糖化血红蛋白检测方法的标准化
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
<6.5%
监测指标：尿糖，血糖，糖化血清蛋白及糖化血清白蛋白，糖化 血红蛋白
1975年以前
尿糖，酮体 随机血糖 指导治疗以缓 解高血糖症状
检测技术进步 证据积累：糖 尿病慢性并发 症是慢性高血 糖的结果
wenku.baidu.com
上世纪80年代
尿糖被毛细血管 血糖检测取代 糖化血红蛋白成 为常规监测的重 要部分
糖尿病检查的项目选择
• 此种虽属理想的方法，但仪器价格十分 昂贵，仅在一些发达国家使用
HbA1c常规测定方法：
亲和色谱微柱法
• 自1981年问世以来，很快受到学者们的重视，作为糖尿 病理想的检测手段已获公认。目前我科也采用此种方法
原理：将血滴入反应试剂时，血红细胞被立刻 溶解，所有血红蛋白随机被沉淀。硼酸结合物 即可与糖化血红蛋白的顺式-二醇基结合。将反 应物置于检测设备上，所有已沉淀的血红蛋白 无论是否与硼酸结合，都将残留于滤网上，使 用清洗液，出去多余有色结合物。最后使用 NycoCard READERII检测仪对蓝色和红色的 色谱进行分析。
HbA1c常规测定方法：
Mission
亲和色谱微柱法
操作简单，快速，价廉。据报道EDTA抗凝血标本
优点
在20-24℃下可保存三周，其GHB值仍与第一天同
一血标本值无差异。
缺点
不能测试GHB的单一组分，且包含HbA1c的糖化
组分，但并不影响它作为可靠地糖代谢指标的价值。
HbA1c检测的标准化：
HbA1c标准化
糖化血红蛋白 检测方法的标准化
目录 ：
1
HbA1c常规测定方法
2
HbA1c检测的标准化
3
HbA1c检测的规范化
67岁女性严重糖尿 病病史 血糖控制不住
电泳产物中存在 异常的快速Hb
对47例糖尿病患 者进行了三个月 的研究
Add Yur Title
1A9dd6Y8o年ur T发itle表文章 “糖尿病血红蛋白成
分”
1969年研究发现， 快速泳动的Hb与 HbA1c结构相同
地中海贫血的病
人，HbF的含量
升高，而HbA1c
降低；这种情况
应该检测总的糖
Hb
化血红蛋白。
HbA ααββ
97%
HbA2 ααγγ
2.5%
HbF ααγγ
0.5%
非糖化 HbA0 94%
A1a和A1b浓 度非常低
HbA1a
HbA1 6%
HbA1c常规测定方法：
各种糖化 血红蛋白 的测定方 法
基于电位变化 的物理方法
基于胶乳颗粒 凝集的抑制作 用
基于化学原理 的方法
阳离子交换树 脂微柱层析法
高压液相法
琼脂凝胶电泳 法
免疫凝集抑制 法
TBA比色法
亲和色谱微柱 法（本科所采 用的方法）
HbA1c常规测定方法： 1.阳离子交换树脂微柱层析法
为0.3%（低值），0.4%（中值），0.5%（高值） • >95%实验室方法之间的差异≤0.5% • 可接受标准为NGSP靶值±10%，而不再考虑不同方法组的均值 • 总的符合率为95.2%--97.1%
注：若无糖尿病症状，尚需另有一次血糖超过11.1mol/l（200㎎/dl)
国际专家委员会建议的HbA1c 诊断糖尿病的切点
• HbA1c≥6.5%作为诊断非妊娠相关的糖尿病的切 点
• 将HbA1c在≥6.0%和≤6.5%范围内的个体定义为 “高危的亚糖尿病状态”
糖尿病的首选诊断标准
• 2009年美国糖尿病协会在糖尿病治疗指南中将 HbA1c列为糖尿病的首选诊断标准。
• 国家，地区标准化（National)：美国，瑞典及日本 • 国际标准化（International)；国际临床化学与医学实验
室联盟（IFCC)
HbA1c检测的标准化：
美国病理学会（CAP)PT调查
• 实验室采用HbA1c报告结果 • 实验室采用NGSP(美国糖化血红蛋白标准化计划）认可的方法 • 采用NGSP认可的方法，检测均值与NGSP的HbA1c靶值的差异分别
寿命：120days 50%的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31--90天平均血糖水平相关 只有10%HbA1c与过去91--120天平均血糖水平相关
ADA（美国糖尿病学会）对HbA1c的定义
• 1.HbA1c对糖尿病的重大影响相当于胰岛素的问世 • 2.HbA1c是监测糖尿病血糖控制的金标准 • 3.所有的糖尿病人均应常规的测定HbA1c • 4.对于血糖控制稳定者每年至少测定两次 • 5.对治疗方案变动者或血糖未达标者，则需季度监测 • 6.HbA1c的达标值ADA为<7%，IDF(国际糖尿病联盟)西太区标准
HbA1b
糖化
HbA1c 5%
主要的糖化血 红蛋白
已使用>20年 根据DCCT研 究确认
• 血糖是通过弥散方式进入细胞内的，无需胰岛素参与。血糖与血红蛋 白的结合过程很缓慢，而且是不可逆的，故体内衰老红细胞比新生红 细胞的糖化HbA1c含量约高出1.5倍。
• HbA1c是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物 • HbA1c越高表示血糖与血红蛋白结合越多，糖尿病病情也越重 • HbA1c监测已作为糖尿病疗效判定和调整治疗方案的“金指标”
• HbA1c水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时 间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期 控制的良好指标
• HbA1c在患有各种贫血，出血性疾病或应用心得安，吗啡等药物时可 降低，而在服用大量阿司匹林，维生素C或肾功能不全时可增高
HbA1c形成的动力学
诊断标准的变迁： 1985年WHO的糖尿病诊断标准
符合下列之一者可诊断为糖尿病
有典型的糖尿病症状，任意时间血糖
1
≥11.1mol/l（200㎎/dl)
FPG(空腹血浆葡萄糖水平)两次或两次以上
2
≥7.8mol/l（140㎎/dl)
FPG＜7.8mol/l（140㎎/dl)而怀疑为糖尿
3
病者，OGTT 2h PG(血糖）≥11.1mol/l （200㎎/dl)
优点
价廉，操作快速
缺点
易受以下多种因素的干扰 不稳定型HbA1HbF温度
综上表明：阳离子交换树脂法测定GHB不是一种精确，可靠，重复性强， 灵敏度搞的检测方法。用作要求不太高的衡量糖尿病长期控制水平的监测指 标，尚可勉强采用，而作为要求精确程度高的科研手段是困难的
高压液相法（HPLC)
• 是目前各种GHB测定方法中高效，精确 的方法之一
监测指标：尿糖，血糖，糖化血清蛋白及糖化血清白蛋白，糖化 血红蛋白
1975年以前
尿糖，酮体 随机血糖 指导治疗以缓 解高血糖症状
检测技术进步 证据积累：糖 尿病慢性并发 症是慢性高血 糖的结果
wenku.baidu.com
上世纪80年代
尿糖被毛细血管 血糖检测取代 糖化血红蛋白成 为常规监测的重 要部分
糖尿病检查的项目选择
• 此种虽属理想的方法，但仪器价格十分 昂贵，仅在一些发达国家使用
HbA1c常规测定方法：
亲和色谱微柱法
• 自1981年问世以来，很快受到学者们的重视，作为糖尿 病理想的检测手段已获公认。目前我科也采用此种方法
原理：将血滴入反应试剂时，血红细胞被立刻 溶解，所有血红蛋白随机被沉淀。硼酸结合物 即可与糖化血红蛋白的顺式-二醇基结合。将反 应物置于检测设备上，所有已沉淀的血红蛋白 无论是否与硼酸结合，都将残留于滤网上，使 用清洗液，出去多余有色结合物。最后使用 NycoCard READERII检测仪对蓝色和红色的 色谱进行分析。
HbA1c常规测定方法：
Mission
亲和色谱微柱法
操作简单，快速，价廉。据报道EDTA抗凝血标本
优点
在20-24℃下可保存三周，其GHB值仍与第一天同
一血标本值无差异。
缺点
不能测试GHB的单一组分，且包含HbA1c的糖化
组分，但并不影响它作为可靠地糖代谢指标的价值。
HbA1c检测的标准化：
HbA1c标准化
糖化血红蛋白 检测方法的标准化
目录 ：
1
HbA1c常规测定方法
2
HbA1c检测的标准化
3
HbA1c检测的规范化
67岁女性严重糖尿 病病史 血糖控制不住
电泳产物中存在 异常的快速Hb
对47例糖尿病患 者进行了三个月 的研究
Add Yur Title
1A9dd6Y8o年ur T发itle表文章 “糖尿病血红蛋白成
分”
1969年研究发现， 快速泳动的Hb与 HbA1c结构相同
地中海贫血的病
人，HbF的含量
升高，而HbA1c
降低；这种情况
应该检测总的糖
Hb
化血红蛋白。
HbA ααββ
97%
HbA2 ααγγ
2.5%
HbF ααγγ
0.5%
非糖化 HbA0 94%
A1a和A1b浓 度非常低
HbA1a
HbA1 6%
HbA1c常规测定方法：
各种糖化 血红蛋白 的测定方 法
基于电位变化 的物理方法
基于胶乳颗粒 凝集的抑制作 用
基于化学原理 的方法
阳离子交换树 脂微柱层析法
高压液相法
琼脂凝胶电泳 法
免疫凝集抑制 法
TBA比色法
亲和色谱微柱 法（本科所采 用的方法）
HbA1c常规测定方法： 1.阳离子交换树脂微柱层析法
为0.3%（低值），0.4%（中值），0.5%（高值） • >95%实验室方法之间的差异≤0.5% • 可接受标准为NGSP靶值±10%，而不再考虑不同方法组的均值 • 总的符合率为95.2%--97.1%
注：若无糖尿病症状，尚需另有一次血糖超过11.1mol/l（200㎎/dl)
国际专家委员会建议的HbA1c 诊断糖尿病的切点
• HbA1c≥6.5%作为诊断非妊娠相关的糖尿病的切 点
• 将HbA1c在≥6.0%和≤6.5%范围内的个体定义为 “高危的亚糖尿病状态”
糖尿病的首选诊断标准
• 2009年美国糖尿病协会在糖尿病治疗指南中将 HbA1c列为糖尿病的首选诊断标准。
• 国家，地区标准化（National)：美国，瑞典及日本 • 国际标准化（International)；国际临床化学与医学实验
室联盟（IFCC)
HbA1c检测的标准化：
美国病理学会（CAP)PT调查
• 实验室采用HbA1c报告结果 • 实验室采用NGSP(美国糖化血红蛋白标准化计划）认可的方法 • 采用NGSP认可的方法，检测均值与NGSP的HbA1c靶值的差异分别
寿命：120days 50%的HbA1c值与过去30天内的平均血糖水平相关 40%的HbA1c值与过去31--90天平均血糖水平相关 只有10%HbA1c与过去91--120天平均血糖水平相关
ADA（美国糖尿病学会）对HbA1c的定义
• 1.HbA1c对糖尿病的重大影响相当于胰岛素的问世 • 2.HbA1c是监测糖尿病血糖控制的金标准 • 3.所有的糖尿病人均应常规的测定HbA1c • 4.对于血糖控制稳定者每年至少测定两次 • 5.对治疗方案变动者或血糖未达标者，则需季度监测 • 6.HbA1c的达标值ADA为<7%，IDF(国际糖尿病联盟)西太区标准
HbA1b
糖化
HbA1c 5%
主要的糖化血 红蛋白
已使用>20年 根据DCCT研 究确认
• 血糖是通过弥散方式进入细胞内的，无需胰岛素参与。血糖与血红蛋 白的结合过程很缓慢，而且是不可逆的，故体内衰老红细胞比新生红 细胞的糖化HbA1c含量约高出1.5倍。
• HbA1c是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物 • HbA1c越高表示血糖与血红蛋白结合越多，糖尿病病情也越重 • HbA1c监测已作为糖尿病疗效判定和调整治疗方案的“金指标”
• HbA1c水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时 间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期 控制的良好指标
• HbA1c在患有各种贫血，出血性疾病或应用心得安，吗啡等药物时可 降低，而在服用大量阿司匹林，维生素C或肾功能不全时可增高
HbA1c形成的动力学
诊断标准的变迁： 1985年WHO的糖尿病诊断标准
符合下列之一者可诊断为糖尿病
有典型的糖尿病症状，任意时间血糖
1
≥11.1mol/l（200㎎/dl)
FPG(空腹血浆葡萄糖水平)两次或两次以上
2
≥7.8mol/l（140㎎/dl)
FPG＜7.8mol/l（140㎎/dl)而怀疑为糖尿
3
病者，OGTT 2h PG(血糖）≥11.1mol/l （200㎎/dl)
优点
价廉，操作快速
缺点
易受以下多种因素的干扰 不稳定型HbA1HbF温度
综上表明：阳离子交换树脂法测定GHB不是一种精确，可靠，重复性强， 灵敏度搞的检测方法。用作要求不太高的衡量糖尿病长期控制水平的监测指 标，尚可勉强采用，而作为要求精确程度高的科研手段是困难的
高压液相法（HPLC)
• 是目前各种GHB测定方法中高效，精确 的方法之一