脂质体转染原理

脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。最初，人们只是运用脂质体模拟生物膜，研究膜的构造及功能，从而发现了膜的融合及内吞作用，因而可用作外源物质进入细胞的载体

阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹人内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，将DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。

可以不换无血清的培养基，只要用无血清的培养基配质粒DNA稀释液和脂质体稀释液即可，一定混匀并注意孵育时间，然后再加到含血清的细胞培养基中混匀就行了。这是先铺板待细胞贴壁并汇合到一定程度的转染方式。

另外，对于有些细胞，也可以同时转染，即将孵育好的DNA和脂质体混合液（用无血清培养基稀释）加入消化下的细胞悬液，混匀再铺板即可。通常来讲，后者的转染效率不如前者高，但对于一些应用此方法转染效率比较高的细胞而言，能节省些时间。

还有一点需要注意的是，无论上述那种转染方法，都要注意一个脂质体毒性的问题，说明书中建议在转染4-6 h换去转染培养基并不会影响转染效率，这点因细胞而异。

说明书建议用无血清培养基的原因主要是因为血清中会有DNase和RNase. 尤其对于RNA 的转染,更加要注意降解问题. 所以我觉得对于一般的DNA质粒转染, 但是我觉得如果要是担心降解尤其是RNA降解的话,还是用无血清培养基要安全些.