刚果红染色

SP老年斑一般用刚果红染色，也可以用硝酸银染色。NFT一般用硝酸银染色。

老年斑的染色方法是：

Highman甲醇刚果红染色法

1.甲醇刚果红染液: 刚果红0.5 g 甲醇80 ml 甘油20 ml

2.碱性乙醇分化液: 氢氧化钾0.2 g 80%乙醇100 ml

染色步骤:

1. 切片脱蜡至水

2. 甲醇刚果红染液染10～20分钟

3. 用碱性乙醇分化液分化数秒

4. 水洗

5. 苏木素复染2分钟

6. 水洗

7. 脱水,透明,封固

结果：淀粉样物呈桔红色。

Bielschowsky method(modified)既可显示SP又可显示NFT

试剂配制：

1、氨银乙醇液

20%硝酸银水溶液30ml中加入20ml无水乙醇，混合；加氨水，出现沉淀后继续加氨水直至沉淀完全溶解；继续加氨水1－2ml；过滤三次（器材必须非常清洁）；置于棕色瓶中避光保存。

2、5%硫代硫酸钠固定液

5g硫代硫酸钠，溶于100ml双蒸水中，避光保存。

实验步骤

1、将已在37度恒温箱中的切片，二甲苯－70%脱蜡及脱水。

2、双蒸水清洗三次。

3、2－4%硝酸银水溶液中37度避光浸银30min。

4、倾去硝酸银水溶液，双蒸水清洗三次。

5、10%甲醛水溶液还原5min至切片呈微黄色。

6、双蒸水清洗三次。

7、擦干切片背面及组织周围水分，一次5片置于湿盒中。

8、滴加氨银乙醇液5分钟，每片200ul。

9、擦去组织周围及背面氨银液。

10、8%甲醛水溶液中浸泡，注意转动切片，到黄色不再加深。

11、蒸馏水清洗三次。

12、重复7、8、9、10步骤2－3次，直到显微镜下可清晰观察到斑块为止。如染色过浅可继续重复；染色过重可用冰醋酸褪色。

13、蒸馏水清洗5min。

14、脱水及透明,封片。