ADF、NDF测定方法
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饲料中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的测定A)原理:
采用范氏(Van Soest)的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)。植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理,不溶解的残渣为中性洗涤纤维,主要为细胞壁成分,其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理,剩余的残渣为酸性洗涤纤维,其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。
B)所需试剂及仪器:
十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠(EDTA,化学纯)、四硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)、无水磷酸氢二钠、乙二醇乙醚、十六烷基三甲基溴化铵、硫酸、丙酮,无水亚硫酸钠,十氢化萘
所需仪器:直筒烧杯、电炉、抽滤装置、玻璃坩埚、烘箱
C)试剂的配制:
1. 30g/L十二烷基硫酸钠(中性洗涤剂)溶液。称取18.61g乙二胺四乙酸二钠(EDTA,化学纯)和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)放入1000mL烧杯中,加入少量水加热溶解后,再加入30g十二烷基硫酸钠和10mL乙二醇乙醚。称取4.65g无水磷酸氢二钠,置于另一烧杯中,加入少量水,微微加热溶解后倾入第一个烧杯,稀释至100mL。此溶液PH在6.9-7.0
2. 20g/L十六烷三甲基溴化铵(酸性洗涤剂)溶液。称取20g十六烷基甲基溴化铵,溶于1000mL已经标定过的0.5mol/L硫酸溶液中,搅动溶解,必要时过滤。
3.0.5mol/L硫酸溶液。称取49g(27.87mL)浓硫酸,慢慢加入已有500mL水的烧杯中,冷却后注入1000mL容量瓶中,定容,标定。D)操作步骤:
NDF的测定
1. 准确称取40目筛饲料样品0.5-1.0g(m),置无嘴高型烧杯中,加入中性洗涤剂溶液100ml和2ml十氢化萘和0.5g无水亚硫酸钠。
2 .装上冷凝装置,立即置于电炉上煮沸(5-10min),并微沸1h.
3 .煮沸完毕,冷却10min,将已知质量的玻璃坩埚(m1)安装于抽滤瓶上,将残渣全部移入,抽滤,并用沸水冲洗,再抽滤。再用20ml 丙酮冲洗,抽滤。
4 .取下坩埚,105℃烘干,称重(m2)
ADF的测定
1. 准确称取样品,0.5-1.0g(m),置无嘴烧杯中,加入酸性洗涤剂溶液100ml和数滴十氢化萘。
2. 同NDF测定。
3 .用已知质量的玻璃坩埚(m3),在抽滤瓶上抽滤残渣,并用沸水洗涤残渣,抽滤反复3次,然后用少量丙酮洗涤残渣,反复冲洗至滤液无色为止,抽净全部丙酮。
4 .同NDF测定,坩埚+残渣质量为(m4)。
E)计算:
W(NDF):=(m2-m1)/m
W(ADF) =(m4-m3)/m