刚果红染色法
两种刚果红染色方法的比较
有关（ Ｐ＝０ ． ０ ０外 ， 其余 病 例 均显示 坏 死 同 时 伴 有 核 分 裂 指 数 ≥５个／ １ ０ Ｈ Ｐ Ｆ 。Ｂ Ｒ Ａ Ｆ
Ｖ ６ ０ ０ Ｅ突变的患者与 Ｂ Ｒ Ａ Ｆ Ｖ ６ ０ ０ Ｅ非突变患者相 比 ， 有显 著 较长的总体生存 时 间 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ２ ０ ） 。Ｐ Ｘ Ａ Ａ Ｆ患者 相对 于 无 问变特征的患者而言 ， 无论 年龄其 总体生存 时间均明显较 短 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ０ ０ ３ ） ， 但无复发 生存 时间仅成人 Ｐ Ｘ Ａ — Ａ Ｆ明显较 短 （ Ｐ＝ ０ ． ０ ４ ７ ） 。３年 内复发或者 死亡 的患 者大多 是首 次诊 断
・
１ ３ １ ０・
临 床 与 实验 病 理 学杂 志
Ｊ Ｃ ｌ ｉ ｎ Ｅ ｘ ｐ Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ ２ ０ １ ５ Ｎ ｏ ｖ ； ３ １ （ １ １ ）
质的背景着色 ， 但效果 不是 很理想。
３ 讨论
本 组 在 Ｈｉ ｇ ｈ ｍａ ｎ甲醇 刚果 红 染 色 中发 现 ， 肾 穿 刺 组 织 染 色 时 间增 加 到 ２ ５ ｍ ｉ ｎ而不 需 要 分 化 。这 可 能 与 组 织 中 淀 粉
物质呈鲜红色 ， 可与黏膜上皮层 的复层扁平 的蓝色细胞 核 区 分 Ｊ 。沉积在肾小球 系膜 区和毛细血管 基膜 的淀粉样 物被
甲醇 刚 果 红 染 成 红 色 ， 而周 围无 沉 积 的 毛 细 血管 、 近 曲小 管 、
生 出版 社 ， ２ ０ １ ０ ： １ ４ ７— ５ ２ ．
远 曲小管等不被着色 。甲状 腺组织 中呈 片状 淀粉样 物质 在清晰 、 分明的色彩下可准确的判 断出存 在的部 位 。 Ｆ ｒ ｅ ｕ ｄ ｅ ｎ ｔ ｈ ａ ｌ 氏刚果红 ： 淀粉 样物 质呈 鲜红 色 ， 细胞 核呈 蓝色 。喉部 、 肾穿刺组织 、 甲状 腺 组织 中易着 色 ， 色彩浓 郁 ， 切 片呈红色 ， 背景着色较 强。另喉部 的黏膜 上皮 也易着 色 。 实验过程 中作者 曾试 图适 当延长苏木精 的时 间， 中和部分 间
甲醇刚果红染色
甲醇刚果红染色
主要用途：
主要用于淀粉样物质染色
检验原理：
淀粉样物质对刚果红有选择性的亲和力，因此容易着色。
刚果红是一种分子为长线状况的偶氮染料，它以胺基和淀粉样物质的羟基结合，平行的附着在淀粉样物质的纤维上而显红色。
主要成份：
甲醇刚果红染液
碱性酒精分化液
Mayer苏木素
样本要求：
组织片充分固定和脱蜡。
检验方法：
1.石蜡切片常规脱蜡至水
2.用甲醇刚果红染液染10-20分钟，
3.直接用碱性酒精化液分化数秒
4.水洗5分钟
5.mayer苏木素染细胞核2分钟，水洗5分钟。
6.常规脱水透明，中性树胶封固。
检验结果：
淀粉样物质、红细胞、弹力纤染染红色，细胞核呈蓝色，背景淡黄粉色。
注意事项：
1.淀粉与弹力纤维都着染刚果红颜色，二者在形态上有所不同，应注意区别。
2.用碱性酒精分化时要掌握恰当，若分化不足，胶原纤维也可着色，分化过度时淀粉样
蛋白也可脱色。
3.淀粉样物质未染色的蜡片，再存放一年后，将逐渐减弱与归于刚果红结合的能力。
刚果红染色
SP老年斑一般用刚果红染色，也可以用硝酸银染色。
NFT一般用硝酸银染色。
老年斑的染色方法是：Highman甲醇刚果红染色法1.甲醇刚果红染液: 刚果红0.5 g 甲醇80 ml 甘油20 ml2.碱性乙醇分化液: 氢氧化钾0.2 g 80%乙醇100 ml染色步骤:1. 切片脱蜡至水2. 甲醇刚果红染液染10～20分钟3. 用碱性乙醇分化液分化数秒4. 水洗5. 苏木素复染2分钟6. 水洗7. 脱水,透明,封固结果：淀粉样物呈桔红色。
Bielschowsky method(modified)既可显示SP又可显示NFT试剂配制：1、氨银乙醇液20%硝酸银水溶液30ml中加入20ml无水乙醇，混合；加氨水，出现沉淀后继续加氨水直至沉淀完全溶解；继续加氨水1－2ml；过滤三次（器材必须非常清洁）；置于棕色瓶中避光保存。
2、5%硫代硫酸钠固定液5g硫代硫酸钠，溶于100ml双蒸水中，避光保存。
实验步骤1、将已在37度恒温箱中的切片，二甲苯－70%脱蜡及脱水。
2、双蒸水清洗三次。
3、2－4%硝酸银水溶液中37度避光浸银30min。
4、倾去硝酸银水溶液，双蒸水清洗三次。
5、10%甲醛水溶液还原5min至切片呈微黄色。
6、双蒸水清洗三次。
7、擦干切片背面及组织周围水分，一次5片置于湿盒中。
8、滴加氨银乙醇液5分钟，每片200ul。
9、擦去组织周围及背面氨银液。
10、8%甲醛水溶液中浸泡，注意转动切片，到黄色不再加深。
11、蒸馏水清洗三次。
12、重复7、8、9、10步骤2－3次，直到显微镜下可清晰观察到斑块为止。
如染色过浅可继续重复；染色过重可用冰醋酸褪色。
13、蒸馏水清洗5min。
14、脱水及透明,封片。
刚果红染色法
3、刚果红染色法分离纤维素分解菌
这一步所需要的仪器有：无菌培养皿、涂布器、1mL移液管，装有9mL无菌水的20mL大试管，温箱等。
培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。
在500mL三角瓶中装入200mL培养基，在121℃下高压蒸汽灭菌20min。
倒平板操作：将灭菌后的固体培养基熔化，按无菌操作的要求，在无菌的培养皿中倒入15～20mL培养基，凝固后待用。
制备菌悬液：按照本专题课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数至106。
涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液涂布均匀，在30℃倒置培养，至菌落长出。
每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。
刚果红染色法：
常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。
方法一在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。
的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为l mol／I。
的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl 溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。
方法二配制质量浓度为10 mg／mI。
的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。
培养基加入1 mI。
的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。
等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。
刚果红染色法的原理
刚果红染色法的原理
刚果红染色法是一种常用的生化实验方法，其原理是将刚果红染色剂
加入到样品中，利用其结合纤维蛋白原及淀粉酶等分泌物的特性，使得样
品中特定结构的蛋白质及其他分子发生结合及聚合作用，最终表现为颜色
的变化。
刚果红染色方法主要针对的是淀粉样品。
淀粉分子在加入刚果红后，
可与其形成无定形结合复合物，这些复合物可能由β-折叠蛋白构建而成，因此染色后的样品通常会呈现出青蓝色至紫色的特殊颜色。
另外，刚果红
还能够与一些蛋白质如淀粉酶等结合，从而形成聚合物。
此种结合可以被
一些特异性抗体所检测，并得出进一步的研究结论。
总而言之，刚果红染色法是利用分子结合的原理和分子特异性的相互
作用，观察分子在染色剂作用下的变化，从而确定样品中蛋白质或淀粉等
特定分子的存在，具有比较敏感和特异的检测效果。
人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳
专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。
·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。
液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。
·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。
·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。
·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。
·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。
只有固氮微生物才能利用N2。
·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
刚果红
用这办法判断酶活力大小的，实际上刚果红是结合到培养基的多糖底物，但分解纤维素的细菌能产纤维素酶，能分解这个多糖底物成为寡糖，这样刚果红便不能结合上往了，氯化钠呢即可使结合不牢的刚果红洗往，这样便留下大大小小的透明圈，大的透明圈当然分解纤维素的能便强啦。
刚果红染色法的原理刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。
当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红——纤维素的复合物便没法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色响应，另一种是在倒平板时便加入刚果红。
办法一在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。
的CR溶液，10～15 min后，倒往CR 溶液，加入物质的量浓度为l mol／I。
的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。
办法二配制质量浓度为10 mg／mI。
的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。
培养基加入1 mI。
的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。
等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。
两种刚果红染色法的比较刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，课本中给出了两种办法。
办法一是传统的办法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色响应基本上是纤维素分解菌的作用。
办法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中全部含有淀粉类物质，能使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性响应。
但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，由于培养基中纤维素占主要地位，因此能与纤维素酶产生的透明圈相区分。
办法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的本事，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
这个没有方程式，首先这只是个简单的酶促反应，纤维素可以被纤维素酶分解为纤维二糖，再分解为葡萄糖，而纤维素可以和刚果红染液形成红色复合物。
淀粉样变的染色方法
淀粉样变的染色方法嘿，你有没有想过，在微观的医学世界里，有一些东西就像隐藏的小怪兽一样，淀粉样变就是其中之一。
这淀粉样变啊，可不容易被发现，就像在一堆干草里找一根特别细的针。
不过呢，好在有染色方法，就像是给这些隐藏的小怪兽打上特别的标记，让医生们能清楚地看到它们。
我有个朋友，他是个实习医生。
有一次啊，他在医院里就碰到了一个疑似淀粉样变的病例。
他当时可头疼了，就像热锅上的蚂蚁。
他跑来跟我说：“这淀粉样变怎么才能确定呢？就这么瞎猜可不行啊。
”我就跟他说：“这就得靠染色方法啦。
”那咱们先来说说刚果红染色法吧。
这刚果红啊，就像是一个神奇的小侦探。
它能和淀粉样物质特异性地结合。
你把组织切片拿过来，然后让刚果红这个小侦探去工作。
如果有淀粉样变，那在偏振光显微镜下，就会看到苹果绿双折光现象。
这就好比是在黑暗里找到了闪闪发光的宝石一样。
我朋友当时就瞪大了眼睛问我：“真有这么神奇？”我就拍拍他的肩膀说：“那可不，这刚果红染色法可是久经考验的。
”还有硫磺素T染色法呢。
这硫磺素T啊，就像是一个敏锐的眼睛。
它对淀粉样物质有着特殊的亲和力。
把组织放到硫磺素T里染色后，在荧光显微镜下，淀粉样变的地方就会发出明亮的荧光，就像夜空中闪烁的星星一样耀眼。
我朋友又问我：“那这个和刚果红比起来哪个更好呢？”我就笑着说：“这就像苹果和橘子，各有各的好。
刚果红可以在偏振光下看双折光，硫磺素T能通过荧光来显示，有时候啊，为了更准确地诊断，两种方法都得用上呢。
”甲基紫染色法也是很有趣的。
甲基紫就像是一个热情的画家，它会把淀粉样物质染成紫红色。
这个染色方法操作起来相对简单，就像走一条熟悉的小路一样。
不过呢，它的特异性可能没有刚果红那么高。
我朋友听了就说：“那这个是不是就不太靠谱啊？”我赶忙摆摆手说：“也不是啦。
在一些情况下，它也能给医生提供很重要的线索呢。
就像在一个大拼图里，它也是一块不可或缺的小拼图块。
”我还知道碘染色法。
碘就像是一个有魔法的小精灵。
病理技术专业知识
（一）单纯固定液甲醛：1．浓度：40%，气体2．渗透力强，固定均匀，组织收缩小，3．不能使白蛋白和核蛋白沉淀4．保存脂类，必须用冷冻切片。
是糖的保护剂5．可固定高尔基体，线粒体重铬酸钾1.浓度：1%-3%水溶液，有毒，橘红色结晶2.穿透速度快，几乎不收缩，经乙醇脱水后明显收缩，3.未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀，但可使蛋白质变为脂溶剂。
酸化后可使蛋白质沉淀，此时染色体可被保存，但线粒体破坏。
4.固定高尔基体和线粒体有良好效果。
5.酸性染料着色好，碱性染料着色差6.固定的组织需经流水冲洗12-24h，或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸1.黄色结晶体，是一种强酸，易燃易爆，配成饱和溶液储藏2.穿透慢，组织收缩明显，无明显硬化。
3.能沉淀一切蛋白质4．对脂肪和类脂无固定作用。
5. 可软化皮肤和火棉胶，不宜用火棉胶包埋6. 固定时间不宜超过24h，7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇，滴加饱和碳酸锂或浓氨水，有助于除去苦味酸固定产生的黄色。
升汞1. 浓度为5%-7%的水溶液，针状结晶2．穿透力低，只宜固定薄片组织，单独应用组织收缩明显3, 对蛋白质有固定作用，4. 对类脂和糖类无固定作用5. 临用时加冰醋酸醋酸1. 刺激性气味的无色液体，低于15℃为冰醋酸5%的醋酸PH为2-8，可抑制细菌和酶的活性，可防止自溶。
2. 穿透力强3 不能沉淀白蛋白，球蛋白，但能沉淀核蛋白4 不能固定脂肪和内酯，不能保存糖5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸，可较好的保存染色体6, 缺点是组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白铬酸1.为三氧化铬的水溶液，浓度0.5%-1%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混合2 穿透力弱，一般组织需固定12-24h，固定的组织有收缩，3 能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好。
4 对脂肪无固定作用5 固定线粒体和高尔基复合体6. 宜避光保存，以防蛋白质溶解。
7. 必须彻底流水冲洗（≥24h）。
锇酸（四氧化锇）1.淡黄色结晶，剧毒，浓度1%-2%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混合2. 渗透力极弱，易使组织变硬，延长固定时间，组织的脆性增加，对染色不利。
淀粉样物质染色液(Highman刚果红法)
淀粉样物质染色液(Highman 刚果红法)简介：淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官，导致的疾病称为淀粉样变。
淀粉样物质主要是由蛋白质构成，该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结构。
在电子显微镜下淀粉样物质呈原纤维排列，病例材料中为大量细胞外的不分支的细丝，大多随机排列。
用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜观察等。
目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差，经典的而且有效的方法是刚果红染色，1922年Bennhold 发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应用到组织切片。
后来经过Highman 改良，染色效果更好。
Leagene 淀粉样物质染色液(Highman 刚果红法)主要由刚果红染色液和苏木素染色液组成。
该试剂盒简单易行，染色液性能稳定，并且已经被广泛应用。
组成：自备材料：1、10%中性福尔马林固定液2、蒸馏水3、系列乙醇操作步骤(仅供参考)：1、常规固定，常采用10%的中性福尔马林，常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。
如有必要，可以去除色素。
3、入Highman 刚果红染色液，浸染。
4、碱性乙醇分化，立即入水终止分化。
自来水冲洗。
6、入Leagene 苏木素染色液，染细胞核。
7、自来水稍微冲洗，更换蒸馏水清洗，使其分化、返蓝。
8、逐级常规乙醇脱水。
二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：编号 名称DG0022 3×50ml Storage 试剂(A): Highman 刚果红染色液 50ml RT 避光 试剂(B): 碱性乙醇分化液 50ml RT 密闭 试剂(C): Leagene 苏木素染色液 50mlRT 避光 使用说明书1份淀粉样物质、弹力纤维、嗜伊红颗粒红色细胞核蓝色注意事项：1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。
2、碱性乙醇分化液应密闭保存，一旦开启尽快用完。
3、分化时间应该根据切片厚薄、组织类别和分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。
高中生物 专题二 两种刚果红染色法的区别 新人教版选
先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应
倒平板时就加入刚果红
优点
显示出的颜色反应基本上是纤维素分入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂
(1)由于在纤维素粉、琼脂和土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；
(2)有些微生物具有降解色素的能力，长时间培养会降解刚果红，从而形成明显的透明圈，这些微生物与纤维素分解菌不易区分
【金版学案】2014-2015学年高中生物 专题二 两种刚果红染色法的区别 新人教版选修1
方法一
方法二
过程
培养基经涂布培养长出菌落→覆盖质量浓度为1 mg/mL的CR溶液 倒去CR溶液→加入物质的量浓度为1 mol/L的NaCl溶液 倒掉NaCl溶液→出现透明圈
配制质量浓度为10 mg/mL的CR溶液→灭菌→按照每200 mL培养基加入1 mL的比例加入CR溶液→混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈
刚果红染色原理
刚果红染色原理刚果红是一种常用的生物染色剂，它在生物学实验和临床诊断中有着广泛的应用。
那么，刚果红是如何进行染色的呢？接下来，我们将详细介绍刚果红的染色原理。
刚果红是一种碱性染料，它能够与细胞质中的DNA和RNA结合，使细胞核呈现出红色或紫红色。
这种染色方法被广泛应用于细胞学和组织学的研究中，尤其是在细胞核染色和细胞分析方面。
刚果红的染色原理主要是通过静电作用和分子间的亲和力来实现的。
首先，刚果红分子是带正电荷的，而细胞核内的DNA和RNA带负电荷，因此它们之间会发生静电作用，刚果红分子会被吸附到细胞核表面。
其次，刚果红分子与DNA和RNA分子之间还存在着分子间的亲和力，这使得刚果红能够紧密结合在细胞核内，从而呈现出明显的染色效果。
在进行刚果红染色时，通常会先将细胞或组织固定在载玻片上，然后用刚果红溶液进行染色处理。
刚果红溶液会与细胞核内的DNA和RNA结合，形成红色或紫红色的染色效果。
在染色完成后，还需要对载玻片进行脱水、透明化和封片等处理，最终观察和分析染色结果。
除了在细胞学和组织学方面的应用外，刚果红染色还被广泛用于临床诊断中。
比如，在染色体分析和细胞核形态观察方面，刚果红都发挥着重要的作用。
通过刚果红染色，可以清晰地观察到细胞核的形态、数量和分布情况，从而为临床诊断提供重要的参考依据。
总之，刚果红是一种重要的生物染色剂，它的染色原理主要是通过静电作用和分子间的亲和力实现的。
在细胞学和组织学研究以及临床诊断中，刚果红都有着广泛的应用前景，它为科研工作者和临床医生提供了重要的实验和诊断手段。
希望本文能够帮助大家更好地了解刚果红染色的原理和应用，为相关领域的研究和实践提供参考和指导。
刚果红染色法的原理
刚果红染色法的原理
刚果红染色法是一种常用的生物学实验方法，主要用于检测蛋白质和DNA等分子的存在。
该方法的原理是利用刚果红分子与目标分子之间的亲和力，使其发生染色反应。
刚果红是一种碱性染料，具有阳离子性，因此可以与带有负电荷的分子发生作用。
在染色实验中，刚果红会与目标分子中的负电荷基团结合，形成复合物，从而使样品产生一种红色的颜色。
具体操作方法是将待检测的样品与刚果红染料混合，待反应一段时间后，将样品离心分离，去除上清液。
若样品中含有目标分子，则在离心过程中，复合物会沉淀到底部，呈现红色色素。
若样品中不含目标分子，则上清液呈现无色或淡黄色。
刚果红染色法的优点是简单易操作，操作步骤较少，而且检测结果比较明显，容易观察。
但是该方法也有一定的局限性，只能检测含有负电荷基团的分子，对于中性和带正电荷的分子无法检测，因此在实验设计和结果解释时需要注意。
- 1 -。
刚果红染色简介
刚果红染色简介
目录
•1拼音
•2英文名
•3刚果红染色的别名
•4正常值
•5化验结果意义
•6化验取材
•7化验方法
•8化验类别一
•9化验类别二
•10参考资料
1拼音
gāng guǒ hóng rǎn sè
2英文名
Congo red stain
3刚果红染色的别名
刚果红试验；CgRT
4正常值
1h：＜40%
5化验结果意义
消失数＞60%：肾淀粉样变性。
消失数40～60%：肾小管脂肪变性。
肘静脉处注射1.5%刚果红灭菌溶液(0.25ml/kg体重)，注射后4min及1h静脉各采血1次，各3ml，置于抗凝试管内送检。
6化验取材
血液
7化验方法
色素测定
8化验类别一
血液生化检查
9化验类别二
色素测定
10参考资料
《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》
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[说明]微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、刚果红染色法
![[说明]微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、刚果红染色法](https://img.taocdn.com/s3/m/20f9ca63f56527d3240c844769eae009581ba27d.png)
微晶纤维素微晶纤维素是一种纯化的、部分解聚的纤维素，白色、无臭、无味，有多孔微粒组成的结晶粉末。
微晶纤维素广泛应用于制药、化妆品、食品等行业，不同的微粒大小和含水量有不同的特征和应用范围。
制药工业：常用用作吸附剂、助悬剂、稀释剂、崩解剂。
微晶纤维素广泛应用于药物制剂，主要在口服片剂和胶囊中用作稀释剂和粘合剂，不仅可用于湿法制粒也可用于干法直接压片。
还有一定的润滑和崩解作用，在片剂制备中非常有用。
食品工业：在食品工业上可作重要的功能性食品基料—膳食纤维素，是一种理想的保健食品添加剂。
（1）保持乳化和泡沫的稳定性（2）保持高温的稳定性（3）提高液体的稳定性（4）营养补充剂和增稠剂（5）其他用途：化妆品：作为拼料，用于多种化妆品、皮肤治疗与护理用品，及清洁洗涤剂的制造。
制法：微晶纤维素可用稀无机酸溶液将α-纤维素控制水解制得，α-纤维素可从含纤维素植物的纤维浆制得。
水解后的纤维素经过滤、提纯、水浆喷雾干燥形成干的。
粒径分布广泛的多孔颗粒。
安全性：本品广泛用在口服制剂和食品中，是相对无毒和无刺激性的物质。
口服不吸收，几乎无潜在毒性。
大量使用可引起轻度腹泻，作为药物制剂辅料无困难。
滥用含纤维素的制剂，如吸入或注射给药，都会导致纤维素肉芽肿。
稳定性：本品为有吸湿性，稳定的物质。
大批量贮存应在阴凉干燥的密闭容器内。
微晶纤维素是一种纯净的纤维素解聚产物。
由天然纤维素制备，是无臭无味的结晶粉末。
产品在医药工业上可用作药物赋形剂和药片崩解剂；在食品工业上可作重要的功能性食品基料—膳食纤维素，是一种理想的保健食品添加剂；在涂料工业上利用它的触变性和增稠性可作为水基涂料的增稠剂和乳化剂；在化妆品上它集填料、增稠和乳化作用于一身，对油性物质有很好的乳化能力；在湿法制造人造革生产中作为增粘和填料使用，使人造革表面平滑、厚度均匀。
由此可见，微晶纤维素的用途十分广泛，国内对该产品的需求将不断增加。
超细食用纤维素，即微晶纤维素，简称MCC，是天然纤维素在酸性介质中水解使分子量降低到一定的范围成为尺寸约10μm左右的颗粒状粉末产品。
刚果红染色法的原理
刚果红染色法的原理
刚果红染色法（Congo Red staining）是一种常用的染色方法，用于
检测和鉴定淀粉样样品，如淀粉纤维和淀粉样沉积物。
该方法基于刚果红（Congo Red）与淀粉的强烈相互作用，使其呈现出特殊的颜色反应。
刚果红是一种阳离子染料，它带有正电荷的连接基团，如四氮杂萘类
化合物。
当刚果红溶液接触到淀粉时，它的阳离子基团与淀粉的阴离子部
分发生静电相互作用，形成一种瞬时结合。
这种结合在染色中被称为“交
替染色”。
这种非共价的相互作用使刚果红分子沉积到淀粉纤维上，并通
过特殊的颜色反应来显示。
这种反应使染色的淀粉区别于其他组织和物质。
1.毛细管法：
-取一小量刚果红固体，并加入足够的去离子水溶解。
-取一根毛细管，并将其一端放入溶解的刚果红溶液中。
-另一端接入含有淀粉的溶液，如样品提取物。
-利用毛细管现象，刚果红溶液将被吸入淀粉溶液中，从而染色了淀
粉样品。
-染色后，将淀粉样品放在玻璃片上，用显微镜观察。
2.直接法：
-取一小量刚果红固体，并加入足够聚乙烯醇（PVA）溶液溶解，制备
刚果红溶液。
-取一定量的淀粉样品，如组织切片或细胞培养物。
-将淀粉样品放置在玻璃片上。
-用刚果红溶液覆盖淀粉样品，使其浸润整个样品，并静置一段时间。
-清洗刚果红溶液，直到淀粉样品变为浅黄色。
-将淀粉样品用去离子水冲洗，使其除去多余的刚果红。
-用显微镜观察染色的淀粉样品。
刚果红染色法鉴别纤维素分解菌的原理
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3、刚果红染色法分离纤维素分解菌
这一步所需要的仪器有：无菌培养皿、涂布器、1mL移液管，装有9mL无菌水的20mL大试管，温箱等。
培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。
在500mL三角瓶中装入200mL培养基，在121℃下高压蒸汽灭菌20min。
倒平板操作：将灭菌后的固体培养基熔化，按无菌操作的要求，在无菌的培养皿中倒入15～20mL培养基，凝固后待用。
制备菌悬液：按照本专题课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数至106。
涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液涂布均匀，在30℃倒置培养，至菌落长出。
每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。
刚果红染色法：
常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。
方法一在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。
的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为l mol／I。
的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl 溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。
方法二配制质量浓度为10 mg／mI。
的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。
培养基加入1 mI。
的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。
等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。