最新(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体课件PPT

【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
(公开课)动物细胞融合与单克 隆抗体
番茄-马铃薯 （理想图）
1.1动物细胞融合的概念
A细胞
B细胞
人工诱导
动物细胞融合（也称细胞杂
交）：是指两个或多个细胞融
合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
原理： 细胞膜的流动性 （与植物细胞融合的基本原理相同）
物理法： 离心、电激、振动 诱导方法 化学法： 聚乙二醇(PEG)
应用： 制备单克隆抗体（最主要的应用）
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
抗体的传统生产方法
抗原 反复注射动物
该法制备抗体的缺点： 产量低 纯度低
特异性差 灵敏度低
从动物的血清中分离抗体
1975年的实验室
一个美丽的发现
每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体
进行无性繁殖（克隆）
学习要点
一、肺水肿的分类
二、诊断鉴别 三、临床表现 四、治疗原则 五、抢救与护理 六、健康指导
一、肺水肿的分类
(一)按临床病因分类
1.心源性肺水肿 2.非心源性肺水肿
(二)按发病机理分类
1. 肺循环压力失衡性肺水肿 2. 肺泡-毛细血管膜通透性增加性肺水肿 3. 淋巴引流功能不全及其它肺水肿
3. 淋巴引流功能不全及其它肺水肿：癌性、纤维性 淋巴管炎，其它如麻醉剂过量、过敏、休克等 肺水肿常为上述3种机理的混合存在。
二、诊断鉴别
肺水肿的诊断主要根据症状、体征和X线表现。
早期诊断方法：测定肺小动脉楔压和血浆胶体渗 透压，如压差小于 4mmHg时不可避免出现肺水肿。
细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ，还有 大量增殖 本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
课后作业：
比较动、植物细胞杂交技术
比较项目 细胞融合 细胞融合 诱导手段 的原理 的方法
植物体 细胞杂交
用途
动物细 胞融合
单克隆抗体: 单个B细胞克隆产生的化学性质 单一、特异性强的抗体
急性肺水肿的护理
双江人民医院儿科 杨书书
概念
急性肺水肿是指肺间质（血管外）液体积聚过多 并侵入肺泡空间。
表现为急性呼吸困难、紫绀，伴咳嗽，常咳出粉 红色泡沫样痰，大汗淋漓，心率增快，两肺布满湿罗 音及哮鸣音，可出现严重低氧血症，甚至晕厥及心脏 骤停。
生物法：灭活的病毒（特有的方法）
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性）
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性 保留融合活性
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 成为可能
15、右图为某同学根据杂交瘤技术
的方法，设计的生产破伤：
（1）该方案能达到预期效果吗 ？ 不能 。原因是
__没__有__将__抗__原__注__入__小__鼠__体__内__，__无__法__获_得 __产__生__专__一__抗__体__的_。B淋巴细胞
（2）图中②为 细胞融合 过程 ，常用 灭活病毒 作为诱导剂。该
(一)按临床病因分类
1.心源性肺水肿：为各种 心脏病引起急性左心
功能不全。常见于高血压、冠心病、风心病、 先心病、心肌病、心肌炎等
2.非心源性肺水肿：包括高原性肺水肿、神经 源性肺水肿、麻醉剂等药物中毒性肺水肿，以 及吸入有毒气体、误吸过量液体、严重肺感染、 多发性肺小静脉血栓形成、体克肺等引起的肺 水肿，输液过量、严重肝肾疾病致严重钠水潴
（二选）：选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基：
只有杂交 瘤细胞才
能存活
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
C.电刺激
D.振动
【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息
A
)
B.能无限增殖
C.可形成新个体
D.培养过程会贴壁
【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
(二)按发病机理分类
1. 肺循环压力失衡性肺水肿：多见于心源性肺水肿， 各种器质性心脏病引起心脏前、后负荷过重， 心肌收缩力下降，造成心排血量减少，肺循环 瘀血及肺血管压力升高。其它如输液过量、重 度贫血等所致肺循环中的血容量增高，引起肺 血管压力升高。
2. 肺泡毛细血管膜通透性增加性肺水肿：各种感染 性肺炎，吸入液体或有毒气体，过敏、中毒或 休克所致ARDS等。使肺脏气-血屏障通透性过 度增加，加上肺循环缺氧、血管痉挛及压力增 加，综合作用下形成肺水肿。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
单抗导向，药物为弹头
动物细胞融合过程 两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒
三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
B 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ）
A.离心
B.灭活的病毒
但是体外
怎样大量
？ 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又能大量增殖的细胞
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞
目的获：得产生 相应抗体的B 细胞