光学显微镜的使用方法

镜台测微尺
(每一大刻度值为0.1mm，小刻度值为0.01mm)
细胞形态和显微测量
实验内容
细胞的显微测量
✓ 标定镜台测微尺 ✓ 蛙红细胞的测量
目镜测微尺的标定
*装入目镜测微尺
放镜台测微尺于载物台
记录二者在重合线之间的刻度
调节使镜台测微尺 与目镜测微尺平行
取下镜台测微尺
计算标定值
如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格
✓玻璃纤维：调节推片器定位玻璃纤 维的十字交叉点
✓问题思考：对颜色深的标本与颜色 浅的标本在观察过程中有何不同？
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显微镜的构造和使用
实验内容
显微镜使用注意事项
✓ 显微镜持取正确姿势 ✓ 使用前后的镜头维护 ✓ 注意标本的放置方向 ✓ 观察时注意双目齐睁 ✓ 高倍镜不得使用粗调 ✓ 严禁拆卸任何部件 ✓ 使用后恢复机器原貌
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显微镜的构造和使用
实验内容
其他常用光学显微镜
✓ 检测显微镜 ✓ 解剖显微镜 ✓ 倒置显微镜 ✓ 偏光显微镜
其他几种显微镜介绍
检测显微镜SFC-86
双筒解剖显微镜
其他几种显微镜介绍
偏振光显微镜
倒置显微镜光路图
倒置显微镜
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显微镜的构造和使用
复习预习
❖ 复习“使用显微镜的注意事项” ❖ 预习“生物绘图的要求及方法”(p10) ❖ 预习第二次实验“细胞形态和显微测量” ❖ 携带实验报告纸、铅笔、橡皮擦、直尺
细胞的显微测量
细胞的显微测量需要以目镜测 微尺来进行，但其分度值随着放大 倍数的变化而变化，长度也不一样， 因此需要事先进行标定。而镜台测 微尺的长度是已知的，目镜测微尺 的标定是通过镜台测微尺来进行的。
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目镜测微尺与镜台测微尺
0.01mm
0
1
2
3
40
1
2
3
4
5
6
7
8
目镜测微尺
(长度随放大倍数发生改变)
机械部分
镜座 镜柱 活动关节 镜臂 调焦器 镜筒 物镜转换器 载物台 推片器与游标卡尺
光学系统部分
目镜(接目镜)
“5×”，“10×”的含义。目镜指 针 低倍镜 (8x，10x)：0.25,160
物镜(接物镜)
高倍镜 (40x,45x):0.65,160/0.17
油 镜 (90x,100x):1.25,160/0.17
用品材料
❖ 玻片标本 字母装片、头发装片、玻璃纤维
❖ 实验材料 显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香 柏油、二甲苯
显微镜的构造和使用
实验内容
❖ 重新认识显微镜的结构 ❖ 显微镜的正确使用方法 ❖ 显微镜使用的注意事项 ❖ 其他常用的光学显微镜
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的构造
✓ 机械系统部分 ✓ 光学系统部分 ✓ 照明系统部分 ✓ 图像记录系统
如何进行蛙细胞的显微测量？
转动目镜镜筒 短轴
长轴
目镜测微尺
细胞形态和显微测量
实验报告
描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞 记录蛙红细胞显微测量结果
细胞膜 细胞质 细胞核
蛙红细胞示意图
分别记录5个蛙红细胞的长径和短径，并计算平均值。
1 长径
蛙红细胞测量结果
2
3
4
单位：m
5
平均
短径
目镜测微尺标定
✓ 星形细胞——牛脊髓神经细胞
✓ 梭形细胞——小鼠平滑肌细胞
✓ 圆形细胞——蛙血(示红细胞)
✓ 小鼠肝细胞切片观察
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人口腔上皮细胞制备(临时制片)
取干净载玻片
滴入0.9%NaCl溶液
取口腔上皮细胞
盖上盖玻片
亚甲基蓝染色 观察
扁平上皮细胞 人口腔上皮细胞
扁平上皮细胞 蟾蜍扁平上皮细胞(HE染色)
柱状上皮细胞 蝾螈小肠切片 (HE染色)
星状细胞
离体培养的新生老鼠脊 髓神经细胞(HE染色)
平滑肌细胞 小鼠平滑肌细胞
小鼠肝细胞切片 小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应)
圆形细胞
人血涂片 (Giemsa染色)
(红色箭头示白细胞，兰色箭头示红细胞)
细胞形态和显微测量
实验内容
第二部分
如何计算显微镜的放大倍数？
照明系统部分
光 源 ： 内光源与外光源 反光镜 ： 凹面镜与平面镜 聚光镜 ： 升高与降低聚光镜 光 圈 ： 放开与关闭光圈
如何调节观察视野的明暗度？
显微图象系统
普通生物显微镜
数码生物显微镜 生物显微镜(含摄影系统)
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显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
镜台测微尺的长度为68格
则：
50:68=1:x
x=1.36格，即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺 的1.36格，而镜台测微尺每1小格的长度为10um，则目镜测微 尺每1小格的长度为13.6um。
标定时 应Βιβλιοθήκη Baidu意 的问题
• 标定时必须严格按照操作规程，以免损坏测微尺； • 重合线的判断应在二者刻度线完全重合； • 比例式的计算； • 标定值只能在同一放大倍数下进行测量。
二、细胞形态和显微测量
目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习
细胞形态和显微测量
目的要求
❖ 掌握光镜下细胞的基本形态结构； ❖ 掌握临时制片和显微绘图的方法； ❖ 进一步掌握显微镜的正确使用方法； ❖ 了解细胞显微测量的原理。
细胞形态和显微测量
用品材料
❖ 玻片标本 人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横 切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片
光学显微镜的使用方法
一、光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
光学显微镜构造和使用
目的要求 用品材料 实验内容 复习预习
显微镜的构造和使用
目的要求
❖ 熟悉光学显微镜基本结构和用途； ❖ 掌握显微镜维护的基本知识； ❖ 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。
显微镜的构造和使用
（1）标定物镜：40
（2）重合线之间，
✓ 取镜 ✓ 放镜 ✓ 对光 ✓ 放片 ✓ 调焦(粗调焦和细调焦)
低倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
✓ 定位 ✓ 换镜 ✓ 调焦(细调焦)
高倍镜的使用
显微镜的构造和使用
实验内容
光学显微镜的使用
使用练习
✓字母装片：观察中注意字母像与实 际装片的位置关系，为什么？
✓头发装片：调节推片器定位头发的 十字交叉点
❖ 实验材料 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊 子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、 擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等
细胞形态和显微测量
实验内容
❖ 细胞的形态观察 ❖ 细胞的显微测量
细胞形态和显微测量
实验内容
第一部分
细胞的形态结构观察
✓ 扁平细胞——人类口腔上皮细胞
✓ 柱状细胞——小鼠小肠上皮细胞