老年痴呆动物模型课件
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疾病类型：1、血管性痴呆症，这类型的痴呆 症多为血管病变所导致
2、脑神经细胞退化性的痴呆症
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❖ 其特征性病理变化：为大脑皮层萎缩，并伴 有β-淀粉样蛋白 (β-amyloid,β-AP) 沉积，神 经原纤维缠结 (neurofibrillary tangles , NFT) ， 大量记忆性神经元数目减少，以及老年斑 (senileplaque,SP) 的形成。
❖ 建模方法：选用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖 120mg 和亚硝酸钠90mg ,每天1次,连续60d, 制备老年痴呆动物模型。通过水迷宫试验,脑 组织匀浆蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)
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4
❖ 和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定,脑组织 病理切片HE染色和刚果红染色,比较老年痴呆 模型小鼠和正常小鼠的差异。
老年痴呆动物模型
小组成员：******
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老年痴呆症简介
所谓老年痴呆症，又称阿尔茨海默 (Alzheimer‘s disease,AD)， 是发生在老年期 及老年前期的一种原发性退行性脑病，指的 是一种持续性高级神经功能活动障碍，即在 没有意识障碍的状态下，记忆、思维、分析 判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。
❖ 4、病理检查：各组余下小鼠腹腔注射戊巴比 妥钠60mg/kg麻醉,仰卧固定于手术台上,剪开 胸腔,暴露心脏,用生理盐 水和4%多聚甲醛进 行心脏灌注固定,至四肢僵直为止,取全脑和
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颊部皮肤组织置4%多聚甲醛溶液中固定24h,石
蜡包埋切片,常规HE染色和刚果红染色。
（统计方法：数据以平均值±标准差表示,使用 SPSS810 统计软件处理,用t检验进行统计学分
给药完毕后第1天,各组小鼠进行训练,使其找 到台阶;第2～4天加长路程,记录各组小鼠的 寻找潜伏期。
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❖ 3、脑内相关指标的测定：行为学试验结束后, 每组取10只 小鼠禁食12h,断头处死,取全脑 (嗅脑除外),置玻璃匀浆器 中,加入预冷生理 盐水制成10%(g/ml)脑匀浆,3000r/min离心 10min,取上清液置冰浴中,测定蛋白含量和 AchE、SOD活性,按试剂盒说明书所述步骤操 作,取样量均为50ml
❖ 建模步骤：
1、雌性NIH小鼠40只,20～24g, 每组20只,随机 分为空白对照组和AD模型组。造模方法为:小 鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亚硝酸 钠90mg/kg,连续60d;空白对照组腹腔注射等 体积生理盐水。
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❖ 2、水迷宫试验：自动记录水迷宫装置为 80cm×50cm×20cm的茶色有机玻璃槽(中国医 科院药物所研制),内设起点、终点(台阶)和 多处盲端,水深9cm,水温24℃～27℃,记录小 鼠从起始点放入至找到台阶的时间(寻找潜伏 期),若超过120s则以120s计。
析)
预防措施：1、改善劳动环境 2、忌酒和戒烟 3、保持精神愉快利于长寿及精神健康 4、饮 食调节:既要防止高脂食物引起胆固醇升高， 又要摄取必要的营养物质 5、积极用脑，预防 脑力衰退 6、避免过于深沉、消极、唉声叹气， 要以开朗的心情生活
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8
谢谢再见
祝大家笑口常开
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❖ 以下介绍老年痴呆小
鼠模型
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❖ 建模目的：建立老年痴呆(AD)小鼠模型,用于 AD及其治疗药物的研究。
❖ 所需材料：NIH小鼠，蛋白定量(双缩脲法)测 定试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定试 剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、 D2半乳糖(生化试剂)、亚硝酸钠(分析纯)
2、脑神经细胞退化性的痴呆症
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❖ 其特征性病理变化：为大脑皮层萎缩，并伴 有β-淀粉样蛋白 (β-amyloid,β-AP) 沉积，神 经原纤维缠结 (neurofibrillary tangles , NFT) ， 大量记忆性神经元数目减少，以及老年斑 (senileplaque,SP) 的形成。
❖ 建模方法：选用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖 120mg 和亚硝酸钠90mg ,每天1次,连续60d, 制备老年痴呆动物模型。通过水迷宫试验,脑 组织匀浆蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE)
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❖ 和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定,脑组织 病理切片HE染色和刚果红染色,比较老年痴呆 模型小鼠和正常小鼠的差异。
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老年痴呆症简介
所谓老年痴呆症，又称阿尔茨海默 (Alzheimer‘s disease,AD)， 是发生在老年期 及老年前期的一种原发性退行性脑病，指的 是一种持续性高级神经功能活动障碍，即在 没有意识障碍的状态下，记忆、思维、分析 判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。
❖ 4、病理检查：各组余下小鼠腹腔注射戊巴比 妥钠60mg/kg麻醉,仰卧固定于手术台上,剪开 胸腔,暴露心脏,用生理盐 水和4%多聚甲醛进 行心脏灌注固定,至四肢僵直为止,取全脑和
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颊部皮肤组织置4%多聚甲醛溶液中固定24h,石
蜡包埋切片,常规HE染色和刚果红染色。
（统计方法：数据以平均值±标准差表示,使用 SPSS810 统计软件处理,用t检验进行统计学分
给药完毕后第1天,各组小鼠进行训练,使其找 到台阶;第2～4天加长路程,记录各组小鼠的 寻找潜伏期。
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❖ 3、脑内相关指标的测定：行为学试验结束后, 每组取10只 小鼠禁食12h,断头处死,取全脑 (嗅脑除外),置玻璃匀浆器 中,加入预冷生理 盐水制成10%(g/ml)脑匀浆,3000r/min离心 10min,取上清液置冰浴中,测定蛋白含量和 AchE、SOD活性,按试剂盒说明书所述步骤操 作,取样量均为50ml
❖ 建模步骤：
1、雌性NIH小鼠40只,20～24g, 每组20只,随机 分为空白对照组和AD模型组。造模方法为:小 鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亚硝酸 钠90mg/kg,连续60d;空白对照组腹腔注射等 体积生理盐水。
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❖ 2、水迷宫试验：自动记录水迷宫装置为 80cm×50cm×20cm的茶色有机玻璃槽(中国医 科院药物所研制),内设起点、终点(台阶)和 多处盲端,水深9cm,水温24℃～27℃,记录小 鼠从起始点放入至找到台阶的时间(寻找潜伏 期),若超过120s则以120s计。
析)
预防措施：1、改善劳动环境 2、忌酒和戒烟 3、保持精神愉快利于长寿及精神健康 4、饮 食调节:既要防止高脂食物引起胆固醇升高， 又要摄取必要的营养物质 5、积极用脑，预防 脑力衰退 6、避免过于深沉、消极、唉声叹气， 要以开朗的心情生活
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谢谢再见
祝大家笑口常开
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❖ 以下介绍老年痴呆小
鼠模型
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❖ 建模目的：建立老年痴呆(AD)小鼠模型,用于 AD及其治疗药物的研究。
❖ 所需材料：NIH小鼠，蛋白定量(双缩脲法)测 定试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定试 剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、 D2半乳糖(生化试剂)、亚硝酸钠(分析纯)