香菇多糖

提取
• 香菇多糖属于极性大分子化合物，其特定的 结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加 多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相 对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的 相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证 实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采 用热水及稀碱溶液，避免在强酸、碱溶液中 进行，否则极易造成多糖中糖苷键断裂及构 象变化。常用的分离纯化方法大致经过沸水 浸提、乙醇沉淀、透析及柱层析等步骤。
• 1.香菇多糖的抗肿瘤活性 • 香菇多糖具有抗肿瘤作用，它没有化疗药物的毒副作 用。香菇多糖进入抗体后诱导产生一种具有免疫活性 的细胞因子，在这些细胞因子的综合作用下，机体免 疫系统增强，对肿瘤细胞起防御与杀伤作用。 • 香菇多糖通过激活巨噬细胞，增强抗体依赖性细胞诱 导的细胞毒(ADDC)，发挥抗肿瘤活性;此外，香菇多 糖还能使肿瘤部位的血管扩张和出血，导致肿瘤出血 坏死和完全退化。
香菇多糖简介
香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质,具有抗 病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力 等多种功能,在保健食品和药品开 发方面具有广阔的应用前景。我将从香菇多糖的研究历史、化学结 构、理 化性质、生物活性、临床应用、制备和提取纯化等方面来进 行介绍。
历史
糖类的研究已有百余年的历史,近 20 多年 来,随着膜的化学功能,免 疫物质的化学研究的 进展以及探寻新药物资源的不断拓展和研究的 深入,发现糖类在生物体中的作用不仅是作为能 量资源或结构材料,更 重要的是还参与了生命现 象中细胞的各种活动,具有多种多样的生物 学功 能。真菌多糖作为药物研究始于 20 世纪 50年代,在 60 年代以 后成为免疫促进剂受到广 泛关注,其中香菇多糖(lentinan,LNT)是研究 得较 透彻的多糖之一。 1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇 子实体中浸提出 6 种胞外多糖,1970 年 Chihard 和Sasaki 用热水浸 提结合有机溶剂沉淀从香菇中 提取到另外 4 种多糖,20 世纪 80 年代 以来,LNT 的研究受到广泛的重视,取得了一系列进展 [ 1]
结构
• 英文别名:Bromoduline beta-Dglucopyranosyl-(1->6)-[beta-Dglucopyranosyl-(1->3)-[beta-Dglucopyranosyl-(1->6)]-beta-Dglucopyranosyl-(1->3)-beta-Dglucopyranosyl-(1->3)-beta-Dglucopyranosyl-(1->3)]-beta-Dglucopyranose
• 3.香菇多糖的抗病毒活性
• 日本石田博士研究认为，香菇含有一种双链核糖核酸， 能刺激人体网状细胞及白血球释放干扰素，而干扰素具 有抗病毒作用。香菇菌丝体提取物可抑制细胞的吸附疱 疹病毒，从而防治单纯疱疹病毒、巨细胞病毒引起的各 类疾病。英国从培养的香菇菌丝体中提取到一种物质， 可使因艾滋病病毒感染的T淋巴细胞复原，刺激巨噬细 胞，有助于产生抗体治疗艾滋病，且安全无副作用。 • 有学者发现硫酸化香菇多糖具有抗艾滋病病毒(HIV)的 活性，可干扰反转录病毒及其他病毒的吸附和侵入。日 本学者报道，从香菇子实体中获得的一种具有良好抗肿 瘤作用的葡聚糖的硫酸化衍生物可抑制HIV的活性。
• 2.香菇多糖的免疫调节
• 香菇多糖的免疫调节作用是其生物活性的重 要基础。香菇多糖是典型的T细胞激活剂， 促进白细胞介素的产生，还能促进单核巨噬 细胞的功能，被认为是一种特殊免疫增强剂 。其免疫作用特点在于它能促进淋巴细胞活 化因子(LAE)的产生，释放各种辅助性T细胞 因子，增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率，恢复 或刺激辅助性T细胞的功能。另外，香菇多 糖还能促进抗体生成，抑制巨噬细胞释放。
注意事项
• 1、目前尚未有用于早产儿、新生儿和婴幼儿的临床经验 ，要慎重使用。 • 2、虽然临床试验仅有很少数病人发生头晕、胸闷、面部 潮红等一过性反应，临床仍应注意过敏反应的可能性。 • 3、加入溶剂后，要用力振摇，使完全溶解，即刻使用。 • 4、应根据医生处方和遵照医嘱。 • 5、本品和维生素C混合，会使溶液变浑浊，应避免混用
• 4.香菇多糖抗感染作用 • 据报道，香菇多糖能提高巨噬细胞功能。香 菇多糖对Abelson病毒、12型腺病毒及流感 病毒感染均有抑制作用，是治疗各种肝炎特 别是慢性迁移型肝炎的良好药物。
• 称取干香菇子实体或菌丝体 10 g， 粗粉碎成粒 度为 0.5 ～1 mm 的颗粒状， 在一定的温度和压力下 进行超临界 CO2 萃取一定时间后， 进行精粉碎，使 其可全部通过孔 径为 0.147 mm 的筛网。 然后按固 液比为 1∶10， 在 90℃左右条件下热水浸提一定时 间，提取 2 次，减压抽 滤，得超临界 CO2 辅助提取混 合滤液； • 热水法浸提时，直接精粉碎为 0.147 mm，其 他条件相 同，热水浸提 5 h，减压抽滤，得热水提取 混合滤液。 分别将滤液定容，测定多糖含量，然后将 滤液减压浓缩 ，加入体积分数 95%乙醇至含醇量为 80%进行沉淀，离 心，真空干燥，分别得到 2 种方法 的香菇多糖粗品。
脱脂，脱胶 脱色 除臭
纯化
• 常用的纯化方法有:沉淀法、柱层析法、制备 性高效液相法、制备性 区域电泳法、超滤法等。 目前多采用各种不同的凝胶层析柱色谱和 离子 交换柱色谱。 • 凝胶色谱是一种分辨率低、载样量少的分离 技术,但方法简单、快速 。 • 超滤技术是一种膜过滤技术,其原理主要是 筛分作用,其中分子大小是 其分离的主要依据, 但分子形状和电荷也起瘤活性 • 2.香菇多糖的免疫调节 • 3.香菇多糖的抗病毒活性 • 4.香菇多糖抗感染作用
不良反应
• ①休克:较为罕见，因此在病人用药后应密切观察。出现口内异常、畏寒、心律异 常、血压下降、呼吸困难等症状时应立即停药并适当及时处理。 • ②皮肤:偶见皮疹、发红，应及时停药，必要进行处理。 • ③呼吸系统:偶见胸部压迫感、咽喉狭窄感，应密切观察。发生时应减慢给药速血 液 • 血液 • 度，如改静脉推注为滴注或是减慢滴注速度。 • ④消化系统:偶见恶心、呕吐、食欲不振。 • ⑤神经系统:偶见头痛，头重、头晕。 • ⑥血液:偶见红、白细胞及血红蛋白减少。 • ⑦其它:偶见发热，出汗、面部潮红等症状。
• 有关香菇多糖的成分和结构报道甚多,但已 明确结构 与免疫活性关系的只有β-葡聚糖物质。 该多糖的一级 结构具有β-( 1 ※3)连接的吡喃葡 聚糖主链,在主链中 葡萄糖的 C6 位上含有支点 (每 5个葡萄糖有 2 个支 点),其侧链是由β-( 1※ 6)键和β-( 1※3)键相连的葡萄 糖聚合体组成,在 侧链上也含有少数内部β-( 1※6)键 。其二级结构为凝结型的单螺旋构象。经检测都是( 1 ※3)-β-D-葡聚糖, 并含有 4. 6%～ 15. 2%的蛋白质。 多糖 的构型、相对分子质量及结合蛋白质也可能影 响其抗肿瘤活性
• 比较研究了超临界 CO2 辅助提取法和传统热水提取法 2 种工艺 对香菇多糖提取效果的影响。 试验结果表 明，超临界 CO2 萃 取的最佳工艺为：萃取压力 10 MPa，萃取温度 40℃，萃取时 间 1 h。 超临界 CO2 萃取脱脂后，热水浸 提时间为 1 h，仅用 了传统方法热水浸提时间的 1/5，香菇多糖提取率为 6.87%， 比传统热水浸提法提高 3.16%。 • 所得 产品紫外吸收光谱显示，产品杂质含量少，红外光谱显示 结构与直接热水浸提法一致。 采用超临界 CO2 辅助提取后， 香菇多糖的提取率和质量显著提高。
性质
香菇多糖为白色或棕黄色粉末, 对光和热稳定, 具吸湿性, 相对分子质量较大, 无甜味和还原 性, 部分能溶于水,在水中的溶解度随分子质量 增大而降低,水 溶液为中性,不溶于甲醇、已醇、 丙酮等有机溶剂
作用机理
• 香菇多糖对正常机体并无免疫促进作用，但能使荷瘤式或感染后的机体的免 疫应答得以提高。其制剂在动物体内筛选试验中未见直接抗癌效果，却明显 促进体外淋巴细胞培养物的转化作用。曾经发现胸腺切除的动物注射抗淋巴 细胞血清后，可削弱香菇多糖的抗肿瘤活性，且它的作用还能被巨噬细胞抑 制剂角叉菜胶和硅胶所削弱。所以说，香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导 向并有巨噬细胞参与的特殊免疫佐剂。它能识别脾脏及肝脏中抗原的巨噬细 胞，促进淋巴细胞活化因子的产生，释放各种辅助性T细胞因子，增强宿主 腹腔巨噬细胞吞噬率，当宿主机体注射香菇多糖数小时后，一些具生理活性 的血清因子如急性期蛋白诱导因子、血管扩张和出血诱导因子、IL-1生成诱 导因子、IL3和集落刺激因子的水平达到峰值。这些因子作用于淋巴细胞、 肝细胞、血管内皮细胞后，产生许多有效免疫应答，同时导致胸腺内的前体 T细胞趋于成熟、分化、增殖并向外周释放。