组织金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化
基质金属蛋白酶及其组织抑制因子和肝纤维化
脏中， ＨＳＣ Ｄｉｓ 间 隙 保 持 无 活 性 状 态 ， 一 定 程 度 上 是 在 ｓｅ 这 其 与 Ｉ胶 原 、 粘 连 蛋 白 、 白多 糖 等 组 成 的 ＥＣ 相 互 作 ＼ 一 层 蛋 Ｍ 用 的结 果 。 果 将 其 移 离 这 种 环 境 ， Ｃ 会 转 变 为 肝 纤 维 如 ＨＳ 就 化 中 所 见 的典 型 的 肌 成 纤 维 细 胞 。 种 现 象 表 明 肝 脏 基 质 这 的 降 解 可 能 与 肝 纤 维 化 的 发 病 有 关 。 迄 今 为 止 ， 种 假 设 但 这 只 是 建 立 在 Ｍ Ｍ Ｐ８ 肝 损 伤 或 纤 维 化 中 表 达 的 基 础 上 。 在 与
肝 细 胞 的 改 变 。 着 损 伤 的 加 重 ， Ｍ 和 血 管 发 生 过 度 增 随 ＥＣ
生联结 ， 后 形成肝纤维化或Fra bibliotek肝硬化的典型病理 改变。 最
三 、 Ｍ Ｐ 、 Ｍ Ｐ 与 肝 纤 维 化 的 发病 Ｍ ８ＴＩ ８ １ Ｍ Ｍ Ｐ 、 Ｉ Ｐ 在 肝 纤 维 化 进 程 中 的 作 用 ： 常 肝 、 ８Ｔ Ｍ ８ 正
Ｍ Ｍ Ｐ 及 Ｔ Ｍ Ｐ 的 影 响 。 文 就 Ｍ Ｍ Ｐ 和 ＴＩ Ｐ 在 肝 纤 维 ８ Ｉ ８ 本 ８ Ｍ ８
期 ， Ⅳ型 胶 原 和 纤 维 素 结 合 素 沉 积 于 Ｄｉｓ 间 隙 ； 性 损 Ⅲ、 ｓｅ 慢 伤 进 程 中 ， Ｉ型 胶 原 、 形 蛋 白 、 性 蛋 白及 层 粘 连 蛋 白 Ｉ、＼ 波 弹 的沉 积 量 不 断 增 加 ， Ｉ 胶 原 增 加 最 为 明 显 。 生 成 的 基 以 型 新 质 在 Ｄｉｓ 间 隙 沉 积 本 身 可 能 会 引 起 ＨＳ 网 状 内皮 细 胞 和 ｓｅ Ｃ、
基质金属蛋白酶及其抑制剂在肝纤维化中的表达变化
ＭＭＰ 是 一组 重要 的锌 离 子依 赖 的蛋 白水 解 酶 ， ｓ 它
是肝 内 Ｅ Ｍ 在 生 理 和 病 理 状 态 下 降 解 的 主 要 酶 Ｃ
类， 能够 降解胶 原 ， 白多糖 等 细胞 外 基 质 成 份 ， 蛋 对 肝组织 的胶 原 沉 积 和组 织 结 构 的 改 建 具 有 重 要 作 用… 。多项 研究 表 明肝 脏 指数 、 １ ］ 谷丙 转 氨 酶 （ Ｔ） ＡＬ 是检 测肝 功能损 害 程 度 的 常用 指 标 ， 清透 明质 酸 血 （ ＨＡ） 一种 肝 脏 问 充 质 细 胞 合 成 的糖 胺 聚 糖 ， 是 肝 细胞 对其 产生 和代 谢 需 要 经 过 多个 步骤 ， 降解 过 其
显 示 肝 组 织 内 Ｉ、 型 胶 原 蛋 白 、 Ⅲ ＭＭＰ １ ＴＩ ～ 的 表 达 较 正 常 组 显 著 增 加 。结 论 一及 ＭＰ １
变 化 可能 是 导致 肝 纤 维 化 的 重 要 机 制 之 一 。
肝 组 织 中 ＭＭＰ １ Ｔ ＭＰ １的 表 达 一及 Ｉ 一
［ 键 词 ］ 肝 纤 维 化 ； 基 质 金 属 蛋 白酶 一 ； 金 属 蛋 白 酶组 织 抑 制 因子 一 关 １ １ ［ 中图 分 类 号 ］ Ｒ５ ５ ２ ７．９ ［ 献 标 识 码 ］ Ａ 文 ＤＯＩ １ ． ８ ０ ｚ ｚｈ ． ０ ２ ０ ． １ ：０ ３ ７ ／ ｇ ｚ ｘ ２ １ ． ３ ０ ４
［ ｖ ｗｏ ｄ ］ Ｈ ｅ ａ ｉ ｆｂ ｏ ｉ ； Ｍ Ｍ Ｐ １； ＴＩ Ｐ １ Ｋｅ ｒ ｓ ｐ ｔ ｉｒ ｓｓ ｃ 一 Ｍ ～
肝纤 维化 是 多种慢 性肝 脏疾 病共 同 的病理 基础 与特 征 ， 主 要 表 现 为 以胶 原 为 主 的细 胞 外 基 质 它 （ｘｒｃｌ ｌｒｍａｒ ， Ｃ 各 成分 合 成 增 多 ， ｅ ｔａｅｌ ａ ｔｉ Ｅ Ｍ） ｕ ｘ 降解
复方黄芪颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2、金属蛋白酶组织抑制因子-2蛋白表达的影响
１ ．中国人 民解放军第 ３２医院中西 医结合科 （ ０ 北京 ，１０ ３ ） ２ ００ ９ ．中 国人 民解放军第 ３２医院病理科 ０
摘
要
目的 ：探讨 复方黄 芪颗粒对肝 纤维化 大鼠肝脏基质金属 蛋 白酶一 （ ２ ＭＭＰ２ 、金属 蛋 白酶组 织抑 制 因子－ ．）
２ （ Ｉ Ｐ２ ＴＭ ．）蛋白表 达的影 响。方 法 ：应 用 Ｃ ｅａｌｒ 定 量计 分 系统 ，病理 组 织 学观 察 等方 法 ，结合 细胞 外基 质 ｈｖｌｅ 半 ｉ
ｓａｎ ｎ ｎ ｐ ｃａ ｔｉ ｉ ｇ ｔｅ ｄ ｎ ｍｉａ ｈ ｎ ｅ ｆ ｅ ａｉ ｉｔｌｇ ｆ ａ ｓｗ ｒ ｂ ｅ ｖ ｄ ｔ ｅｅ ｍｉ ｅ ｔ ｅｃ ｒ ｔ ｅ ｅｆ ｃ ｆ ｔｉ ｉｇ ａ ｄ ｓ ｅ ｉｌｓ ｎｎ ， ｈ ｙ ａ ｃ ｌｃ ａ ｇ ｓｏ ｐ ｔ ｈ ｓ ｏ ｙ ｏ ｔ ｅ ｅ ｏ ｓ ｒ ｅ ｏ ｄ ｔｒ ｎ ｕ ａｉ ｆ ｔｏ ａ ｈ ｃ ｏ ｒ ｈ ｖ ｅ ｃ ｍｐ ｕ ｄ ｇａ ｕｅ ｏ ａ ｇ ｉ Ｂｙ ｕ ｉｇ ｉ ｏ ｏ ｎ ｒ ｎ ｌ ｆＨｕ ｎ ｑ ． ｓｎ ｍｍｕ ｏ ｉ ｏ ｈ ｍｉａ ｔ ｏ ｎ ｈ ｓ ｃ ｅ ｃ ｌｍｅｈ ｄ， ｔ ｅ ｄ ｎ ｍｉ ｃ ａ ｇ ｓ ｉ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｏ ｔ ｈ ｙ ａ ｃ ｈ ｎ ｅ ｎ ｅ ｐ ｅ ｓ ｆＭＭＰ ２，ＴＩ 一 ｏ 一 ＭＰ ２ ｗｅ ｅ ｄ ｔｒ ｎ ｄ ｉ ｖ ｒｔ ｓ ｅ ｒ ｍ ｔ ｅｅ ｐ ｒ ｎ ａ ａｓ Ｒｅ ｕ ｔ ： Ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ｅ ｃ ｎ ｒ ｌ ｏ ｐ，ｉ ｈ ｃ ａｓｗｉ ｅ ａｉ ｒ ｅｅ ｍｉ ｅ ｆ ｅ ｓｕ ｓ ｏ ｈ ｘ ｅ ｍｅ ｔｌ ｔ． ｓ ｌｓ ｎｉ ｉ ｆ ｉ ｒ ｏ ａｅ ｉ ｔ ｏ ｔ ｕ ｈｈ ｏｇ ｒ ｎｗ ｉｈｒｔ ｔ ｈ ｐ ｔ ｈ ｃ ｆ ｒｓｓｗｅ ｅ ｎ ｔｔ ａｅ ｔ ｏ ｏ ｎ ａ ｕ ｅ ｏ ａ ｇ ｉ ｈ ｉ ｏｏ ｉａ ｘ ｍｉａ ｉｎ ｏ ａ ｉｅ ｓｉ ｈ ｒａ ｍｅ ｔｇ ｏ ｐ ｉ ｏｉ ｂ ｒ ｏ ｒ ｔｄ ｗｉ ｃ ｍｐ ｕ ｄ ｇ ｎ ｌ ｆＨｕ ｎ ｑ ，ｔ ｅ ｈ ｓ ｌｇｃ ｌｅ ａ ｎ ｔ ｆｒ ｔ ｖ ｒ ｎ ｔ ｅ ｔ ｔ ｎ ｕ ｓ ｅ ｈ ｒ ｔ ｏ ｌ ｅ ｒ
肝纤维化大鼠血清及肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子表达的变化
ＬＵＯ Ｇｕ ｏ ｂ ｉ ａ ｏ Ｓ ＨＵ Ｊ ｉ ａ ｎ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｇａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｒｅ ｄ Ｃｒ ｏ ｓ ｓ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ Ａｆ ｆ ｉ ｌ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ｏ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｊ ｉ ｎ ａ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｎ ｔ ｅ ｔ ｒ ａ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ． Ａ ｌ ｌ ｒ ａ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｓ ａ ｃ ｉ ｒ ｉ ｆ ｃ ｅ ｄ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｓ ａ ｍｅ ｔ ｉ ｍ ｅ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ １ ２ ｗ ｅ ｅ ｋ ｓ ． Ｔ ｈ ｅ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｓ ｏ ｆ
【 文献 标识 码】 Ａ
【 文章 编 号】 １ ６ ７ ３ — ７ ２ １ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８ （ ｂ） 一 ０ ０ ２ ２ — ０ ３
Ｃｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍａ ｔ ｒ ｉ ｘ ｍｅ ｔ ａ Ｕ ０ ｐ ｒ ０ ｔ ｅ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ 一 １ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ
［ 摘 要】目的 检测肝 纤 维化 大 鼠血 清及 肝 组织 中基质 金属 蛋 白酶一 １ （ ＭＭＰ 一 １ ） 和基 质金 属蛋 白酶组 织 抑制 因子 一 １ （ Ｔ Ｉ ＭＰ 一 １ ） 表达 ． 探 讨 ＭＭＰ 一 １和 Ｔ Ｉ ＭＰ 一 １ 在 肝 纤 维 化 中的作 用 。 方 法 ２ ０只雄 性 Ｓ Ｄ大 鼠随 机均 分 正 常 组及 模 型组 ， 每 组各 １ ０只 ， 其 中模 型 组 以 四氯 化碳 腹 腔 注射 方 法 制作 大 鼠肝 纤 维化 模 型 ， １ ２周 后 同 时处 死 大 鼠 ， 用 酶
肝纤维化与MMPs及TIMPs的研究进展
肝纤维化与MMPs及TIMPs的研究进展肝纤维化是细胞外基质（ECM）过度沉积所致。
ECM主要来源于肝星状细胞（HSC）由胶原、非胶原糖蛋白、基质金属蛋白酶（MMP）、基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）以及转化生长因子-β（TGF-β）等各种细胞因子组成。
其中MMPS 可降解ECM，抑制肝纤维化的发展，而TIMPs可抑制MMPs酶的活性从而促进肝纤维化。
通过综述总结以上相关蛋白家族与肝纤维化的关联，为研究提供参考。
标签：肝纤维化；蛋白家族；进展Research progress of liver fibrosis and MMPs and TIMPsSHAN Dan1 BA Tu-de-li-gen2*1Inner mongolia Oniversotg For the，Nationalities，Tongliao 028000，China；2Affiliated Hospital of Inner Mongolia University for the Nationalities，Inner Mongolia，Tongliao 028000，ChinaAbstract：Excessive deposition of extraellular matrix lead the liver fibrosis.The main sources of ECM in hepatic stellate cells The ECM composition of collagen，non collagenous glycoprotein，matrix metalloproteinases，matrix metallopro teinase inhibitors and trans for ming growth factor-βetc.The MMPs can degradotion ECM，inhibition the development of hepatic fibrosis，the TIMPs inhibiton Enzyme activity of MMPs promofe the hepatic fibrocis.This acticle Summarizes the above related protein family and liver fibrosis correlation for the referonce of reseaich review.Keywords：liver fibrosis；protein family；progress.肝纤维化是指肝脏纤维结缔组织的过度沉积，是ECM合成与降解不平衡的结果。
基质金属蛋白酶和白细胞介素-10因子在抗肝纤维化中的作用机制
2012年12月第9卷第34期·综述·CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报肝纤维化是临床上常见的病理生理改变，近年来对肝纤维化的研究逐渐成为热点。
现已明确，肝纤维化是以肝星状细胞（hepatic stellate cell ，HSC ）的活化为中心，细胞外基质（ECM ）异常沉积为特征，是机体对损伤的一种修复机制[1]。
但这种修复却导致细胞外基质的异常且过量的沉积，肝窦内皮下出现基底膜，内皮细胞窗孔消失，肝窦呈毛细血管样改变，导致肝内血管的阻塞、混乱分隔的形成等组织形态学变化，形成门静脉高压，并进一步形成肝硬化。
HSC 在受到细胞因子的刺激后表现为较强的分化能力，可以表达神经蛋白和神经生长因子及其受体，并可分化成脂肪细胞，而这种分化与星状细胞内贮存的维生素A 有密切关系[2]。
在肝纤维化的形成过程中，Kupffer 细胞在起始活化中起重要作用，而肝细胞、血窦内皮细胞、肝星状细胞等都参与纤维化的形成。
众多的细胞因子参与，形成细胞网络状作用，如肿瘤坏死因子（TNF ）及血小板衍生生长因子（PDGF ）等。
已经活化的HSC 可以分泌转化生长因子-β（TGF-β）、表皮生长因子（EGF ）等以维持自身的活化，同时又可以通过旁分泌的形式刺激未活化的HSC ，从而使HSC 活化持续并不断放大，分泌胶原、非胶原蛋白、蛋白多糖等细胞外基质。
即使此时去除病因，肝纤维化的发生也将持续下去。
在抗纤维化的众多因子中，以基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases ，MMPs ）和白细胞介素-10（IL-10）的作用较为突出，对两者的研究也相对较多。
本文将对这两种细胞因子的功能和其在抗肝纤维化中的积极作用展开综述。
1基质金属蛋白酶1.1基质金属蛋白酶的生化特征在参与降解ECM 的众多酶中，MMPs 家族起着突出的作用[3]。
目前发现，MMPs 家族有25个成员，相互之间有相同或相似的分子结构，这些蛋白酶最初的分泌形式都是酶原，可以在Zn 2+和Ca 2+的作用下激活，前肽结构域中高度保守序列的Cys 残基与催化结构域的保守序列HEXHXGH 内的锌离子配对，抑制酶的活化。
转化生长因子-β、结缔组织生长因子、基质金属蛋白酶及其抑制物与肝纤维化
泰
１ 引 言
肝纤维 化是 慢性 肝病发 展 至肝硬 化 的必经病 理
阶段 ，业 已证 实肝 星状 细胞 （ ｅ ａ ｃｓ ｌ ｔ ｃｌ ， ｈ ｐ ｔ ｔ ｌ ｅ ｅ ｓ ｉ ｅａ ｌ
ＳｒＴ ｒ 酶即被 活 化 ，进 而 Ｉ型受 体 活 化 并 将 信 ｅ／ ｈ 激 号 向细 胞 内转 导 Ｊ Ｇ ． 。Ｔ ＦＢ信 号 是 以 一 种 非 放 大 的化学计 量 的方式 向细胞核 内传 递 的 ，需要 单跨 膜 丝 氨酸／ 氨 酸 受 体 及 Ｓ ａ 苏 ｍ ｄ蛋 白 的参 与 。Ｔ ＦＢ Ｇ — 可使 Ｉ、Ⅲ型 胶 原 ，纤 维 连 接 蛋 白及 其 ｍＲ Ａ均 Ｎ 呈剂 量依 赖 性 增 加 。研 究 发 现 Ｔ ＦＢ选 择 性 提 高 Ｇ—
Ｔ Ｆ Ｂ 的作用 。 Ｇ —】
Ｇ ） 的 表 达 上 调 ，促 进 Ｅ Ｍ 的 生 成 。 本 文 就 Ｆ Ｃ
Ｔ ＦＢ、Ｃ Ｇ 、ＭＭＰ 及 ＴＭＰ 与肝 纤维 化 的 研究 Ｇ— ＴＦ ｓ Ｉ ｓ
进 展综述 如下 。
３ 结 缔 组 织 生 长 因子 与肝 纤 维化
ＣＧ Ｔ Ｆ是新 发现 的 细胞 因子 ，具 有 多 种生 物 学 活性 ，与硬 皮病 、器 官纤 维 化 和某 些 肿 瘤 的发 生 、
ｔｓｅ ｒ ｔ ｆ ｔ ，Ｃ Ｇ ） ｉｕ ｏ ｈ ａ ｏ Ｔ Ｆ ，促进细胞外基质的生成 ，其 中胶原的降解与基质金属蛋 白酶和金 拿 ｓ ｇ ｗ ｃｒ
属 蛋 白酶组 织抑制 因子 的表 达有 着重要 关 系。 ［ 键词 ］ 肝 纤维化 关 转化 生长 因子． Ｂ 结缔 组 织生 长 因子 基 质金 属蛋 白酶
纤维化 时 ，Ｔ ＦＢ高表达 介导 其下游 反应 元件 结 缔 Ｇ．
肝纤维化形成中MMPs_TIMPs的动态变化及治疗进展
Ｐ（）ｃｋｒｏｓ ＰＪ．Ｓｃｈｉｆｆ ＥＲ，Ｓｂｊｆｆｍａｎ ＭＩ。．ｅｔ ａＪ．ｏｒａｌ
ａｎｔｉａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｃａｓｐａｓｅ ｉｎｈｉｂｊｔｏｒ．
ＩＤＮ一６５５６，ａｎ
ｍａｙ
ｌｏｗｅｒ
ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ
ａｃｔｉｖｊｔｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ３２４—３２９． Ｒａｄａｅｖａ
细胞、库普弗细胞分泌。主要降解Ｉ、ｍ型胶原。ｗａｔａｎａｂｅ 等…用ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化模型，ＲＴ—ＰＣＲ结果显示。
ＭＭＰ－１３ ｍＲＮＡ在正常对照组表达微弱。ＣＣｌ４处理４周即肝
细胞脂肪变性明显而尚未达到纤维化时表达硅著升高，ｃＣｌ４ 处理８周和１２周形成明显的纤维化时表达显著下降。Ｌｅｒｏｙ 等｜２１观察到慢性丙型肝炎患者的纤维化过程中ＭＭＰ一１水平 显著下降。与ＭＥＴＡＶｌＲ纤维化分期呈明显负相关。动物实 验与临床观察均显示，在肝纤维化过程中．ＭＭＰ＿１（ＭＭＰ一１３） 水平下降，活性减低。从而不能有效降解沉积的间质胶原。 ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９和ＭＭＰ一３对正常肝脏基底膜有降解作 用。ＭＭｐ２在正常人肝脏中很少或几乎监测不到，主要由激 活的ＨＳＣ产生。朱跃科等【’】用ＤＭＮ诱导大鼠肝纤维化，结
ＭＭＰ—ｕ在肝脏中主要由库普弗细胞分泌。与ＭＭＰ一２一 起维持肝脏修复过程中细胞环境结构完整及肝宴基底膜的正 常形态。Ｉ。ｅｒｏｙ等在临床研究中发现．慢性丙型肝炎患者血清 中ＭＭＰ一９水平与纤维化分期旱明显负相关。即随疾病进展其 水平逐渐降低。但ｗａｎｇ等¨用ＤＭＮ诱导大鼠肝纤维化时。 发现正常大鼠ＭＭＰ—ｕ活性极低，在造模的第２、３天时镀著升 高。至１、２和４周时仍处于高水平。说明ＭＭＰ—ｕ的表达在肝 炎患者和肝纤维化动物模型中存在差异。 ＭＭＰ一３在ＨＳＣ激活早期阶段表达，相关Ｉ临床研究屁示， 与健康个体相比，各种慢性肝病患者血清中ＭＭＰ一３蛋白水平 均卜．降５（）％。但注射（：Ｃ１．后４周的大鼠．肝组织ＭＭＩ。３ ｍＲＮＡ的表达增加．在胆管结扎大鼠模型中未得出此结论。 总之，虽然ＭＭＰ－３降解Ⅸ：Ｍ的作用没有其他ＭＭＰｓ强．但体 内ＭＭＰ一３在其他ＭＭＰｓ的激活中扮演蕈要角色，町激活 ＭＭＰ一１、３、７、９、８、１３，因此它在肝纤维化形成中的作用不可忽
组织金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化
［ ４ ｅ ａ Ｚ Ｇ ｉ ｏＲ ， ｒ ｏｒ １Ｃ ｌ ｌ ｙ ｕｃ ｏ ｅ １ ］Ｌ ｒ ｕＯ ，ａ ａ Ｄ Ａ ｍ ｕ Ｍ ｖ ａ． ｅｕ ｒ ｓ ｎｔ ｎ ｎｔ ｍ ｌ ｎ ｔ ｌａ ｄ ｆ ｉ ｉ ｈ
ｄａｅｉ ｆ ｒｂａｔ ｍｐｉ ｅｔ ｎ ｉｒ ｉ ，ｖｓｕａ ｎｏｈｌ ｉ ｔ ｂｏｌｓ：ｉ ａ ｍ ｎ ｍｇａ ｏ ａｃ ｌ ｅ ｄｔｅａ ｂ ｃｉ ｒ ｉ ｔｎ ｒ ｉ ｌ ｇｏ ｔ ｃ ｒｐｏｕ ｔｎ，ｎ ｅｐ ｎｅ ｔ ｙｏｉ．［ ］ ｍ ｒ ａ ｒｗｈｆ ｔ ｒ ｃｉ ａｄ ｒｓｏ ｓ ｏｈｐ ｘ ａｏ ｄ ｏ ａ Ｊ ．Ａ ｅｉ ｎ ｃ
（ 收稿 日期 ：０ ９—１ ２０ ０—１ ） ５
组 织 金 属 蛋 白酶 及 其 抑 制 因 子 与 肝 纤 维 化
孙华 丽 （ 综述 ） 张建 军（ ， 审校 ）
［ 要 ］ 基 质 金 属 蛋 白酶 （ ｔｘｍ ｔ ｌ ｒｔ ｎｓ ， Ｐ 是 体 内重 要 的 水 解 酶 之 一 ， 乎 能 降解 细胞 外基 质 （ ｘ ａｅｕａ ａ 摘 ｍａ ｅａｏ ｏｅ ａｅ ＭＭ ） ｉ ｒ ｌｐ ｉ 几 ｅｔ ｅｌ ｌ ｍ — ｒ ｌ ｒ
肝组织 结构改建 。许 多细胞 因子 参与 了这 一过程 ， 是 ＭＭ ｓ 但 Ｐ 是最重 要的一种Ｉ 。ＭＭＰ 几 乎能降解 细胞外基 质（ Ｃ Ｓ ］ ｓ Ｅ Ｍ）的
所 有成 分 ， 其 天 然 抑 制 剂 一基 质 金 属 蛋 白酶 抑 制 剂 （ Ｉ ｓ 而 ＴＭＰ ）
能与 ＭＭＰ 成员结合成 复合 物抑制其 活性 Ｊ ｓ 。二 者的调节 异 常将引起 Ｅ Ｍ合成或降解 的失 衡 ， Ｃ 与各种 器官纤 维化疾病 密 切相关。研究发现 ， 通过调节 ＭＭＰ 与 ２ Ｍ ｓ 因的表 达来治 ｓ ＂Ｐ基 Ｉ 疗肝纤维化 是肝纤 维化 治疗 的新 途径 。本文就 ＭＭＰ／ Ｉ Ｐ ｓＴＭ ｓ
肝脏B超形态学变化、MMP—2及TIMP—2水平与肝纤维化分期的关系
肝脏B超形态学变化、MMP—2及TIMP—2水平与肝纤维化分期的关系作者：张京红卢振方哲平来源：《中国现代医生》2013年第17期[摘要] 目的研究慢性乙型肝炎患者肝脏B超形态学改变、血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子水平（TIMP-2）与其肝纤维化程度的关系。
方法选择我院收治的76例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，对所有观察对象进行B超引导下肝活检及肝组织纤维化分期，B超检查测定门静脉主干、脾静脉宽度及脾脏厚度；使用ELISA检测法检测慢性乙型肝炎患者血清MMP-2和TIMP-2含量，另外选取15例健康成人作为对照，分析MMP-2、TIMP-2与患者肝纤维化程度之间的关系。
结果慢性乙型肝炎患者的脾脏厚度、门静脉主干及脾静脉宽度随患者肝纤维化分级的增加而增大；血清MMP-2、TIMP-2水平随肝纤维化程度加重而升高，r值分别为0.805、0.771，P < 0.05。
结论肝脏B超形态学改变及血清MMP-2、TIMP-2水平变化对慢性乙型肝炎患者早期肝纤维化的诊断具有重要意义。
[关键词] 超声检查；金属基质蛋白酶-2及其组织抑制因子；肝炎；乙型肝炎；肝硬化[中图分类号] R575.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）17-0058-03乙肝是全球分布，对人类危害严重的传染病，发展为慢性乙肝后容易发生肝脏纤维化、肝癌，判断肝纤维化程度较可靠的方法是进行肝脏活检[1-5]，但创伤较大，难以使用，基质金属蛋白酶（MMPs）及组织抑制剂（TIMPS）可调节肝细胞外基质（ECM）的代谢。
肝脏纤维化的发生是由于ECM合成增多，而降解相对减少导致肝内水平增多导致。
其中MMPS可促进ECM的降解，TIMPS可通过抑制MMPS阻止ECM的降解而加速肝脏纤维化，肝脏MMPS活性受到抑制，TIMPS功能活性增强导致细胞外基质降解减少[6，7]，在肝脏纤维化的病理发展过程中ECM降解发挥着重要作用，而其降解过程中起主要作用的MMPS是MMP-1、MMP2、MMP3、MMP9，与肝纤维化关系最密切的是MMP2。
基质金属蛋白酶抑制剂与肝纤维化
其在肝驻疾病 中的作用 尚不清楚 。
最 近 有 人 从 成 纤 维母 细 胞 培 养 基 中 发 现 ｒ一 种 分 子 量 为 ７ｋ ６ ｄ的 ＴＩ ＭＰ样 物 质 ， 已可 以 与 ＭＭ Ｐ１ ＭＭＰ２及 ＭＭＰ３ 、
～
中围分类号 ： ７ Ｒ５ ５ ２
文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：ｌ０ —８ Ｘ（０ ２ ０ －４３ ） ０ ４５ ３ ２ ０ ）８０ ９ ４３
３ ５ ｂ ＴＩ 纤 维 化 的 肝 脏 中 主 要 由 激 活 的 星 形 细 ．ｋ ＭＰ２在 １８ ９ ３年 Ｎｅ／和 Ｈ ｗｋｓ Ｒ ｕ 乳头 瘤 病 毒 感 染 鸡 成纤 ｎｓ ａ ｅ 用 ｏｓ
肝纤维化 是各种病 固（ 病毒性 、 酒精性 、 化学性等 ） 引起 的 细胞 外基 质 合 成 超过 降 解 ， 而 ＝ 峋 细 胞 外 基 质 在 肝 脏 过 度 ：
沉 积 的一 类 疾 病 ； 肝纤 维化 继续 发 展 可 以 导 致 肝硬 化 而 严 重 威胁 人类 健 康 。 正 常 肝 脏 Ｄｉｅ腔 是 由 非 电子 密 度 的细 胞 外 ｓ ｓ 基质 组成 ， 包 括 Ｉ 型 胶 原 、 粘 连 蛋 白 、 维 连 接 蛋 白 它 Ｖ 层 纤 及 蛋 白多糖 等 组 成 ． 对 于 维 持 肝 脏 正 常 结 构 及 肝 脏 各 种 细 它 胞 的 正常 功能 具 有 重 要 作 用 当肝 纤 维 化 时 ， 胞 外 基 质 重 细 构 （ｅ ｃ ｅｎ ） ｓｅ 正 常 的 不 连 续 的 Ｉ 型 胶 原 转 变 为 连 ｒ ａ￣ ｌ ｇ ， ｓ 腔 ｒｄｉ ｖ 续 性 ， 且 ＩＩ 型 胶 原增 多 。 参 与 细 胞 外 基 质 重 构 的 酶 娄 主 并 、Ｉ Ｉ 要 包 括 基 质金 属 蛋 白酶 、 性 蛋 白 酶 、 Ｚ肽 酶 、 织 蛋 白酶 弹 Ｐ 组 Ｇ、 Ｈ 和 Ｌ等 。其 中基 质 金 属 蛋 白 酶 在 细 胞 外 基 质 重 构 中 Ｂ、
肝脏B超形态学变化、MMP
肝脏B超形态学变化、MMP[摘要] 目的研究慢性乙型肝炎患者肝脏b超形态学改变、血清基质金属蛋白酶-2（mmp-2）及其组织抑制因子水平（timp-2）与其肝纤维化程度的关系。
方法选择我院收治的76例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，对所有观察对象进行b超引导下肝活检及肝组织纤维化分期，b超检查测定门静脉主干、脾静脉宽度及脾脏厚度；使用elisa检测法检测慢性乙型肝炎患者血清mmp-2和timp-2含量，另外选取15例健康成人作为对照，分析mmp-2、timp-2与患者肝纤维化程度之间的关系。
结果慢性乙型肝炎患者的脾脏厚度、门静脉主干及脾静脉宽度随患者肝纤维化分级的增加而增大；血清mmp-2、timp-2水平随肝纤维化程度加重而升高，r值分别为0.805、0.771，p 0.05），具有可比性。
1.2 方法肝脏活检病理组织学检查：在b超引导下进行经皮肝脏穿刺活组织检查术，仪器选用美国tru-cut16g穿刺针，每例患者检查不同部位穿刺两次，穿刺标本长度要求≥1.0 cm，至少在显微镜下包括3个以上汇管区。
甲醛固定穿刺标本，石蜡包埋，连续制成3 μm石蜡切片，分别用he染色及网状纤维染色，诊断标准按照《病毒性肝炎方案》进行肝脏纤维化分期，每张切片由两位病理科医生双盲读片。
b超检查方法由一位超声医生，于每位患者肝脏活检术前当日清晨，使用ge超声显像仪，进行空腹b超监测，包括mpv、spv 宽度和脾脏肋间厚度。
mpv内径>1.4 cm为增宽，spv内径≥1.0 cm为增宽，脾脏肋间厚度>4.0 cm为脾脏增厚。
血清mmp2、timp-2的测定采用elisa方法检测严格按照试剂盒说明书进行。
1.3 统计学方法将所得患者检测结果录入电脑，使用spss15.0统计学软件进行处理。
计量资料以均数±标准差表示，计数资料采用率的形式。
计量资料包括两组肝脏的mpv、spv宽度及脾脏肋间厚度血清mmp-2、timp-2水平的均数比较采用方差分析，mmp-2、timp2分别与肝纤维化程度作秩相关分析，计数资料脾脏增厚发生率采用χ2检验，可信区间α取0.05，p 肝脏纤维化实质以ⅰ、ⅲ型胶原为主的ecm 合成与降解失衡[11-13]，最终导致ecm肝内沉积过度。
肝纤维化与MMPs及TIMPs的研究进展
肝纤维化与MMPs及TIMPs的研究进展肝纤维化简介肝纤维化是一种渐进性纤维化过程，通常是由慢性肝病引起的。
纤维化是指肝脏中形成了大量胶原蛋白和其他成分的成纤维细胞。
这些细胞会替换原本的肝细胞，形成病变和硬结。
肝纤维化是肝病进展的一种重要表现形式，在不良的生活习惯、病毒感染等因素的影响下，发生率日趋增加。
MMPs和TIMPsMMPs（matrix metalloproteinases，基质金属蛋白酶）是一组能够降解基质蛋白质的酶，TIMPs（tissue inhibitors of metalloproteinases，金属蛋白酶抑制剂）则是MMPs的天然抑制剂。
MMPs和TIMPs共同发挥重要的生理和病理学作用。
MMPs和TIMPs在肝纤维化中的作用已受到广泛关注。
MMPs能够降解基质成分，这包括胶原蛋白、纤维连接蛋白等成分，都是纤维化的重要组成部分。
TIMPs起着抑制MMPs降解作用的作用。
研究显示，MMPs/TIMPs比值的改变与肝纤维化的程度密切相关，在肝纤维化的过程中，MMPs/TIMPs比值的异常产生可能导致肝脏内成纤维细胞的异常增殖及基质组织的过度沉积，而在恢复阶段，MMPs/TIMPs比值紊乱可能导致疤痕过度吸收、疤痕韧度的下降和肝脏结构瘤变等差错。
MMPs和TIMPs在肝纤维化中的研究进展MMPs和TIMPs在肝纤维化研究中的作用已得到广泛研究。
研究表明，在纤维化过程中，MMPs的表达量会减少，而TIMPs的表达量会增加。
在肝脏内MMPs/TIMPs比值的异常变化是导致肝纤维化发生的关键沉积物措施之一。
研究还发现，MMPs和TIMPs在各个期间对肝纤维化的影响是不同的。
当病人突然遭受肝脏损伤时，MMPs的比例倾向于有所上升，有助于降解和去除坏死细胞，同时也有助于发动肝脏修复过程。
然而，在肝脏的纤维化过程中，MMPs的比例趋向下降，但TIMPs比例略有上升。
MMPs和TIMPs作用关系的失衡是造成肝纤维化发展的重要性因素。
大鼠肝纤维化模型肝组织及血清中基质金属蛋白酶抑制因子-1的动态变化
型肝 组 织 及 血 清相 关 指 标 呈 动 态 递进 发 展 ， 为进 一 步 选 择 合 适 时机 干 预 肝 纤 维 化 进 程 提供 依 据 、 定 基 础 。 奠
Ｉ 关键词】 肝纤 维化 ；基质金属蛋 白酶 ； 基质金属蛋白酶抑制因子一 ： 鼠 ｌ大 【 中图分类号】 ５ ５ Ｒ ７ 【 文献标识码】 Ａ 【 文章编号】 ６ ２ ２ ０ （０ ７ ０ — ３ ５ ０ １７ — ８ ９ ２ ０ ）５ ０ ５ — ４
１ ． ）ｇｍ ， 组 织 内 ＴＭ — Ｒ Ａ及 蛋 白 同步 增 高 ； 时 ， ＭＰ ｌ 量 增 高 ， 处 于 高 峰 （９３ ８ ５ ｎ／ ３１ ｎ／ ｌ肝 ６ Ｉ Ｐ ｌｍ Ｎ ｌ Ｗ Ｍ — 含 ２Ｗ ７ ． ． ）ｇ ±４ ｍ 。 后缓 慢 降 低 ， 时 含 量 最 低 （６６ ６３ ）ｇ ｌ然 而仍 高 出 正 常对 照组 （２１３６ ） ｍ ； Ｗ 时 ， Ａ 含 量 １随 ８Ｗ ４ ． ．１ｎ／ ， ＋ ｍ ３ ． ． ｎ ｌ１ ＋ ６ Ｈ 升 幅 达 对 照 组 ２倍 ， 持 续 增 高 ， ６Ｗ 时处 高 峰 （５ ． ４ ． ）ｇ ； Ｎ 于 ｌＷ、 ４Ｗ 均 小 幅 递 增 ， 达 后 至 ３ ０８ ０２ ｎ／ Ｌ ￣ ６ ｍｌ ２Ｗ、 ６Ｗ 高 峰 （３ ．＋ ５１ｎ／ ｌＣ — １２ ＿ ．）ｇｍ ；Ｐ Ｉ含量 注药 后 ｌＷ 始 较 对 照 组 升 高 ， 处 高 峰 （７２ ３ ０ ｎ／ ｌＣ 一 含 量 用 药 ８１ ６Ｗ ２ ．＋ ． ）ｇｍ ；Ｐ Ⅲ ６ 后小 幅升 高 。 处 于 高峰 （． ￣ ．２ ｎ／ ｌ 肝胶 原 纤 维 百 分 含 量 ４Ｗ小 幅递 增 ， 后 ． 胶 原 纤 维 显 著 持 续 ６Ｗ ９０ １ ）ｇｍ 。 ６ ２ ４Ｗ 肝 增 高 ，ｗ时 最 高 。 大 鼠 肝组 织 病 理 变 化 显 示 ： 可 见 肝 细胞 变性 及小 点状 坏 死 灶 ， ８ ｌＷ ４Ｗ 时 ． 维 间 隔 伴 小 叶 结 纤 构紊 乱 ， 合 肝 纤 维 化 ３级 ， 符 ６Ｗ小 部 分 ３级 ， 部 ４级 ； Ｗ， 硬 化 表 现 。 结 论 大 ８ 肝 Ｄ ＭＮ 构 建 大 鼠肝 纤 维 化 模
基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化关系的研究近况
大量沉积。Ｅ Ｍ 的主要成分是胶原 。肝脏 Ｅ Ｍ的代谢主要 由 剂 。ＴＭ ． Ｃ Ｃ Ｉ Ｐ３最先是从鸡胚成纤维 细胞 中被克隆 出来 ， ＴＭ － 与 Ｉ Ｐ
进 Ｅ Ｍ 的降解 ， ⅡＭ ｓ Ｃ 而 Ｐ 通过抑制 ＭＭ ｓ Ｐ 阻止 Ｅ Ｍ的降解 ， Ｃ 从
而形 成 和促 进 肝 纤 维 化 。 本 文 主 要 就 ＭＭ ｓ ＴＭＰ 与 肝 纤 Ｐ及 Ｉ ｓ 维 化 的关 系 作 一综 述 。
２ ＭＭ ｓＴＭＰ 表 达 的 调 节 Ｐ／ Ｉ ｓ
调节 ， 包括基 因表达与调控 ， 酶原 的合成 、 分泌与激 活以及 特异 性与非特异 性抑制因子 的抑制 作用 － 。（ ） 因表达 的调节 ： ｏ １基 激素 、 生长 因子 、 癌基 因 和细 胞周 期 素均 影 响 ＭＭＰ ｓ的转 录。 白细胞 介 素－ （ 【１ 、 １ Ｉ ） 白细 胞 介 素－ （Ｌ２ 、 皮生 长 因子 广 Ｉ Ｉ－） 表 Ｉ （ Ｇ 、 小 板 衍 生 生 长 因 子 （ Ｄ Ｆ） 转 化 生 长 因 子 ｄ Ｅ Ｆ） 血 ＰＧ 、 化生 长因子 Ｂ Ｔ Ｆ ） 干 扰素 类 固醇激素 （ 括糖皮 质激 （ＧＩ 、 ３ 包
ｋ－＋ 一＋ ．＋ －＋ －＋ ．
［ 文章编 号］１７ －７ ８ ２ ０ ）３ ）１ －３ ６３７ ６ （ ０ ８ ０ ４４ ００ ２
基质金属蛋 白酶及其抑制 因子与肝纤维化关 系的研究近况
潘婷婷 袁海宁 审校） （ ， （ 广西医科大学 研究生学院２０ 级 １ ； ０６ 班 第一附属 医院感染科教研 室， 南宁 ５０２ ） ３０１
工 业 出 版社 。９６：８ ． １９ ３ ８
［ ］ 冯应琨． ２ 临床脑 电图学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 民卫生出版社 ，９４：５ ． 人 １９ １４
基质金属蛋白酶及其抑制剂对肝纤维化的影响
学性等 ） 引起的细胞外基质 （ｘ ａｅ ｕ ｒ ａｒ ，Ｃ 合成超 ｅｔ ｃｌ ｌ ｔｘ Ｍ） ｒ ｌａ ｍ ｉＥ
１基 质 金属 蛋 白酶 对 肝 纤维 化 的 影 响
ＭＭＰ 是一类 与细胞间基质蛋 白代谢相关 的结构蛋 白， ｓ
是具有锌 、 钙依赖性的酶 ， 降解诸如胶原 、 白聚糖等细胞外 蛋
基质成分 ， 在正常胚胎 发育 、 器官发生 、 血管形成 、 子宫复 旧、 创伤愈合过程及关节 炎 、 牙周 炎 、 骨质 疏松 、 组织 纤维化 、 肿 瘤 的浸润与转移等多种疾病过程 中起着重要 的作用＿ ｌ １ 。按其
肝 纤维 化 中起 着重 要 的作 用 ， 综述 如 下 。 现
ＭＭＰ １ 一 活性 随肝纤维化发展而下降 的确切原 因尚不清
楚， 目前认 性酶 的特异性抑制物的增加。 肝纤维化时 ＭＭＰ １的活性调节研究
表明 ： 即使在肝纤维化充分 发展 期 ， 自身 免疫性慢 性肝 ① 如 炎的末期 ， 仍有部分 ＭＭＰ 的表达， １ 这说 明基质重塑（ ｍ ｄｌ ｒ ｏｅ ｅ —
弹性蛋 白酶和膜 型 Ｍ ５组［ ＭＰ ２ １ 。人体中最早被发现并研究得
最清楚的 ＭＭ Ｐ是 ＭＭ 一 ， Ｐ １其在人体包括肝脏在内的组织中
广泛表达。
ＴＭＰ ２ ＴＭ 一 。ＴＭＰ 不仅可以通过抑制 ＭＭ ｓ Ｉ 一 、Ｉ Ｐ ３ Ｉ ｓ Ｐ 在肝纤维 化及肿瘤 发生发展中起重要作用 ， 而且对细胞增殖 、 细胞转 化等也具有重要作用 。ＴＭ 一 主要 由激活的肝脏 星形细胞 ＩＰ １ 产生 ， 在肝脏急性期反应中肝细胞也可产生 。 Ｉ 一 ＴＭＰ ２在纤维 化 的肝脏中主要 由激活 的星形 细胞 产生 ， 外 ， 此 肿瘤细胞也 可产生。ＴＭＰ ３ Ｉ 一 在正常及纤维化肝脏 中均无表达。 ＴＭＰ 分子对 ＭＭ ｓ Ｉ ｓ Ｐ 分子 的抑制作用是通过与 Ｍ ｓ ＭＰ 的 活性 部位结合 ，从而影响 Ｍ ｓ ＭＰ 分子对 其底 物的结合 而实
基质金属蛋白酶—2与肝纤维化
有 的间质 细 胞 都 高 度 表 达 ＭＭ －， 以纤 维 间 隔 和 Ｐ２ 尤
汇管 区最 明显 ， 此 ， 文 就 ＭＭＰ２的性 质 及 其 在 因 本 一 肝纤 维化 发 生 发展 过 程上 的作 用 作一 综 述 。 １ ＭＭ Ｐ及 相关 酶 类 的生物 学 特性
几 乎 能降 解 除多 糖 以外 的全 部 Ｅ Ｍ成 分 ， 二 是 使 Ｃ 其
１ ） 膜 型一 ＭＰ Ｍ １Ｍ ／ ， １ Ｍ （ Ｔ 一 ＭＰＭＭｐ１ ， ２ＭＭ ／ Ｐ －４ ＭＴ 一 Ｐ ＭＭ －
由于 Ｅ Ｍ合 成增 多 ， 大 程度 上 是 由 于 降解 减 少 引 Ｃ 更
起 的 （ 别 是 后 期 ） 。在 Ｅ Ｍ 降 解 过 程 中起 主 要 特 … Ｃ
基 质 金 属 蛋 白酶 一 ２与 肝 纤 维 化
李 晓冰 青 海省 妇产 儿 童 医院
摘
要
肝 纤维化 是 肝脏 细胞 外基 质合 成 和 降解 失衡 的结 果 。基 质 金 属蛋 白酶 （ Ｐ 和金 属 ＭＭ ）
蛋 白酶组 织 抑制 剂 （Ｔ Ｐ 是细 胞 外基 质 （ Ｃ 合 成 及 降解代 谢 平衡 调 节 中 两个 重要 因素 。研 究 显 １Ｍ ） Ｉ Ｅ Ｍ）
１ ， －ＭＭ ／ Ｐ １ ５ ＭＴ３ Ｐ ＭＭ －６和 Ｍ ４Ｍ ／ Ｔ 一 ＭＰＭＭＰ １ ） 其 他 －７ 和 成员 （ 属 弹性 蛋 白酶／ Ｐ １ ） 金 ＭＭ －２ 。 所有 ＭＭ ｓ 有 以下 理 化 特性 ： １均 以潜 酶形 Ｐ均 （）
作 用 的 基 质 金 属 蛋 白 酶 （ ａｉ ｅ ｌｐ ｅ ａｅ Ｍ ｔｘ ｍ ｔｌ ｍｔｎｓ， ｒ ａｏ ｉ ＭＭ ） 一 组锌 离 子依 赖 酶 、 Ｐ是 金属 蛋 白酶组织 抑 制 剂
免疫性肝纤维化中肝组织基质金属蛋白酶—1及其抑制因子—1的表达
ＴＩ ＭＢ１ 行 性 升 高 ， ＭＭＰ １活 性 受 到 抑 制 。 ＭＭＰ １ 进 使 一 一／ ＴＩ － ＭＰ１比值 逐 渐 下 降 ， 一 步 说 明 基 质 合 成 和 降 解 平 衡 的 进 逐 渐 失 调 加 速 了肝 纤 维 化 的 形 成 。
、
材 料 和 方 法
表 １ 大 鼠免 疫 性 肝 纤 维 化 形 成 不 同时 期 纤 维 组 织 增 生 程 度
１ 主 要 试 剂 ：０ 人 白 蛋 白 （ Ａ， ｒ ｕ ｈ ｒ ｃ ｕｉ ． ２％ ＨＳ Ａ ｍｏ ｒＰ ａｍａｅ ｔ — ｃｌ ｏ ａ ｙ ａ Ｃ ｍｐ ｎ ，ＵＳ ； Ａ） ＭＭＰ １及 ＴＩ 一 一 ＭＰ １测 定 （ Ｌ Ｓ 试 剂 Ｅ ＩＡ）
质 金 属 蛋 白 酶 一（ １ ＭＭＰ １ 及 金 属 蛋 白 酶 抑 制 因 子 一 （ ＭＰ 一） １ ＴＩ 一
物 Ａ和 Ｂ， 温育 １ ｉ ， 入终 止 液 ， ０ｍ ｎ 加 同上 得 出蛋 白表达 数值 。
６ 数 据 处 理 及 统 计 ： 级 资 料 用 秩 和 检 验 ， 量 资 料 用 ． 等 计
“ （／ ＋” Ｔ＝６） “＋ ＋” Ｔ＝ １ ， ， （／ ０） “＋ ＋ ＋” ｎ＝ １ ） （ １ 。从 表 ３可
４ ．ＭＭＰ １ 白 表 达 的 测 定 ： Ｌ Ｓ 法 。２ １ 准 品 、 一蛋 Ｅ ＩＡ ０ 标 肝 匀 浆 液 加 入 相 应 反 应 孔 中 ， 入 ４ １ 鼠 Ｍ ＭＰ １Ｂｏｉ ， 加 ０ 抗 一 ｉｔ ｎ 孵 育 ２ ｎ 洗 板 ， 入 １０ １ 鼠 ＭＭＰ１Ｐ Ｄ， 育 ２ ０ｍｉ， 加 ０ 抗 一 Ｏ 孵 ０
ｍｉ ， 板 ， 入 底 物 Ａ 和 Ｂ， 育 ３ｍｉ ， 入 终 止 液 ， Ｐ ０ ｎ洗 加 温 ｎ加 用 ４０
基质金属蛋白酶-9与肝纤维化关系的研究进展
基质金属蛋白酶-9与肝纤维化关系的研究进展张素梅;谢玉梅;张颖;贾战生【摘要】Liver fibrosis is caused by the imbalance between matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibitor of metalloproteinasas (TIMPs) , which can result in the deposition of a large number of extracellular matrix in the interstitial cells and the pathological changes. The current studies have found that MMP-9 plays an important role in the process of inducing and promoting liver fibrosis. On the contrary, there are some opinions that MMP-9 can reverse liver fibrosis and there is a negative correlation between MMP-9 and liver fibrosis. Therefore, this review will elucidate the new advances on the function of MMP-9 in recent years.%肝纤维化是由于基质金属蛋白酶( matrix metalloproteinases,MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinasas,TIMPs)比例失调,造成细胞外基质大量沉积在细胞间质中,引起的病理改变.目前研究发现MMP-9在肝纤维化形成过程中有诱发和促进作用,但也有一些相反的意见,认为其具有逆转肝纤维化的作用,与肝纤维化呈负相关.因此,本文就近年来对MMP-9功能的研究作一概述.【期刊名称】《胃肠病学和肝病学杂志》【年(卷),期】2012(021)006【总页数】3页(P586-588)【关键词】基质金属蛋白酶-9;肝纤维化;进展【作者】张素梅;谢玉梅;张颖;贾战生【作者单位】第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心,陕西西安 710038;第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心,陕西西安 710038;第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心,陕西西安 710038;第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心,陕西西安 710038【正文语种】中文【中图分类】R575肝纤维化是所有慢性肝病的共同病理变化，其病理基础是由于细胞外基质(ECM)的合成与降解失衡，导致ECM在细胞间质中大量沉淀所致［1-2］。
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组织金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)是体内重要的水解酶之一，几乎能降解细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的所有成分;基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinasas，TIMPs )是MMPs的内源性抑制系统。
近年来发现，MMPs/TIMPs调节失衡与肝纤维化的关系密切，可从多方面影响肝纤维化的形成。
通过干扰MMPs与TIMPs基因的表达，研究肝纤维化的发病机制和药物治疗是有希望的途径。
【关键词】 MMPs ;TIMPs; 肝纤维化肝纤维化是许多慢性肝病的共同病理过程，是细胞外基质(ECM)的合成与降解失衡，导致在细胞间质的过度沉积[1-4 ]，肝组织结构改建。
许多细胞因子参与了这一过程，但是MMPs是最重要的一种[5]。
MMPs 几乎能降解细胞外基质(ECM) 的所有成分，而其天然抑制剂-基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)能与MMPs成员结合成复合物抑制其活性[6]。
二者的调节异常将引起ECM合成或降解的失衡，与各种器官纤维化疾病密切相关。
研究发现，通过调节MMPs与TIMPs基因的表达来治疗肝纤维化是肝纤维化治疗的新途径。
本文就MMPs/TIMPs与肝纤维化的关系及治疗前景作一综述。
1 MMPs分类、功能、结构及活性的调控MMPs是一组基质金属蛋白酶。
MMPs在肝内主要由肝星状细胞(HSC) 和 Kupffer细胞表达分泌，参与细胞外基质降解的一类锌-钙离子依赖的内源性蛋白水解酶家族，因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名，是迄今为止发现的唯一能分解纤维类胶原的酶，几乎能降解除多糖以外的所有ECM成分，在生理病理过程中发挥着重要的作用。
MMPs家族由24种成员组成，其中有23种存在于人体中。
1. 1 MMPs 可被分成六类[7] (1) 胶原酶类。
主要包括MMP-1、MMP-8、MMP-13和MMP-18。
它们能够降解间质胶原(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原)，也能消化许多别的ECM及可溶性蛋白[5]。
MMP-1又称成纤维细胞型，是人类主要的间质胶原酶，结缔组织细胞、肝内HSC、肝细胞、枯否氏细胞均有分泌，分解底物为胶原蛋白 (ⅢIⅡ)。
而MMP-13是鼠类主要的间质胶原酶。
MMP-8又称中性粒细胞胶原酶，主要降解Ⅰ型胶原。
(2) 明胶酶类(gelatinases)。
包括MMP-2(明胶酶A)及MMP-9(明胶酶B)。
它们可降解明胶(变性胶原)和Ⅳ、Ⅴ和Ⅺ型胶原、层粘连蛋白、蛋白聚糖等。
MMP-2和胶原酶类以相似的方式可以降解I,Ⅱ,和Ⅲ型胶原，但其活性较MMP-1弱[8]。
(3) 基质分解素(strogylisin)。
主要包括MMP-3、MMP-10和MMP-11，仅有MMP-3在肝脏中存在。
底物广泛，包括蛋白多糖、层粘蛋白、纤维连接蛋白、Ⅳ型胶原、明胶等。
MMP-3与MMP-10均有相似的结构及降解底物，但MMP-3蛋白水解的效率比MMP-10更高，除能降解ECM成分外，它还可激活多种MMPs的前酶原。
MMP-11对ECM的降解能力较弱。
(4)基质溶解因子(Matrilysins)。
MMP-7及MMP-26归为此组。
MMP-7又称Matrilysin 1，MMP-26又称matrilysin-2或endometase。
在正常肝组织中，MMP-26仅在内皮细胞有少量表达。
MMP-26能降解许多ECM成分，它大多被储存在细胞内[9]。
(5)膜型金属蛋白酶MT-MMPs(Membrane-Type MMPs)。
这一类特殊的蛋白酶，主要存在于细胞膜上，具有广泛的底物特异性。
其中4个是Ⅰ型跨膜蛋白(MMP-14、15、16、24)，2个是GPI锚连蛋白(MMP-17及MMP-25)。
除了MT14-MMP之外，其它均能激活MMP-2酶原，这些酶能降解许多ECM分子。
MMP-14在肝脏主要表达于活化的HSC中，与TIMP-2、MMP-2共同调节胶原的代谢[10]。
(6) 其它种类的MMPs。
包括MMP-12、19、20、21、23、27和28。
MMP-12主要在巨噬细胞中表达，对于巨噬细胞的迁移起重要作用。
MMP-23主要在一些再生性的组织中表达。
而MMP-28在角质细胞中可见，在机体中参与止血及伤口修复[11]。
MMP-12及MMP-19和MMP-20的主要底物为弹力蛋白、明胶、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原。
1. 2 MMPs的调控 MMPs在机体内的表达，激活及其对底物的分解过程均受到严格的调控[5]，其调控包括酶基因表达水平，酶原激活程序以及酶活性抑制等3个方面[12]：(1)MMPs的表达水平的调控：正常成人组织大多数MMPs表达水平很低，但在各种炎症细胞因子、激素、生长因子、CD40等作用下不仅能促进或抑制 MMPs mRNA的转录，且能影响其半寿期。
对MMPs表达起上调作用的有TNF-α、IL-1 、血小板源性生长因子及成纤维细胞生长因子(FGF)等，起下调作用的有转化生长因子-β (TGF-β)、视黄酸、血管紧张素Ⅱ和糖皮质激素等，增强和抑制因子都作用于MMPs基因的前肽区。
(2)MMPs的活性水平的调控：MMPs均以酶原的形式分泌，活化后才具有降解细胞外基质的作用。
活化方式有3种[13]，即①逐级活化方式-由血清蛋白酶如纤维蛋白溶解酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶，弹性蛋白酶或激肽酶等介导。
纤维蛋白溶解酶是MMPs最强有力的生理性激活物[14]。
MMPs 的前肽结构被血清蛋白酶水解，酶活性中心暴露后，再被其它的蛋白水解酶(如其他MMPs)激活。
体内最主要的MMPs激活系统是组织或血浆的纤溶酶原钎溶酶系统( t-PA )。
此外，某些 MMPs 可相互激活[5];②膜型-MMPs激活-膜型-MMPs能活化其它MMPs;③细胞内激活-细胞内激活的精确机制和对细胞外MMP s 活性的作用，目前仍不明了。
(3)MMPs的活性抑制物：激活的MMP可被普通的蛋白酶清除剂抑制，如α2-巨球蛋白，但主要被特异的TIMPs所抑制。
2 TIMPs的分类、结构、功能及活性的调节MMPs的表达和活化并不一定代表最后对ECM降解能力。
因体内还存在MMPs的特异的抑制剂-组织金属蛋白酶抑制物(TIMPs) 。
这是一组具有抑制 MMPs功能的活性多肽，在 ECM代谢的调节中起着非常重要的作用。
目前共发现有4种TIMPs[5]。
根据其发现的先后顺序依次命名为TI MP- l、TI MP-2、TIMP-3和TIMP-4。
TIMPs是一组低分子量的糖蛋白，广泛分布于组织和体液中，可由成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞等产生。
其中TIMP- l、TI MP-2、TI MP-4为可溶性蛋白质分子;而TIMP-3是仅存在于ECM中、并与ECM紧密结合的不可溶性蛋白质分子[15]。
TIMPs由各自独立的基因表达，但四者氨基酸序列具有部分同源性，且都可与特定的活性MMPs通过非共价键结合成1:1复合物，抑制后者对ECM的降解，这种非共价键结合在生理条件下是可逆的。
在肝脏中主要由HSC表达TIMP-1、2、3[16]。
对肝纤维化的诊断，TIMP-1特异性和敏感性均明显高于TIMP-2。
TIMP-1在肝脏由Kupffer细胞、HSC及肌纤维母细胞产生，以活化的HSC表达最强[17]，能被多种细胞因于诱导产生，是体内存在与作用最广泛的一种TIMPs。
它能结合除14、19以外的所有MMPs而使其活性减弱，可有效地抑制除MMP-2和膜型MMP外的大多数MMPs，是MMP-9活性的特异性抑制剂。
TGF-β、IFN、TPA、IL-1、IL-10、IL-β，NO、RA等能够诱导TIMP-1的基因表达[18]。
TIMP-2是Ⅳ型胶原酶 MMP -2 的特异性抑制因子。
TIMP- 2/MMP -2系统对Ⅳ型胶原的增生沉积和降解起着重要的调节作用。
3 针对MMPs和TIMPs的抗肝纤维化策略肝硬化是肝脏实质性病变，不可逆转，而肝纤维化是可逆性病变。
因此，研究肝纤维化发病机制，进而寻求阻断肝纤维化过程的有效方法，对控制肝病的进展，有着十分重要的意义。
鉴于MMPs和TIMPs在肝纤维化发展中的不同作用，增加MMPs或减少TIMPs的合成与表达将是肝纤维化基因治疗的一条新思路。
目前国内外有关抗肝纤维化的各种治疗手段大多是通过下调TIMP-1、2的表达来实现肝纤维化的逆转[19,20]。
杨长青等[21]运用DNA重组技术构建可表达大鼠MMP-1基因和反义TIMP-1序列的真核表达质粒，将其导入免疫损伤性肝纤维化模型大鼠体内，观察MMP-1和反义TIMP-1重组表达质粒对实验动物肝纤维化的影响。
结果显示MMP-1、反义TIMP-1表达质粒均可促进肝脏中I、Ⅲ型胶原的降解;病理形态学显示MMP-1、反义TIMP-1 表达质粒均对肝纤维化有一定的逆转作用;以两种质粒的联合应用效果最好，单独使用反义TIMP-1表达质粒次之，单独使用MMP-1表达质粒作用有限。
Parsons CJ [22]等发现在CCl4持续损伤的情况下，应用人抗鼠TIMP-1抗体后胶原沉积减少，能有效地控制肝纤维化的发展。
Liu WB 等[23,24]选用TIMP-1为靶基因，将表达反义TIMP-1的重组质粒导人体外培养的HSC内及用猪血清诱导的肝纤维化大鼠体内，发现反义TIMP-1均被成功表达，TIMP-1的基因及蛋白表达水平明显下降，间质胶原酶的活性增加，I、Ⅲ型胶原沉积量减少。
显示肝纤维化水平降低66%。
Iimuro Y等为了研究人类基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)传递的基因能否降解I型和Ⅲ型胶原的问题，利用腺病毒和MMP的重组体导入已造模成功的小鼠体内，发现纤维化显著的减弱[25] 。
转化生长因子β1 (transforming growth factor beta 1，TGF-β1)为现知最强力的促肝纤维化因子。
在肝纤维化启动、进展乃至肝硬化的形成中发挥核心作用，是激活HSC并促进其表达ECM的关键因素，除抑制间质胶原酶和基质溶解素的表达外，同时还具有促进TIMP-1和MMP-2的作用[26]。
由于TGF-β1在肝纤维化中的广泛作用，尤其是肝损伤后，肝HSC对 TGF-β1的自分泌及旁分泌作用，使得阻断TGF-β1的信号通路成为肝纤维化治疗的理想选择[27]。
总之，随着研究的不断深入，人们逐步认识到MMPs/TIMPs在肝纤维化形成中的作用，故研制的药物如能抑制TIMPs活性/增强MMPs 活性，或者抑制其上游信号通路间接抑制TIMPs促进MMPs的活性，从而抑制肝纤维化，就有可能减缓或阻断肝纤维化的进程。