女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别

女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别
女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait．的干燥成熟果实。

甘、苦，凉。

归肝、肾经。

能补肝肾阴，乌须明目。

主治眩晕耳鸣，腰膝酸软，须发早白，目暗不明，视力减退，阴虚发热。

为常用的扶正固本中药。

药理研究表明其提高免疫的主要有效成分为齐墩果酸、熊果酸及乙酰齐墩果酸。

齐墩果酸以游离态和结合成苷的形式同存于女贞子中。

女贞子还含有橄榄苦苷、D-甘露醇、硬脂酸、植物蜡等，其他成分尚有特女贞子苷、女贞苦苷、女贞子酸、芹黄素、甘露醇、葡萄糖、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、槲皮素和β-谷甾醇等。

一、实验目的
1．掌握三萜类化合物的提取分离原理和操作方法；
2．掌握三萜类化合物的结构和一般性质的关系；
3．熟悉三萜类化合物的基本鉴别方法。

二、仪器与试药
（一）仪器
RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅
玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（500mL） ZF-2型三用紫外仪
电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）分液漏斗（125mL）
（二）试药
女贞子乙醇氢氧化钠盐酸氯仿 pH试纸活性炭醋酐浓硫酸
苯甲酸乙酯甲酸甲醇甲苯乙酸乙酯冰醋酸
三、主要成分的结构与性质
表9－1 黄芩中主要成分的物理性质
RO COOH COOH
O H
齐墩果酸 R=H 熊果酸
乙酰齐墩果酸 R=COCH 3
四、实验原理
1．利用齐墩果酸，乙酰齐墩果酸可溶于95%乙醇的性质进行提取；
2．在碱性条件下水解乙酰齐墩果酸，然后酸化，用氯仿将萃取出已游离的齐墩果酸；
3．用无水乙醇－水对齐墩果酸进行重结晶。

五、实验内容
（一）齐墩果酸的提取分离和精制
女贞子粗粉100g
回流提取1小时，过滤
回流提取1小时，过滤
加入10%氢氧化钠适量调pH 至10-11，
分钟，
残渣（弃去） 上清液
pH2～3，用氯仿萃取3次（30、20、20mL ）
回收氯仿至干，用无水乙醇20mL 多次将残留物转溶出来，放在小烧杯
中，滴加蒸馏水，产生大量沉淀，过滤，滤渣用热蒸馏水洗3～5次
滤液
加热溶解后，加活性炭1g回流
3～5次
在沉淀中加入无水乙醇约20mL水
浴加热溶解，再滴加蒸馏水，产生大量
沉淀，放冷析晶，过滤，抽干
齐墩果酸纯品
（二）鉴别实验
1．化学检识
（1）醋酐-浓硫酸反应：取少量样品，加1mL醋酐溶解，再加5滴浓硫酸，观察颜色变化，可产生黄红紫蓝等颜色变化，最后变为褐色。

（2）氯仿-浓硫酸反应：取少量样品，溶于氯仿，加入浓硫酸后，观察颜色变化，可发现在氯仿层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。

2．薄层层析法
吸附剂：青岛硅胶G以0.4%CMC-Na水溶液制板，105℃活化40分钟。

展开剂：（1）苯–甲酸乙酯–甲酸（5：4：1）
（2）氯仿–甲醇（40：1）
（3）甲苯–乙酸乙酯–冰醋酸（12：4：0.5）
显色剂：（1）喷10%硫酸的95%乙醇溶液显色（105℃加热5分钟显紫色）；
（2）喷磷钼酸试液显色（110℃加热10分钟显兰色）
六、实验结果
1．记录齐墩果酸提取分离和纯化的过程。

2．详细记录定性反应结果.
3．绘制色谱图，并计算R f值。

4．总结实验过程中遇到的问题和解决方法。

七、思考题
1．三萜类化合物的提取分离原理及方法。

2．三萜类化合物的结构和一般性质的关系。