离子交换介质的选择

2、离子交换介质的选择策略

在实际应用中，离子交换介质的基质、孔结构、配基密度（电荷密度或交换容量）、颗粒大小和分布都会影响介质的层析效果。

亲水性基质往往比疏水性基质具有更好的生物相容性，更适用于蛋白质的分离纯化。目前常用的离子交换介质的基质大多是琼脂糖。

介质的配基密度越大，越有利于提高介质的处理量和对蛋白质的吸附力，但由于蛋白质大分子与介质间的多位点结合，其构象可能发生变化，从而导致蛋白质的失活，同时这种多位点结合也可使大分子与介质间的结合过于牢固，难以洗脱，造成不可逆吸附。因此，合适的配基密度是实现大分子高效分离纯化的重要保障。

介质颗粒越小，粒径分布越均匀，理论塔板数越高，分离效果越好。介质孔径越大，蛋白质分子越容易进入，介质的交换容量越高。

3、缓冲液的选择策略

通过调节pH可以改变蛋白质的带电性质，从而影响蛋白质的离子交换层析行为。

当pH低于蛋白质的等电点（pI）时，蛋白质可被阳离子交换介质吸附；反之则能被阴离子交换介质吸附。

考虑到蛋白质在层析过程中的稳定性，依据等电点选择缓冲液的pH值时，一般选用与蛋白质等电点相差一个单位的pH值，此时蛋白质与介质间的静电作用力大小适中，不仅可以实现蛋白质的有效吸附，而且洗脱条件也比较温和。

本中心生产的离子交换介质列表

本中心目前开发的离子交换层析介质有DEAE（N,N-二乙基氨基乙基）离子交换介质、CM（羧甲基）离子交换介质、Q（N,N-二乙基氨基-2-羟丙基）离子交换介质、SP（磺丙基）离子交换介质。此外，还可根据客户需求提供不同配基密度的离子交换介质。