟的miRNA。成熟 miRNA在RNA诱导的沉默复合物引导下，当 与mRNA完美互补时，miRNA便指导mRNA特 异性切割;当两者没有足够的互补性时， miRNA则抑制mRNA转录后翻译。
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截止到2011年，基因治疗试验的全球、 国家分布：
基因治疗的疾病类型： 基因治疗试验的临床阶段： 1989- 2009年12月，每年全球被批准的
临床数目：
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8
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10
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12பைடு நூலகம்
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世界第一个基因治疗药物在中国诞生
人民网深圳2003年10月22日15：30急电 正在这
里召开的深圳市政府新闻发布会向世界公布了一项振