亚硝酸盐氮测定方法

亚硝酸盐

亚硝酸盐（NO2--N）是氮循环的中间产物，不稳定。根据水循环条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现组织缺氧的症状。亚硝酸盐可于仲胺类反应生成具致癌性的亚硝胺类物质，在pH值较低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。

水中亚硝酸盐的测定方法通常采用重氮—偶联反应，使生成红紫色染料。方法灵敏、选择性强。所用重氮和偶联试剂种类较多，最常用的，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯磺酸，后者为N-（1-萘基）-乙二胺和α-萘胺。

亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时以冷藏抑制微生物的影响。

一、N-（1-萘基）-乙二胺光度法

GB7493--87 概述

1.方法原理

在磷酸介质中，pH值为 1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。

2．干扰及消除

氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。

3．方法的适用范围

本方法适用于饮用水、地面水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为0.20 mg/L 亚硝酸盐氮。

仪器

分光光度计

试剂

实验用水均为不含亚硝酸盐的水。

（1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡（或氢氧化钙）使呈碱性。置全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50ml初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。亦可于每升蒸馏水中加1ml浓硫酸和0.2ml硫酸锰溶液（每100ml水

中含36.4g Mn.H20），加入1-3ml 0.04%高锰酸钾溶液至呈红色，重蒸馏。

（2）磷酸（ρ=1.70 g/ml）

（3）显色剂：于500ml烧杯内，置于250ml水和50ml磷酸，加入

20.0g对氨基苯磺酰胺。再将1.00g N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸

盐溶于上述溶液中，转移至500ml容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。

此溶液贮于棕色瓶中，保存在2-5 ℃，至少可稳定一个月。

注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或吸入体内。

（4）亚硝酸盐氮标准贮备液：称取 1.232g亚硝酸钠（Na2NO2），溶于150ml水中，转移至1000ml容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约0.25mg亚硝酸盐氮。

此溶液贮于棕色瓶中，加入1ml三氯甲烷，保存在2-5℃，至少稳定一个月。贮备液的标定如下：

在300ml具塞锥形瓶中，移入50.00ml 0.050mol/L高锰酸钾溶液，5ml浓硫酸，用50ml无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液液面下，加入50.00ml亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀，置于水浴水加热至70-80℃，按每次10.00ml的量加入足够的草酸钠标准溶液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量（V2）。然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量（V1）。

再以50ml水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠标准溶液标定高锰酸钾溶液的浓度（c1）。按下式计算高锰酸钾标准溶液浓度：

c1(1/5KMnO4)=

34

0500 .0

V

V ⨯

按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：

亚硝酸盐氮(N, mg/L)= ()

00

.

50

1000

00

.7

0500

.0

2

1

1

⨯

⨯

⨯

-V

c

V

=140 V1 c1–7.00×V2

c1--经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度(mol/L)；

式中，V1—滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml）；

V2--滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液总量（ml）；

V3—滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（ml）；

V4—滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（ml）；

7.00—亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）；

50.00—亚硝酸盐标准贮备液取用量（ml）；

0.0500—草酸钠标准溶液浓度（1/2Na2C2O4，mol/L）。

(5)亚硝酸盐氮标准中间液:分取适量亚硝酸盐标准贮备液（使含

12.5mg亚硝酸盐氮），置于250ml容量瓶中，用水稀释至标线。此

溶液每毫升含50.0µg亚硝酸盐氮。

中间液贮于棕色瓶内，保存在2-5℃，可稳定一周。

(6)亚硝酸盐标准使用液:取10.00ml亚硝酸盐标准中间液，置于500ml

容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含1.00µg亚硝酸盐氮。

此溶液使用时，当天配制。

(7)氢氧化铝悬浮液：溶解125g硫酸铝钾[KAl (SO4)2·12H2O]或硫酸铝

铵[NH4Al(SO4)2·12H2O]于1000ml水中，加热至60℃，在不断搅拌

下，徐徐加入55ml氨水，放置约1h后，移入1000ml量筒内，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入300ml水，使用前应振荡均匀。

(8)高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4，0.050 mol/L）：溶解1.6g高锰酸

钾于1200ml水中，煮沸0.5-1h，使体积减少到1000ml左右，放置过夜。用G-3号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。

(9)草酸钠标准溶液（1/2Na2C2O4，0.0500mol/L）：溶解经105℃烘干

2h的优级纯无水草酸钠3.350g于750ml水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线。

步骤

1．校准曲线的绘制

在一组6支50ml比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml亚硝酸盐标准使用液，用水稀释至标线。加入 1.0ml显色剂，密塞，混匀。静置20min后，在2h以内，于波长540nm处，用光程长10mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。

从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量（μg）对校正吸光度的校准曲线。

2．水样的测定

当水样pH≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边逐滴加入（1+9）磷酸溶液，至红色刚消失。

水样入有颜色和悬浮物，可向每100ml水中加入2ml氢氧化铝悬浮液，搅拌，静置，过滤，弃去25ml初滤液。