致病性弧菌增菌培养基和选择性鉴别培养基的研究
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
片 brjo15oneoftheimPortantfactorsinfluencingAquaticsafety.AsatyPeof
haloPhiliebaeteria， itusuallyexjstsinoffingseawater， seabedsediment，Plankton，
infectedmostlybecauseofuncookedseafoodorPickledfoodwhichare
contan卫 natedbyPathogenic片b八 0.ThePrimarysylnPtomsarebellyaehe，diarrhea，
vo而t， feverand50on.LifewillbeindangerifthePatientcouldn’ tbetreatedin
且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
5海鱼弧菌的选择性鉴别培养基的研制
本试验以海鱼弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌剂的抵
抗力为基础，设计开发出海鱼弧菌选择性鉴别培养基(vdDM)。试验中对
VdDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37oC
培养16h一24h，vdDM对海鱼弧菌具有较好的显色效果、平板效率、选择性
Thisl· esearchoPt而让ed巧brioe而 chmentmediumandcultureconditionsin
ordertoobtainamethodforenriehingvibrio， Theresultsshowedasfollow， taking
性弧菌为代表，用vEM在(36士l)“c+摇床 120r/min+2层牛皮纸封口条件下
增菌培养，在相同时间内，其增菌菌液浓度是GB厅4789菌菌液浓度的 1.8士0.6倍;对12中致病性弧菌进行的
增菌培养试验结果表明，VEM能有效促进12种致病性弧菌的生长繁殖。VEM
highsensitivity， sPecifieityandraPidness.SeleetiveDifferentialmedia15beeo而ng
themaintrendof而 crobialdetection.AtPresent，only巧 brjoParahae脚olyticus，
培养16h一24h，vciDM对辛辛那提弧菌具有较好的选择性和特异性;辛辛那
提弧菌菌落为黄色，其它致病菌菌落呈绿色或没有有效菌落形成;VoiDM对
辛辛那提弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(82.14士4.45)%;检出限为101
cfu/mL。因此，VciDM对海产品中辛辛那提弧菌分离鉴别与检测是可行的，
巧 briocholerae，巧 brioParahaemolyticus，巧 briovuln沪cus，巧 briodan，sela，巧brio
mimzc璐，巧 briocincinnatiensjs，环 briometschniko飞，11，巧 brjoholljsae，巧brio
j7uvialfs，巧br才 0furnissj万，巧br才oa匆nolyr万 cusand巧br泛 0earchariae.Pathogenie
VI五DM对海产品中拟态弧菌分离鉴别与检测是可行的，且具有操作简便、经
济、结果易于观察等优点。
4辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基的研制
本试验基于辛辛那提弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌
剂的抵抗力，设计开发出辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基(VciDM)。试验中对
VciDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37oc
Jan.2010
CollegeofFoodSeieneeandBiotechnology
Engineering， ZhejiangGongshangUniversity
Hangzhou，310035，P.R.China浙江工商大学硕士学位论文
致病性弧菌增菌培养基和选择性鉴别培养基的研究
Vibriocholeraeand巧 briovuln沪 cushasaselectivedifferentialmediuln.butother
Pathogenie巧 brionotyet.ThePurposeofthisstudy15todesignSeleetive
VvDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:VvDM
对创伤弧菌具有较好的选择性和特异性;用vvDM在 39OC培养 16h佗4h，
创伤弧菌菌落为黄色;其它各种弧菌及非弧菌属致病菌菌落呈绿色或未形成
有效的可见菌落;vvDM对创伤弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为 (92.42士
关键词:选择性鉴别培养基;致病性弧菌;快速检测;创伤弧菌;拟态弧菌;
辛辛那提弧菌;海鱼弧菌浙江工商大学硕士学位论文
STUDESONENRICHMENTMEDIUMANDSELECTIVE
DIFFERENTIALMEDIUMOFPATHOGENIC
ABSTRACT
Pathogenie巧 briobelongingtogenus巧brio， whiehhas12sPeeies，ineluding
密级:公开中图分类号 :TS207.4
④声浮二商砍事
硕士学位论文
论文题目:
作者性名:
学科专业:
研究方向:
指导教师:
提交日期:二。一0年一月 DissertationSubmittedtoZhejiangGongshang
UniversityforMaster， 5DegreeofEngineering
studesonEnrichmentMediumandSeleetiveDil…ferential
MediumofPathogenie巧brio
Author:KeminShen
Major:FoodScience
SuPervisor:Prof.GuangyingZhao
摘要
致病性弧菌(pathogenic巧brio)属于弧菌属(genus巧brio)，有12个种，包
括霍乱弧菌(巧 brioeholerae)、副溶血性弧菌(巧brio那rahaemolyric。)、创伤弧
菌(巧 briovuln沪eus)、海鱼弧菌(巧 briodamsela)、拟态弧菌(巧 briomi，ieus)、辛
3.43)%;检出限为10’c创mL;因此，vvDM对海产品中创伤弧菌分离鉴别与
检测是可行的，且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
3拟态弧菌选择性鉴别培养基的研究
本试验以拟态弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的
抵抗力为基础，设计研制了拟态弧菌选择性鉴别培养基 (VInDM)。试验中对浙江工商大学硕士学位论文
辛那提弧菌(巧brioc万nc万nnariensis)、梅氏弧菌 (Vibriometschnikovi万)、霍利斯弧
菌(巧 brioholl才sae)、河流弧菌(Vibrioj7uvialis)、弗尼斯弧菌(巧briofurnissii)、溶
藻弧菌(巧brioa勿n口lylicus)和鳖鱼弧菌(巧bri口carchariae)。致病性弧菌是影响
andseafood(fishandseashell).Pathogenie巧br才 015thePrimaryPathogenthat
causesfoodPoisoninginlittoralduringsulll刀 lerandautulnn.PeoPlecouldbe
VlnDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37℃
培养24h时，VlnDM对拟态弧菌具有较好的选择性和特异性;拟态弧菌菌落
为绿色或蓝绿色，其它弧菌菌落呈黄色或没有有效菌落形成;VmDM对拟态
弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(90.1士6.8)%;检出限为IOZc创mL。因此，
别培养基，以满足和储备日益严格的食品安全标准和不同检测条件的需求。浙江工商大学硕士学位论文
本论文主要围绕以下几个方面开展了一些工作:
1致病性弧菌增菌培养基及培养条件的改进研究
本试验对弧菌增菌培养基(VEM)及培养条件进行改进研究，经过优化，获
得一套适用于致病性弧菌增菌的VEM及培养条件。试验结果表明:以副溶血
VEM分别与四种选择性鉴别培养基结合检测目标致病性弧菌的方法与常
规方法(TCBs结合法国梅里埃细菌鉴定系统 API20E试剂条或弧菌科生化鉴
定管)相比，结果直观，易于观察，减少了溶藻弧菌等常伴菌的干扰，省去了
TCBS分离培养后的生化试验，降低检测成本，减少工作量，操作简便，具有
更高的检测效率和鉴别能力。
Di月七 rentialMediumfortherapidseParatio几 identificationanddeteetionofother
Pathogenic巧brio， tomeettheneedsoftheinereasinglystringentfoodsafety
standardsanddifl七 renttesteonditions.
TheresearchescarriedoutinthisPaperwouldbedescribedasfollows:
1.Studyonenriehmentmediumandeul加 reconditionsofPathogenie阵brio
组成为:混合蛋白陈2%(胰蛋白陈:鱼蛋白陈为1:3)、酵母浸膏0.2%、Nacl3%、
pHS.6。这为后续工作的顺利开展奠定了基础。
2创伤弧菌选择性鉴别培养基的研制
本试验以创伤弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的
抵抗力为基础，设计研制了创伤弧菌选择性鉴别培养基(vvDM)。试验中对
分离与生化反应有机的结合起来，使得检测结果直观，易于观察辨别，且具
有低成本、特异性强、灵敏度高和检测快速、操作方便等优点。选择性鉴别
培养基是国内外微生物检测发展的一个主要发展方向。目前，致病性弧菌仅
有副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌具有选择性鉴别培养基，其它致病性
弧菌尚没有。本研究的目的和意义是设计和研制其它致病性弧菌的选择性鉴
水产品安全的重要因素，通常存在于近海海水、海底沉积物、浮游生物、海
产品(鱼类和贝类)中，是夏秋季沿海地区引发食物中毒的首要病原菌。人类多
因食入未煮熟的海产品或污染此菌的盐渍食物而感染;主要症状为腹痛、腹
泻、呕吐和发热等。如果不及时治疗，可能会危急生命。
选择性鉴别培养基是在生化反应的基础上开发的技术，它将传统的细菌
tilne.
SeleetiveDifferential一nedia， whieh15basedonbiochemicalreaetion，isa
detectionteehnology.Ithassuceessfullyeombinedthereactionofbioehe而stry
V浙江工商大学硕士学位论文
andtheti· aditionalseParationofbiochemistryofbacterium， whieh15easyto
observetheresultofdeteetion.Inaddition， therearesorneadvantages一 loweost，
和特异性;海鱼弧菌菌落为绿色:其它致病菌菌落呈黄色或未形成有效的可
见菌落;VdDM对海鱼弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为 (83.46士3.42)%;检浙江工商大学硕士学位论文
出限为10，c创mL。因此，vdDM对海产品中海鱼弧菌分离鉴别与检测是可行
的，且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
haloPhiliebaeteria， itusuallyexjstsinoffingseawater， seabedsediment，Plankton，
infectedmostlybecauseofuncookedseafoodorPickledfoodwhichare
contan卫 natedbyPathogenic片b八 0.ThePrimarysylnPtomsarebellyaehe，diarrhea，
vo而t， feverand50on.LifewillbeindangerifthePatientcouldn’ tbetreatedin
且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
5海鱼弧菌的选择性鉴别培养基的研制
本试验以海鱼弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌剂的抵
抗力为基础，设计开发出海鱼弧菌选择性鉴别培养基(vdDM)。试验中对
VdDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37oC
培养16h一24h，vdDM对海鱼弧菌具有较好的显色效果、平板效率、选择性
Thisl· esearchoPt而让ed巧brioe而 chmentmediumandcultureconditionsin
ordertoobtainamethodforenriehingvibrio， Theresultsshowedasfollow， taking
性弧菌为代表，用vEM在(36士l)“c+摇床 120r/min+2层牛皮纸封口条件下
增菌培养，在相同时间内，其增菌菌液浓度是GB厅4789菌菌液浓度的 1.8士0.6倍;对12中致病性弧菌进行的
增菌培养试验结果表明，VEM能有效促进12种致病性弧菌的生长繁殖。VEM
highsensitivity， sPecifieityandraPidness.SeleetiveDifferentialmedia15beeo而ng
themaintrendof而 crobialdetection.AtPresent，only巧 brjoParahae脚olyticus，
培养16h一24h，vciDM对辛辛那提弧菌具有较好的选择性和特异性;辛辛那
提弧菌菌落为黄色，其它致病菌菌落呈绿色或没有有效菌落形成;VoiDM对
辛辛那提弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(82.14士4.45)%;检出限为101
cfu/mL。因此，VciDM对海产品中辛辛那提弧菌分离鉴别与检测是可行的，
巧 briocholerae，巧 brioParahaemolyticus，巧 briovuln沪cus，巧 briodan，sela，巧brio
mimzc璐，巧 briocincinnatiensjs，环 briometschniko飞，11，巧 brjoholljsae，巧brio
j7uvialfs，巧br才 0furnissj万，巧br才oa匆nolyr万 cusand巧br泛 0earchariae.Pathogenie
VI五DM对海产品中拟态弧菌分离鉴别与检测是可行的，且具有操作简便、经
济、结果易于观察等优点。
4辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基的研制
本试验基于辛辛那提弧菌特有的综合酶系统及其代谢特点和对某些抑菌
剂的抵抗力，设计开发出辛辛那提弧菌选择性鉴别培养基(VciDM)。试验中对
VciDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37oc
Jan.2010
CollegeofFoodSeieneeandBiotechnology
Engineering， ZhejiangGongshangUniversity
Hangzhou，310035，P.R.China浙江工商大学硕士学位论文
致病性弧菌增菌培养基和选择性鉴别培养基的研究
Vibriocholeraeand巧 briovuln沪 cushasaselectivedifferentialmediuln.butother
Pathogenie巧 brionotyet.ThePurposeofthisstudy15todesignSeleetive
VvDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:VvDM
对创伤弧菌具有较好的选择性和特异性;用vvDM在 39OC培养 16h佗4h，
创伤弧菌菌落为黄色;其它各种弧菌及非弧菌属致病菌菌落呈绿色或未形成
有效的可见菌落;vvDM对创伤弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为 (92.42士
关键词:选择性鉴别培养基;致病性弧菌;快速检测;创伤弧菌;拟态弧菌;
辛辛那提弧菌;海鱼弧菌浙江工商大学硕士学位论文
STUDESONENRICHMENTMEDIUMANDSELECTIVE
DIFFERENTIALMEDIUMOFPATHOGENIC
ABSTRACT
Pathogenie巧 briobelongingtogenus巧brio， whiehhas12sPeeies，ineluding
密级:公开中图分类号 :TS207.4
④声浮二商砍事
硕士学位论文
论文题目:
作者性名:
学科专业:
研究方向:
指导教师:
提交日期:二。一0年一月 DissertationSubmittedtoZhejiangGongshang
UniversityforMaster， 5DegreeofEngineering
studesonEnrichmentMediumandSeleetiveDil…ferential
MediumofPathogenie巧brio
Author:KeminShen
Major:FoodScience
SuPervisor:Prof.GuangyingZhao
摘要
致病性弧菌(pathogenic巧brio)属于弧菌属(genus巧brio)，有12个种，包
括霍乱弧菌(巧 brioeholerae)、副溶血性弧菌(巧brio那rahaemolyric。)、创伤弧
菌(巧 briovuln沪eus)、海鱼弧菌(巧 briodamsela)、拟态弧菌(巧 briomi，ieus)、辛
3.43)%;检出限为10’c创mL;因此，vvDM对海产品中创伤弧菌分离鉴别与
检测是可行的，且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。
3拟态弧菌选择性鉴别培养基的研究
本试验以拟态弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的
抵抗力为基础，设计研制了拟态弧菌选择性鉴别培养基 (VInDM)。试验中对浙江工商大学硕士学位论文
辛那提弧菌(巧brioc万nc万nnariensis)、梅氏弧菌 (Vibriometschnikovi万)、霍利斯弧
菌(巧 brioholl才sae)、河流弧菌(Vibrioj7uvialis)、弗尼斯弧菌(巧briofurnissii)、溶
藻弧菌(巧brioa勿n口lylicus)和鳖鱼弧菌(巧bri口carchariae)。致病性弧菌是影响
andseafood(fishandseashell).Pathogenie巧br才 015thePrimaryPathogenthat
causesfoodPoisoninginlittoralduringsulll刀 lerandautulnn.PeoPlecouldbe
VlnDM的显色效果、平板效率、灵敏度和特异性进行评价。结果显示:37℃
培养24h时，VlnDM对拟态弧菌具有较好的选择性和特异性;拟态弧菌菌落
为绿色或蓝绿色，其它弧菌菌落呈黄色或没有有效菌落形成;VmDM对拟态
弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为(90.1士6.8)%;检出限为IOZc创mL。因此，
别培养基，以满足和储备日益严格的食品安全标准和不同检测条件的需求。浙江工商大学硕士学位论文
本论文主要围绕以下几个方面开展了一些工作:
1致病性弧菌增菌培养基及培养条件的改进研究
本试验对弧菌增菌培养基(VEM)及培养条件进行改进研究，经过优化，获
得一套适用于致病性弧菌增菌的VEM及培养条件。试验结果表明:以副溶血
VEM分别与四种选择性鉴别培养基结合检测目标致病性弧菌的方法与常
规方法(TCBs结合法国梅里埃细菌鉴定系统 API20E试剂条或弧菌科生化鉴
定管)相比，结果直观，易于观察，减少了溶藻弧菌等常伴菌的干扰，省去了
TCBS分离培养后的生化试验，降低检测成本，减少工作量，操作简便，具有
更高的检测效率和鉴别能力。
Di月七 rentialMediumfortherapidseParatio几 identificationanddeteetionofother
Pathogenic巧brio， tomeettheneedsoftheinereasinglystringentfoodsafety
standardsanddifl七 renttesteonditions.
TheresearchescarriedoutinthisPaperwouldbedescribedasfollows:
1.Studyonenriehmentmediumandeul加 reconditionsofPathogenie阵brio
组成为:混合蛋白陈2%(胰蛋白陈:鱼蛋白陈为1:3)、酵母浸膏0.2%、Nacl3%、
pHS.6。这为后续工作的顺利开展奠定了基础。
2创伤弧菌选择性鉴别培养基的研制
本试验以创伤弧菌特有的酶系统及其代谢特点和对某些特定抑菌成分的
抵抗力为基础，设计研制了创伤弧菌选择性鉴别培养基(vvDM)。试验中对
分离与生化反应有机的结合起来，使得检测结果直观，易于观察辨别，且具
有低成本、特异性强、灵敏度高和检测快速、操作方便等优点。选择性鉴别
培养基是国内外微生物检测发展的一个主要发展方向。目前，致病性弧菌仅
有副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌具有选择性鉴别培养基，其它致病性
弧菌尚没有。本研究的目的和意义是设计和研制其它致病性弧菌的选择性鉴
水产品安全的重要因素，通常存在于近海海水、海底沉积物、浮游生物、海
产品(鱼类和贝类)中，是夏秋季沿海地区引发食物中毒的首要病原菌。人类多
因食入未煮熟的海产品或污染此菌的盐渍食物而感染;主要症状为腹痛、腹
泻、呕吐和发热等。如果不及时治疗，可能会危急生命。
选择性鉴别培养基是在生化反应的基础上开发的技术，它将传统的细菌
tilne.
SeleetiveDifferential一nedia， whieh15basedonbiochemicalreaetion，isa
detectionteehnology.Ithassuceessfullyeombinedthereactionofbioehe而stry
V浙江工商大学硕士学位论文
andtheti· aditionalseParationofbiochemistryofbacterium， whieh15easyto
observetheresultofdeteetion.Inaddition， therearesorneadvantages一 loweost，
和特异性;海鱼弧菌菌落为绿色:其它致病菌菌落呈黄色或未形成有效的可
见菌落;VdDM对海鱼弧菌的出菌效率与嗜盐琼脂相比为 (83.46士3.42)%;检浙江工商大学硕士学位论文
出限为10，c创mL。因此，vdDM对海产品中海鱼弧菌分离鉴别与检测是可行
的，且具有操作简便、经济、结果易于观察等优点。