分析工作常用显色剂

分析工作常用显色剂

常用鉴定试剂的配制和应用

一、通用试剂1、碘试剂

检查一般有机化合物。

（1）碘蒸气预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容

器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于

容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。

（2）0.5％碘的氯仿溶液喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。2、硫酸试剂

检查一般有机化合物。

5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。3、重铬酸钾—硫酸试剂

检查一般有机化合物。

5g重铬酸钾溶于l00ml40％硫酸中。喷该试剂后，150℃加热至斑点

出现(不同化合物呈不同颜色)。4、磷钼酸试剂检查还原性成分。

5％磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。5、磷钨酸

试剂检查还原性成分

20％磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120℃烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。

6、硝酸银—氢氧化铵试剂检查还原性成分。

溶液I：0.1mol／L硝酸银溶液。溶液Ⅱ：10％氢氧化铵溶液。临用

前溶液I和Ⅱ以

1∶5混合。喷洒后105℃加热5~l0min，至深黑色斑点出现。7、中

性高锰酸钾试剂检查易还原性成分。

0.05％高锰酸钾溶液。喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。8、碱性高

锰酸钾试剂检查还原性成分。

溶液I：1％高锰酸钾溶液。溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液。溶液I和Ⅱ等

量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄色斑点。9、四唑蓝试剂检查还原

性成分。

溶液I：0．5％四唑蓝甲醇溶液。溶液Ⅱ：25％氢氧化钠溶液。临用

前两液等量混合。喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点。10、荧光素—溴

试剂检查不饱和化合物。

溶液I：0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。溶液Ⅱ：5g溴溶于l00ml

四氯化碳中。先喷洒溶液I，然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内，黄色

斑点出现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点。11．荧光

显色试剂检查一般有机化合物。

（1）0.2％2，7--'氯荧光素乙醇溶液。（2）0.01％荧光素乙醇溶液。（3）0.1％桑色素乙醇溶液。（4）0.05％罗丹明B乙醇溶液。

喷洒任一溶液，不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。

二、苷类鉴定试剂1、糖鉴定试剂

（1）－萘酚－硫酸试剂检查还原糖。

①溶液I：10％—萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ：硫酸。取lml样品的稀乙

醇溶液或水溶液，加入溶液I2～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液Ⅱ，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。

②15％—萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用。喷洒于薄层板上，100℃烤3～6min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定2天～3天。（2）斐林试剂检查还原糖。‘溶液I：6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中。溶液Ⅱ：34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中。取lml样品热水提取液，加入4～5滴用时配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和甙，取lml样品水提液，加入lmll0％盐酸溶液，在沸水浴上加热l0min，过滤，再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。（3）氨性硝酸银试剂检查还原糖。

硝酸银1g，加水20ml溶解，小心滴加适量氨水，边加边搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。取lml样品的水溶液，加入lml 试剂，混匀后，40℃微热数分钟，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应。本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于110℃加热数分钟，显棕黑色斑点为阳性反应。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰。（4）茴香醛－硫酸试剂检查糖类化合物。

硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中，需临用前配制。喷洒于薄层板上，105℃加热至显示色斑，不同糖显不同颜色。（5）苯胺－邻苯二甲酸试剂检查糖类化合物。

苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。作色谱显色剂用。喷后105℃烤5min，显红棕色斑点。（6）l,3－二'羟基萘酚－磷酸试剂检查酮糖、醛糖。

0.2％1，3--'二羟基萘酚乙醇溶液50ml与85％磷酸50ml混合均匀后使用。喷后105℃烤5min～10min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色。（7）苯胺－二苯胺－磷酸试剂检查糖类化合物。

苯胺4ml、二苯胺4g及85％磷酸20ml溶于丙酮200ml中。喷洒于薄

层板上，85℃加热10min，不同糖显不同颜色。

（8）2，3，5－三苯基氯化四氮唑(T．T．C)试剂检查还原糖。

溶液Ⅰ：4％T．T．C甲醇溶液。溶液Ⅱ：4％氢氧化钠溶液。临用时

将溶液Ⅰ和Ⅱ等体积混合。喷洒后，100℃加热5～10min，显红色斑点为

阳性反应(醛类无干扰)。

（9）三氯化铁－冰醋酸(K．K)试剂检查－去氧糖，常用于强心甙。

溶液I：1％三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ：硫酸。取样品乙醇提取液lml，置试管中，水浴上蒸去乙醇，残渣用0.5ml溶液

I溶解，沿试管壁缓缓加入溶液Ⅱlml，静置分层，上层渐显蓝色，下层

显红色或棕色为阳性反应(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而

不同)。（10）占吨氢醇试剂

检查－去氧糖(常用于强心甙)。

10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中，再加入lml硫酸混合。取lml

样品，加入试剂lml，置水浴上加热30min，显红色为阳性反应。（11）Gregg-Givold试剂检查2．6－去氧糖。

溶液I：10％三氯化铁溶液。溶液Ⅱ：1％盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇

中含2．8ml盐酸)。0.5ml溶液I与100ml溶液Ⅱ混合。将样品的乙醇溶

液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110℃加热5min，显蓝色

为阳性反应。（12）3，5－二氨基苯甲酸－磷酸试剂检查2－去氧糖。

3，5－二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80％磷酸25ml，加水稀释至

60ml。喷洒后，100℃加热15min，2－去氧糖在日光下显棕色，在紫外光

下显黄绿色荧光。（13）对硝基苯胺－过碘酸试剂检查去氧糖。