微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程
交叉配血质控品(微柱凝胶法)SOP
交叉配血质控品（微柱凝胶法）标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任公司生产的抗人球蛋白检测卡（12卡/盒）交叉配血实验的室内质量控制。
二、准备工作1、将质控品从冰箱取出后平衡至室温。
2、观察检测卡外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡平衡至室温（18－25℃），再用专用离心机离心5分钟。
三、操作步骤1、取1张微柱凝胶检测卡，取四孔分别标记为组合1、组合2、组合3、组合4；2、交叉配血实验按照组合1（样本4+样本1）、组合2（样本4+样本2）、组合3（样本5+样本1）、组合4（样本5+样本3）进行加样，先加红细胞再加血浆，各1滴（50ul）;3、加样完毕后，专用孵育器孵育15min；4、孵育完毕，专用离心机离心后判读结果。
结果判读样本组合检测结果检测作用组合1 样本4+样本1 + 检测IgM类抗原抗体反应组合2 样本4+样本2 0 检测IgM类抗原抗体反应组合3 样本5+样本1 + 检测IgG类抗原抗体反应组合4 样本5+样本3 0 检测IgG类抗原抗体反应“0”代表阴性，“+”代表阳性。
质控品检测结束后，用户可将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。
失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。
特异性、抗原强度及效价：AB型RhD（+）红细胞抗原强度：与抗A、抗B、抗D抗体均发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗A抗体凝集强度≥3+，与抗B抗体凝集强度≥3+，与抗D抗体凝集强度≥3+。
O型RhD（+）红细胞：与抗A、抗B不发生凝集，与抗D发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象；与抗D抗体凝集强度≥3+。
RhD（-）红细胞：与抗D不发生凝集，无溶血及其他不易分辨现象。
O血清：与A1型红细胞、B型红细胞均发生凝集，间接抗人球蛋白试验阴性，无溶血及其他不易分辨现象；O血清与A1型红细胞反应，效价≥8，与B型红细胞反应，效价≥8。
微柱凝胶法血型鉴定操作规程
微柱凝胶法
1标本：EDTA-K2 抗凝血2.0ml
2原理：
2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质为血凝反应）；
2.2检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶；
2.3凝胶间隙具有分子筛作用。
凝集的红细胞（结合的）被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。
未凝集的红细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部；
2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。
3操作：
3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞，在B孔悬空加入50ul标准B红细胞，再在两孔中各加入50ul样品血浆。
3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液10ul
3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟
3.4离心结束后在白色背景前观察结果
4结果判断：
A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型;
A孔阴性B孔阴性为O型;A孔阳性B孔阳性为AB型。
5.注意事项
5.1严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。
5.2应先加红细胞悬液，然后再加血浆。
5.3为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。
5.4严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。
5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。
5.6判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
6.方法评价
卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。
BioVue交叉配血操作规程
BioVue交叉配血操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：交叉配血2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue －poly Cassettes3．包装规格：400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4．试剂成分：抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗－lgG(兔)抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD＆C1＃蓝色染料FD＆C5＃黄色染料5．试剂的储存与效期：储存条件：2～25℃环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。
采集自脐带血的红细胞需用等渗生理盐水至少洗涤一次。
来自异常血清蛋白患者的红细胞样品，需使用洗涤过的红细胞混悬液。
抗凝全血标本以900－1000g离心5分钟，即可得到浓度约为80％的浓缩红细胞。
交叉配血操作规范(微柱凝胶法)
交叉配血操作规范（微柱凝胶法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】BYZ型血库血清学多用离心机，2002-2型血库专用离心机,FYQ免疫微柱孵育器。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血微柱凝胶法检测的操作。
【原理、方法、用途】本品采用抗人球蛋白微柱凝胶免疫检测技术，用于交叉配血试验。
在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应的不完全抗体结合后（致敏红细胞），凝胶中抗人球蛋白形成凝集块，离心后仍滞留在胶上或胶中，而未和抗体结合的红细胞则完全沉于凝胶底部。
该方法使试验更简单，更规范，结果更易判定。
本品系由聚丙烯塑料透明卡片的六支微柱型管中充满葡聚糖凝胶和抗人球蛋白，制成抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前2天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于2002-2型血库专用离心机内，放置保证平衡，以1500转/min 离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【试剂】抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡。
【操作步骤】1．取出抗人球蛋白微柱凝胶试剂卡，应注明病人姓名、科室和床号。
柱凝集法交叉配血试验操作规程2024
柱凝集法交叉配血试验操作规程20241．原理柱凝集法交叉配血是通过抗原－抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过预先装填有抗IgG的凝胶柱。
凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中，而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。
2试剂柱凝集配血卡。
3．操作3.1取凝胶抗球蛋白微柱卡，标记1号（“主侧”)，2号（“次侧”)。
3.2主侧：配制细胞悬液，通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者红细胞配成1％的悬液（根据厂商的操作说明书而定）50µ1轻轻滴人1号微管反应池中，再加25µ1受血者血清。
3.3次侧：配制细胞悬液，通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1％的悬液（根据厂商的操作说明书而定）50µ1轻轻滴人2号微管反应池中，再加25µ1献血者血清。
3.4阴印捆：配制细胞悬液，通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1％的悬液50µ1轻轻滴入2号微管反应池中再加25µ1AB型血清。
3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°C孵育15分钟。
3.6取出凝胶卡，立即用专用离心机离心，通常离心的速度被设定在1000r/min (80x g~100x g离心10分钟后，观察结果。
4结果判定4.1若对照管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。
结果判断参照图示（见图1-5-1).图片4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。
4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。
5注意事项5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时，向反应池内要先加红细胞悬液，后加血清或抗体。
5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同，一般50µ11％红细胞悬浮加25µ1血清；50µ10.8％红细胞悬浮加40µ1血清。
5.3除上述两种配血方法之外，常用的还有快速的聚凝胺介质配血、LISS 介质配血以及增强反应的酶法配血等。
血型鉴定、交叉配血操作规程
⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。
根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。
5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。
备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。
⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。
【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。
【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。
【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。
交叉配血(聚凝胺法、微柱凝胶法)
LIM:降低 溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云， 可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合。
聚凝胺:高价阳离子,中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞 间距,促进红细胞非特异性凝集。
重悬液:电荷中和 。
微柱凝胶卡交叉配血试验
原理：
将受血者、献血者的血清和红细胞，放置主侧 和次侧管的反应室中，放置37℃孵育器中孵育， 如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体 （lgM型或IgG型）时，红细胞发生凝集，离心 后留在微柱的表面，为阳性；如果血清中不含有 针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞下沉到 微柱管的底部，为阴性。
结果判断：
阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底 部。 阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面 或凝胶中，和（或）出现溶血。
操作步骤：
按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液 以及分离血清。 主侧：25ul 受血者血清 + 50ul 1%献血者红细胞， 加入主侧管反应室内； 次侧： 25ul献血者血清+ 50ul 1%受血者红细胞， 加入到次侧管反应室内； 加样后的试剂卡放置专用孵育器37℃孵育15min； 取出试剂卡，放置专用离心机1000g离心9min； 取出试剂卡，肉眼观
抽取受血者静脉血3～4ml，枸橼酸钠抗凝，以生理盐 水洗涤受血者红细胞3次，配成3% 红细胞悬液，同样 方法处理献血者样本； 取洁净小试管2支，1支标记为主侧管，另1支标为次侧 管； 主侧管内加受血者血清2滴、献血者红细胞悬液1滴； 次侧管加献血者血清2滴、受血者红细胞悬液1滴； 每管各加LIM溶液0.6ml，混匀，室温孵育1min; 每管各加2滴聚凝胺溶液，混合后静置15s; 1300g离心15s，倾去上清液； 轻轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集，必须 重做； 加入2滴重新悬浮液，并轻轻转动试管混合，肉眼观察 结果，必要时用显微镜观察结果。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
微柱凝胶免疫检测技术在临床交叉配血中应用
微柱凝胶免疫检测技术在临床交叉配血中应用在临床输血中，输血前交叉配血是防止输血差错一道安全岗。
因此交叉配血操作方法必须准确、可靠。
才能保证输血安全。
我院2011年引进微柱凝胶免疫检测技术应用临床交叉配血工作。
配血结果准确、无误。
均无差错事故发生。
总结如下：微柱凝胶免疫检测技术原理：将分子排阻层析原理应用于血型血清学检测，即在充有凝胶的微柱腔中，加入红细胞和血清。
如果血清中有该红细胞特异性抗体，则形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如果血清中无该红细胞特异性抗体，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定的离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔尖底部。
微柱凝胶免疫反应的本质，就是红细胞凝集试验。
一、准备工作1标本采集：用抗凝管采集被检对象静脉血，将该同一人血液分别制备成红细胞标本和血浆标本。
血浆标本的制备：将抗凝血2000—3000离心1-2min，取上清。
该上清不得有絮状物或颗粒。
红细胞标本的制备：用红细胞稀释液或生理盐水配制成0.8%红细胞悬液。
微柱凝胶卡的准备:首先观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，然后将卡平衡至室温（18—25℃），平衡后用离心机离心2—3min。
二、配血卡操作步骤1. 将准备好的试剂卡做好标记，姓名、床号；撕开卡的封膜；2. 将受血者与献血者的红细胞和血清分离，分别将受血者与献血者的红细胞配成0.8%悬液；3. 将献血者血细胞悬液50ul与受血者血清50ul先后加入主测管中；4. 将受血者血细胞悬液50ul与献血者血清50ul先后加入次测管中；5. 将配血卡用孵育器37℃孵育15min；6. 将卡用离心机离心5min（900rpm2min,1500rpm3min）；7. 肉眼观察结果。
三、结果判定1阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管尖底部，表明受血者与献血者的血型相合。
2阳性结果：红细胞凝集快位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者的血型不相合四、使用中的注意事项1凝胶卡有断裂、气泡、干胶时，都会阻碍红细胞的通过。
微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程
微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程The manuscript was revised on the evening of 2021微柱凝胶交叉配血卡标准操作规程一．准备工作1.微柱凝胶试剂卡的准备观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
2.检测标本的准备3.红细胞悬液的制备取被检者压积红细胞50微升，加入1毫升红细胞稀释液（盐水），外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。
二．操作步骤1．将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。
2．将受血者血清1滴（或50μl）与献血者红细胞悬液10μl先后加入主侧管中。
3．将献血者血清1滴（或50μl）与受血者红细胞悬液10μl先后加入次侧管中。
4．加样后的试剂卡，置37℃孵育器中孵育15分钟。
5．使用专用离心机离心5分钟，取出肉眼观察结果。
三．结果判定1．阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与献血者血型相合。
2．阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合。
四．注意事项1.红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。
尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
2.血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。
3.如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。
4.每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
5.试剂卡应放在18-25℃储存，如若长期放在4℃冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。
微柱凝胶卡实用标准操作程序
微柱凝胶卡标准操作程序（SOP）襄城县人民医院血库目录1、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序（SOP） (3)2、ABO、RhD血型检测卡标准操作程序（SOP） (5)3、不规则抗体筛检卡标准操作程序（SOP） (8)4、抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序（SOP） (10)5、新生儿溶血病检测卡标准操作程序（SOP） (11)6、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序（SOP）.................................................... . (13)7、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序（SOP）.................................................... . (15)8、微柱凝胶检测卡在实验室操作的注意事项 (17)一、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序（SOP）一、准备工作1、微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
2、检测标本的准备：红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞10微升，加入1毫升红细胞稀释液，此浓度大约为0.8%－1%。
外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。
二、操作步骤1．将准备好的微柱凝胶试剂卡做好标记。
2．将配制好的被检者红细胞悬液分别加入第1至第3管或第第4至第6管中，每管50微升。
3．即刻使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟），取出肉眼判定结果。
三、注意事项1、检测标本必须为抗凝血。
2、红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。
尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
3、如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。
4、若结果为±或1＋需进一步分析，可能为亚型或弱化抗原。
交叉配血（微柱凝胶法）
交叉配血（微柱凝胶法）1.目的：在临床用血前将患者血清和血细胞分别与献血员血细胞和血清进行交叉配血试验，以排除各种因素引起的输血反应（如凝集或溶血），保证用血安全。
2.适用范围：2.1 所有申请输用全血及红细胞悬液的标本。
2.2 申请输用手工血小板的标本。
3.职责：输血科主任负责对该标准化操作规程监督执行。
4.原理交叉配血就是将患者血清和血细胞分别与献血员血细胞和血清进行主次测交叉配试验，以排除各种因素引起的输血反应（如凝集或溶血），保证用血安全。
微柱凝胶检测法是凝胶分子筛技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶（葡聚糖）的浓度，控制凝胶间隙大小，只允许游离红细胞通过，从而达到分离游离红细胞和凝集红细胞的目的。
如果红细胞沉积在凝胶管底部，表明红细胞未发生凝集，即凝集实验阴性；如果红细胞聚集在凝胶上部或中部，表明红细胞发生凝集，即凝集实验阳性。
5.标本5.1 标本种类：新抽取的抗凝血5.2标本要求：5.2.1 抗凝剂：EDTA（浓度15g/L）或枸橼酸钠（浓度32g/L）抗凝5.2.2 采血量：至少不低于5ml的静脉血（加入试管后注意与抗凝剂混匀）5.2.3 离心要求：转速必须大于3500转/分，时间必须大于15分钟5.3 标本采集要求5.3.1 采血时，一定要认真核对病室、床号和病人姓名，无误后再抽血。
5.3.2 血标本容器要清洁干燥并事先贴好标签，加血标本前要认真核对、无误后再将血液注入。
5.3.3 血标本标签填写必须与申请单上的病人姓名、科别、床号、编号完全一致。
5.3.4 采血者要在申请单和标本标签上签名，写清采血时间，及时送检。
5.3.5 采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时）在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
5.3.6 非急诊病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写在输血申请单上，以便核对。
急诊抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求注明急诊字样由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序
微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序1目的建立微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作程序，确保此试验操作的准确性和规范性。
2适用范围适用于所有临床输血前的交叉配血试验。
3职责输血科配血工作人员：负责交叉配血试验。
4原理微柱凝胶卡式法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后，离心通过预先填装有抗IgG的凝胶柱，凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中，而不凝集的红细胞将在凝胶柱的底部。
5设备与试剂5.1设备：BASO 2005-2台式离心机；FYQ型免疫微柱孵育器；TD-3A型血型血清学用离心机；微量移液器。
5.2试剂：低离子强度缓冲液（LISS）；抗人球蛋白卡；一次性塑料试管（10×100mm）；一次性吸头。
6 样本要求EDTA抗凝血3ml，无乳糜，无溶血。
7 环境条件室温应控制在18-27℃，湿度应保持30%-70%。
8 步骤和方法8.1离心受血者及供血者的标本：3000rpm/min，3min，分离红细胞和血清。
8.2制备红细胞悬液：用低离子溶液分别将受血者及供血者红细胞配成0.8%～1.2%的红细胞悬液。
8.3选择抗人球蛋白卡，撕去卡上的密封铝膜，做好标记。
8.4加样：吸取受血者血清50μL加入抗人球蛋白卡主侧孔中，红细胞50μL加入次侧孔中；再吸取供血者血清50μL加入次侧孔中，红细胞50μL加入次侧孔中。
8.5孵育：将卡置于37℃孵育箱中孵育15min。
8.6离心：将卡置于专用离心机中离心5min，取出，观察结果。
9 结果判定9.1阴、阳性判定9.1.1阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与供血者交叉配血相合。
9.1.2阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与供血者交叉配血不相合。
9.1.3阳性结果中出现的凝集强度判定见下表：反应强度红细胞在凝胶内的反应情况4+ 红细胞全部位于凝胶表面3+ 大部分红细胞位于凝胶表面，少部分位于凝胶中上部2+ 大部分红细胞位于凝胶中部，少部分位于凝胶中下部1+ 红细胞位于凝胶中下近底部±绝大部分红细胞沉积在管尖底部，极少部分位于凝胶中近底部- 红细胞完全沉积在凝胶管尖底部完全溶血凝胶和液体中无凝集或未凝集的红细胞，液体呈透明清澈红色不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体呈透明清澈红色混合凝集同时存在两群细胞，分别位于凝胶表面和管尖底部10 注意事项10.1将送检的标本即刻离心，仔细检查标本质量，挑出严重溶血、脂血等影响检测结果的标本，及时通知临床科室重新采集，暂不使用的标本置于4℃冰箱保存。
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用微柱凝集法；三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。
微柱检测系统的上端为反应室，将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中，微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。
凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间，反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙，沉积在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型血清学多用离心机；37℃免疫微柱孵育器；六、试剂1、试剂名称：抗人球蛋白交叉配血卡（微柱凝集法）2、试剂生产厂家：长春博迅生物技术有限责任公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起12个月；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中；4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中；5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟；6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟，1500rpm 离心3分钟，取出肉眼观察结果。
交叉配血试验标准操作规程(微柱凝胶)
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝胶抗人球蛋白法）1. 目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。
2. 适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。
3. 职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。
4. 原理红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。
5. 所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6. 检测环境条件室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。
7. 操作步骤7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。
7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者 0.5% 红细胞LIM 悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。
7.3将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。
7.4取出，判定结果，结果判定标准按下表：（可参照结果判定示图）检验结果的解释：阳性结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供受血者血液不相容。
阴性结果，表示供受血者血液相容。
8. 质量控制8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。
8.1试剂质量控制方法8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。
微柱凝胶法交叉配血步骤
微柱凝胶法交叉配血步骤微柱凝胶法交叉配血，这事儿听起来有点专业，可就像做菜一样，只要掌握了步骤，一点也不难。
咱先来说说啥是微柱凝胶法交叉配血。
简单理解呢，就是看看献血者的血液和受血者的血液是不是能和谐共处，要是不匹配啊，那可就麻烦大了，就好比把两个合不来的人硬凑在一起过日子，肯定得闹别扭。
开始操作的时候，得把受血者和献血者的血样都准备好。
这就像你要做一顿大餐，得先把食材都备齐喽。
受血者的血清和红细胞，献血者的血清和红细胞，一个都不能少。
这红细胞就像是一个个勤劳的小搬运工，血清呢就像是它们生活的环境。
接下来就是往那些特制的微柱凝胶卡里面加东西啦。
把受血者的红细胞加到主侧管里，献血者的血清加到这个管里；再把献血者的红细胞加到次侧管里，受血者的血清加到这儿。
这一步可得小心喽，就像走钢丝一样，稍微不小心，加错了量或者加错了地方，那就全乱套了。
这就好比你做菜的时候盐放多了或者糖放错了罐子，那这道菜肯定没法吃了。
加完之后呢，就把这个微柱凝胶卡放到专用的离心机里去转一转。
这离心机一转起来啊，就像是一场小小的风暴在卡片里刮起来了。
那些红细胞就会在这个风暴里寻找自己的归宿。
如果红细胞都乖乖地待在凝胶的底部，那就是个好兆头，说明很有可能配血成功了。
这就像一群小朋友在玩游戏，都找到了自己该站的位置，秩序井然。
要是红细胞跑到凝胶的中间或者顶部去了，那可就不太妙了，就像小朋友们乱跑乱撞，没有规矩，这就意味着可能存在配血不合的情况。
不过啊，咱们可不能光看这一个结果就下结论。
有时候可能会有一些小意外，就像你出门忘带钥匙一样，虽然是个小失误，但也可能影响判断。
所以得再仔细检查检查，看看有没有什么其他的异常情况。
做完这些，还得再做个对照实验呢。
为啥要做对照啊？这就好比你要知道一个东西好不好，得有个标准去对比呀。
要是没有对照，就像你不知道自己到底长高了还是变矮了，没有个尺子量一量怎么行呢？在整个微柱凝胶法交叉配血的过程中，每一个步骤都像是一颗螺丝钉，少了哪一个，这台精密的仪器都运转不起来。
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微柱凝胶卡式法交叉配血试验标准操作规程
1、目的
为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。
2、适用范围
本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理
4.1试验方法：凝胶测试法
4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。
5、样本采集和处理
受血者血样为EDTA-K2抗凝血。
抽取受血者静脉血3~4ml于专用管（紫色头管）内，分离出血浆。
红细胞配成0.8%的悬液，供血者血样以同样方法分离血浆，并配制0.8%红细胞悬液。
配血所用受血者血样必需是输血前3天内的。
6、试剂：
6.1 0.9%的生理盐水；
6.2戴安娜合血卡；
7、仪器：
7.1XTL-4.7细胞洗涤离心机；
7.2DiaMed-ID Incubator 37 SⅠ温育器；
7.3DiaMed-ID Centrifuge 12 SⅡ
8、操作程序：
8.1工作准备：
8.1.1生理盐水室温平衡。
准备样本。
标记合血卡。
8.1.2 0.8%-1%样本红细胞制备：加25μl样本压积红细胞
悬浮液于2ml戴安娜2号稀释液中。
8.1.3于1号管中（主侧）加入50μl献血者红细胞（0.8%）。
25μl受血者血浆或血清。
8.1.4 2号管中（次侧）加入50μl受血者红细胞（0.8%）。
25μl献血者血浆或血清。
8.1.5 37℃孵育15分钟。
8.1.6 离心10分钟。
判断结果，并作好记录。
9、结果判断：1+至4+为抗人球配血不相容；—（0）为配
血相容，可以输注。
10、医学解释：
ABO交叉配血试验是检查供、受血者血液中是否含有不相合
的抗原和抗体成分的试验。
其目的是发现ABO血型的不规则抗体；发现ABO血型以外的配血不和合，防止因错误定型所致的输血事故。
是安全输血的根本保证。
11、质量控制：每天常规实验前先做室内质控（具体执行《输
血科室内质量控制的标准操作规程》），结果在控后方可将常规
检查的报告发出。
12、注意事项：
12.1含抗体的新鲜血清，如补体尚有活性，遇相应红细胞抗原，可发生溶血现象，其意义与凝集相同。
12.2可以用含EDTA的血浆代替血清使用。
12.3每日实验前，先取出2号稀释液及标准细胞，放置一段时间到室温，以防冷凝集。
12.4实验前将卡离心3-4分钟。
必须标记合血卡。
12.5合血卡封口已损坏时，管中干涸，或有气泡时，卡不可使用。
12.6必须用2号稀释液保证反应结果可靠，细胞浓度要在0.8%左右，不可太浓或太稀。
12.7纤维蛋白可吸附部分红细胞，应将血样离心。
12.8液体应加在反应卡反应室中。
12.9严格按标准程序操作可检出弱抗原抗体反应，弱凝集。
12.10某些药物、疾病可导致血液不配合。
12.11细菌及异常血清蛋白可影响结果。
13、最常见的误差来源：
13.1自制分型血清抗体效价太低、亲和力不强，造成定型不准。
13.2患者纤维蛋白原升高或异常蛋白质血症（如多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症），可产生缗钱状假凝集。
新生儿脐带血中含有华顿胶（Wharton jally）或操作中使用了质量差的玻璃管（瓶），误认其脱下的胶状硅酸盐为串钱状凝集。
13.3病人输入了高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物，可引起红细胞聚集，易误认为凝集。
13.4血清中存在不规则抗体，如A2和A2B型患者血清内有A1抗体，能凝集A1红细胞。
此外还有I抗体等。
有些癌症患者（如胃癌、胰腺癌等）血中大量的可溶性A或B物质可中和抗体血清的抗体，从而抑制反应，造成假的不凝集。
13.5婴儿尚未产生自己的抗体（出生3~6个月后方逐渐产生），或有从母亲获得的血型抗体，故新生儿不宜用血清作反向定型。
13.6老年人血型抗体水平回下降，某些免疫缺陷的人或慢性淋巴细胞白血病、遗传性无丙种球蛋白血症以及有些用了免疫抑制剂的患者，由于免疫球蛋白下降，血型抗体也下降甚至缺如。
可出现反向定性错误。
13.7用近期内输过血的患者血液做对照红细胞，其红细胞是多种红细胞的混合物。
13.8病人红细胞已经被大量抗体包被（如某些自身免疫疾病或新生儿溶血病患者的红细胞），或红细胞悬浮于含高浓度蛋白的介质中，红细胞都回自发地发生凝集。
13.9有些人红细胞膜有遗传或获得性异常，易发生多凝集（较
罕见）。
]
13.10A或B的弱抗原易判断为不凝集（假阴性），而由细菌引起的获得性类B抗原易误判为阳性。
13.11由于患白血病或某些恶性肿瘤（如Hodgkin病）使A或B 抗原变弱。
婴儿及老年人的红细胞抗原较青壮年弱，在实验室内保存过久的红细胞及部分衰老的红细胞抗原性也会减弱。
13.12当用血清配制红细胞悬液时，若血清中有高浓度血型物质则会中和分型血清中的抗体，而不再与红细胞抗原起反应。
13.13红细胞被细菌污染。
13.14嵌合体（chimera）现象，此处指混和细胞群，见于异卵双生子。
如有98%O型红细胞，2%B型红细胞会定为O型，但血清中只有抗A抗体。
13.15用了不洁的玻璃器皿或使用了严重污染的血清、红细胞可出现假阳性。
试管沾染了洗涤剂会造成假阴性。
13.16红细胞与血清的比例不当、过度离心或离心不足可引起假阳性或假阴性。
13.17将出现的溶血现象（阳性）误认为阴性结果。
13.18温度过高会造成假阴性。
因为ABO血型系统的IgM抗体最适温度为4~22℃，如达37℃凝集力即下降。
13.19弄错标本、试剂、标签，或出现记录错误。
14、相关文件。