骨组织快速脱钙法
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骨组织快速脱钙法
近年来,在生物医学研究领域,研究人员经常需要从骨骼组织中快速脱钙。
快速脱钙
技术可用于细胞组织培养、哺乳动物研究和细胞组织工程制备。
快速脱钙的主要目的是为
了更好地提取或分离细胞或其组织介质,以便进行后续的细胞组学分析或克隆。
现有的快速脱钙技术大多使用高浓度的EDTA来脱除组织中的钙离子,但是该方法有
几个缺点,如:(1)脱除过程耗时较长,(2)由于EDTA有强烈胃溃疡作用,因此需要
慎重使用,(3)EDTA会干扰细胞活性,或产生活性抑制作用,对后期实验的结果有影响,(4)EDTA脱除出的细胞可能是死的,效率低,(5)脱除过程中使用的EDTA无法循环。
因此,开发一种新型快速脱钙技术是有必要的。
该新型脱钙技术基于交联十六烷磺酸
钠(CTAC)和乙醇两个试剂,该试剂可准确、快速地脱除骨骼组织中的钙离子。
CTAC具有水溶性好,无毒、无味、无气味、体积小且可循环利用等优点,通过特定的缓冲系统,可
以准确、快速地调节钙离子,实现快速脱钙。
此外,CTAC不会影响细胞活性,乙醇的加入可以以正常的细胞保护组织,同时不影响细胞活性,保持细胞的生长性。
该方法简单且快速,实验结果表明,该方法与传统的EDTA脱钙方法相比,可以在几
分钟内脱除组织中的钙离子,且可保护细胞的活性,有效增加后期实验的准确性,该方法
值得推广应用。