血球计数板计数法培训课件

（参考答案：稀释；2×108）
5×400×10000×10＝2×108 。
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例6、 在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释 50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下 的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16个，据此估 算10mL培养液中有酵母菌 ▲ 个。
3．加样品 将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片， 再用无菌的细口滴管将稀释的酵母菌 液由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过 多），使菌液沿缝隙靠毛细渗透作用 自行进入计数室，一般计数室均能充 满菌液。注意不可有气泡产生。静置 5—10分钟即可计数。
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（参考答案： 2×107）
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四、操作过程处，请联系网站或本人删除。
1．稀释 将酵母菌悬液进行适当稀释，菌液如不浓， 可不必稀释。 2．镜检计数室 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物，则需清洗后才能进行计数。
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4．显微镜计数 将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计 数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。在计数前若 发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一 般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。若 选用25×16规格的计数板则每个计数室选5个中方格， 可选4个角和中央的中格（即80个小格），若选用 16×25规格的计数板，则数四个角：左上、右上、左下、 右下的四个中方格，（即100小格）中的菌体进行计数。 位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵 母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作两个菌体 计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算 样品的含菌量。
三、实验原理处，请联系网站或本人删除。
利用血球计数板在显微镜下直接计数， 是一种常用的微生物计数方法。此法的优点 是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液 （或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖 玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。 由于计数室的容积是一定的（0.1㎜3），所以 可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来 换算成单位体积内的微生物总数目。由于此 法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称 为总菌计数法。
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一、实验目的 1、明确显微镜计数的原理。 2．学习使用血球计数板进行微生物计数 的方法。
二、实验材料 酵母菌悬液，血球计数板，显微镜，盖
玻片，无菌毛细管、吸水纸等。
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推导：1mm×1m处m，方请联格系的网计站或数本人删除。
1mm×1mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。由于计 数室厚度为0.1mm，所以计数室的总体积为0.1mm3。
1．16×25型的计数公式： 酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100
×400×10000×稀释倍数
2．25×16型的计数公式： 酵母细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80
×400×10000×稀释倍数
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假设：计数室内酵母菌为a个，稀释倍数 为b，则10mL培养液中酵母菌总数为：
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5.对每个样品计数三次，取其平均值， 计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
第一室 第二室
Hale Waihona Puke Baidu
各中格中菌数
A
B
二室平均值
12345
A-五个中方格的总菌数 B-稀释倍数
菌数/ml
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6．清洗血球计数板 血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切
a×105×b
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例4、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组成， 如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 ▲ 后 再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5 个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。
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计数室的刻处度，一请般联系有网两站或种本规人格删除，。一种是一个 大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25 个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分 成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格， 总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数 板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。 每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积 为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。
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血球计数板处，，请通联常系是网站一或块本人特删制除的。 载玻片，其上 由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽 隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每 个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数 室，微生物的计数就在计数室中进行。