外泌体研究PPT

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免疫 激活
免疫 逃逸
恶 化 转 移 发 展 发 生
肿瘤分泌的外泌体膜上携带肿瘤细胞的抗原, 被树突状细胞 识别并呈递给T细胞, 从而诱发免疫反应, 促进免疫激活
黑色素瘤所分泌的外泌体膜上含有Fas配体分子，可与T细 胞的Fas受体相互作用，介导T细胞凋亡以逃脱免疫监视
乳腺癌分泌的外泌体可以促进肿瘤血管生成、肿瘤生长和 扩散，促进周围正常乳腺细胞的增殖并抑制它们的凋亡
随机性 不确定性 不能反映
肿瘤的
影 像 学
生
化 病 理 循学环
肿瘤
细胞
液 （循C环T肿C瘤）
肿 瘤 诊
体
DNA/RNA （肿c瘤tD细N胞A/
活 分R泌NA的）外
检
泌体
断
半衰
期短
循环肿瘤DNA/RN检A 测
（ctDNA/RNA）与 肿
微创
早 期 诊 断
监测 病人 含波即情量动时况
系
病对理肿状瘤态远 端转移不 是一个可
外泌体递送EGFR调节肝脏微环境促进胃癌肝转移
间充质干细胞分泌的外泌体可以促进胃癌细胞的生长
胶质瘤细胞分泌的外泌体可以促进其自身的增殖
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外
泌
体
与 肿
肿瘤诊断的生物标志物
瘤
的
关
系
肿瘤潜在的治疗靶点
肿瘤治疗的生物标志 抗肿瘤药物的有效载
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外
循环肿瘤
泌 体 与 肿 瘤 的 关
早期检 早测期难确 容诊易难引 发扩散
功能。
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外 泌 体 的 发 现 与 研 究
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细胞内由多囊泡胞内体
外
(multivesicular bodies, MVBs)向 外出芽形成, 通过MVBs与细胞膜
泌
融合, 由细胞主动分泌释放到细 胞 外 的 腔 内 囊 泡 (intraluminal
体
vesicl直es,径IL约V为s)。30-150nm，具有 “杯状”或“碟状”形态, 外侧
些生物酶类。 被认为是细胞间分子交换和信息传递的生物纳米颗粒。
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百度文库
外
人体中大约有1014个外泌体，近乎于平 均每个细胞产生1000-10000个。
泌
体
正常细胞及肿瘤细胞均分泌外泌体，恶 性肿瘤细胞较非恶性细胞能分泌更多外泌体。
通过分析外泌体可以直接获得癌细胞的基本
的
信息。
特
被分泌出的外泌体会进入血液、唾液、
体
过程中19所96产年生, R的ap诸os如o等质膜受体一类的废弃物。
的
人发现外泌体具有呈 递抗原, 并刺激T细胞
发
2007 年 ， V增al殖ad的i 证作实用了。
现 细胞分泌的外泌体中含有的 mRNA以及MicroRNA均具备
与 良好的生物活性。
研 随后，许多研究均 发现外泌体可通过携带
究 蛋白质及核酸等成分在 细胞间传递信息并发挥
细胞 （C
瘤 细 准确度较低 胞类 型 、 敏感性差
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外
泌
体
与 肿
肿 瘤 诊
瘤
具有脂质双分子 层结构
断
的
保护内部的核酸
关
分子免于被降解
几乎存在于人体所有 的是体液液 体里 活检的重要组 成在部体分 液中含量多于 C每T毫C升血液超过10个 比CTC更加灵敏
含有脂质双分子层。
的
携带母体细胞特征性生物信息分子，如蛋白质、脂质、脱氧
核糖核酸(DNA)、信使RNA(mRNA)、微小RNA（miRNA）以及
特 非编码RNA（Non-codingRNA）等。 表面标记蛋白主要有 Alix，TSG101，CD63，CD9，CD81和
征 HSP70。主要含有以下几种物质：MHC I 类和/或 II 类分子、热 休克蛋白（hsp）、四跨膜蛋白、整合素、细胞骨架蛋白以及一
外 泌 研 究 生 科 研 汇 报 体
——精准肿瘤学的明 星——
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1 外泌体的发现与研究 2 外泌体的特征 3 外泌体的分离与鉴定 4 外泌体与肿瘤的关系 5 总结与展望
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外
1983年, Pan等人在绵羊网
泌
织红细胞体外成熟的过程中, 用 异硫氰酸荧光素或者125I标记的
尿液及乳汁等体液中，通过循环系统到达其
征
他细胞与组织，产生远程调控作用。
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外
不同
外泌体通过内吞进入受体 细胞后，将“货物”释放进入
泌
来源 的外
胞质内，并重新形成多泡体。
体 的
泌体 进入 受体 细胞
外泌体直接与受体细胞膜
融合，将携带的“货物”释放 进入受体细胞胞质。
特
的方 式
外泌体上的配体与受体细 胞膜上特殊受体结合，既能起
体
转铁蛋白受体的抗体, 对转铁蛋 白受体进行追踪, 发现细胞膜的
的
转铁蛋白受体在与一种包含多肽 的囊泡结合后, 囊泡与细胞膜分
发
离, 分泌到上清, 这是人类首次观 测到游离于细胞外存在的囊泡。
现
1987年, 他们发现这些囊泡中含有在网织红细胞成熟过程中
丢失的一些成分（乙酰胆碱酯酶、葡萄糖转运蛋白、核苷转运蛋
与 白和转铁蛋白受体等），同时, 他们发现这些囊泡膜具有网织红
研 细胞细胞膜的特征, 比如也有极高的鞘磷脂含量, 显示了其区别于 细胞或血小板等其他组分的独特性. 他们将其命名为外泌体
究 (exosome)。
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外
外泌体却并没有因为初次被发现而被引起
泌
重视，反而被误认为是细胞处理胞内垃圾的一 种囊泡外泌形式，用于装载和运送细胞在成熟
到信号传导作用，也能通过内
征
吞作用，将“货物”运入胞内。
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外
泌
超速离心法
体分
的
离 方
沉淀法
分
法 及
离
特 点
免疫亲和 捕获法
与
鉴
试剂盒
定
超速离心法获得的
外泌体数量多，但常有 蛋白杂改质良。后的蔗糖密度
梯度离心法，操作简便， 成应法用本获使。较得用的低聚外，乙泌得二体到醇，了沉蛋广淀白泛
污染少，分离效率高， 但颗利粒用大外小不泌一体。表 达 的 特异性抗体标记的免疫
磁珠进行富集，可获得
纯度较高的外泌体，但 操作近复年杂来且各影种响商因业素较化 多的。外 泌 体 提 取 试 剂 盒 逐 渐得以推广。
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外
泌
体
的
分 透射电子显微镜
离
(transmission
与 electron microscopy, TEM)
鉴 观察外泌体的大小、 定 形态，测量直径
纳米粒子跟踪分析
(nanoparticle
tracking analysis,
NTA) W测e量st外ern泌-b体lo的t 直径 （ WB ） 法 或 磁 珠分选的免疫学 方法等可清楚地
流式细胞技术
(flow cytometry,
FACS) 分离外泌体并 分析其纯度
外 泌 体 与 肿 瘤 的 关 系