女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别

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不同方法提取女贞子中齐墩果酸的含量_蒋珍菊

津公司生产； Milli-Q 超纯水仪，由 Millopore 公司生产； HA121—50—01（ 02）超临界萃取设备，由江苏南通华安超临界萃取有限公司生产； KQ-100DE 型数控超声波清洗器，由昆山市超声仪器有限公司生产。 1． 1． 3 主要试剂。浓度 95% 乙醇、无水甲醇，分析纯，由成都市科龙化工试剂厂生产；甲醇，色谱纯，由上海陆都试剂厂生产；齐墩果酸标准品，由中国药品生物制品鉴定所生产；色谱用水为 Mini-Q 水等。 1． 2 方法 1． 2． 1 样品处理。取女贞子药材，经 60 ℃ 干燥，粉碎，过 40 目筛。 1． 2． 2 微波辅助提取女贞子中齐墩果酸。精确称取 5． 000 g 女贞子粉放入烧杯内，按正交试验设计处理后（在设定时间内，每处理 30 s 后暂停 1 min，再辐射 30 s，以此类推，重复间隔辐射至总辐射时间达到试验规定时间），高速离心，收集上清液。用旋转蒸发仪将上清液真空浓缩至浸膏状，真空干燥后用无水甲醇定容，即得。 1． 2． 3 超临界萃取女贞子中齐墩果酸。精密称取 5． 000 g 女贞子粉。经超临界 CO2 萃取得浸膏液，高速离心，收集上清液。用旋转蒸发仪将上清液真空浓缩至浸膏状，真空干燥后用无水甲醇定容，即得。 1． 2． 4 超声波辅助提取女贞子中齐墩果酸。精确称取 5． 000 g 干燥女贞子粉末于 500 ml 圆底烧瓶中，按正交试验设计进行超声辅助回流提取，高速离心，收集上清液。用旋转蒸发仪将上清液真空浓缩至浸膏状，真空干燥后用无水甲醇定容，即得。 1． 2． 5 对照品溶液的制备。精确称取 0． 001 0 g 齐墩果酸对照品至试管中，加 1 ml 无水甲醇溶解，摇匀，作为齐墩果酸标准溶液（浓度 1 mg / ml）［9 －10］。

女贞子中齐墩果酸的提取与鉴定

中图分类号：Ｑ６．；９９７６２Ｔ４４２Ｑ４．７．文献标志码：Ａ文章编号：００— ２６２１）１— １９—０１０２８（０２００７４
ＥｘｒｃｉｎａｄＩｅｉｃｔｏｆＯｌａｏｉｉｔａｔｏｎｄｎｔｆａｉｎｏｅｎｌＡｃｄｉｃｉｇｓｒｍｕｉｕＡｉ．ｎＬｉｕｔｕｌｃｄｍｔ
ＬｉｑａＴＯＵａ１ｉＩＫａ — ｕｎｒ．Ｈｕ．ｅ
（．ｅａｏａｒｏｒｖｎｅｆｅｅｒｈｏｃｖｇｅｉｔｉａｒｌｄｃｅ，ｉｈｎ３６０１ＫｙＬｂｒｔｙｆｏｉｃｒｓａｃｎＡｔｅＩｒｄｅｓｎＮｔａＭｅｉｎｓＹｃｕ３００，ｏＰｏＲｉｎｎｕｉＣｉａ２Ｃｅｉｒ＆ＢｏｎｉｅｒｇＣｌｇｆｉｈｎＵｉｅｓｙＹｃｕ３００Ｃｉａｈｎ；．ｈｍｓｔｙｉｅｇｅｉｏｌｅｏｃｕｎｖｒｉ，ｉｈｎ３６０，ｈｎ）ｎｎｅＹｔ
女贞子中齐墩果酸的提取与鉴定
李开泉，陶华蕾
（．西省天然１江
，
江西宜春３６０；２宜春学院化学与生物工程学院，３００．江西宜春３６０）３００
摘要：研究＝５乙醇回流提取２次，９％每次１ｈ减压回收乙醇后，以水洗涤得沉降物。用 “ ＣＹ一ＹＸ２号 ” 除杂剂处理后，加活性炭脱色３ｉ，０ｒｎ经凝析分离、ａ纯化精制得产品。采用理化常数测定和薄层色谱、红外光谱、谱及核磁共振光谱鉴定其化学结构。实验所得产品确证为齐墩果质酸，其纯度达９．３９６％。齐墩果酸为女贞子的主要化学成分。本实验方法简单易行，理实用，品纯度高，合产安全性好，为工业生产提供了技术参考。关键词：女贞子；齐墩果酸；提取分离；结构鉴定

实验三齐墩果酸的提取

实验三齐墩果酸的提取、分离及鉴定一、实验目的1 、掌握三萜皂苷元的提取、分离和鉴定技术，熟悉三萜皂苷的性质。

2 、掌握两相溶剂水解方法。

3 、掌握碱溶盐析法提取萜类化合物的方法。

齐墩果酸又名庆四素，属五环三萜类化合物，广泛分布于植物界，已报道其以游离态、酯、苷或兼有的形式存在于150多种植物中，而多数是以苷的形式存在。

但含齐墩果酸的量超过10％的甚少。

从刺五加、龙牙楤木中提得率超过10％，纯度达95％以上，是理想的药用资源，是一种天然产物化学成分，并己证实其具有多种生物活性。

纯齐墩果酸是白色簇状结晶，无色、无味、无臭，熔点为308-31O C，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂。

据研究证实，齐墩果酸具有消炎抑菌、增强免疫功能、降转氨酶、改善肝功能，纠正体内异常蛋白代谢，防止肝硬化、降血糖、降血脂等多方面的临床药理作用，它对急性黄疸型肝炎和慢性病毒性肝炎疗效显著，是国内研制的保肝、治疗肝炎的有效药物之一。

此外，齐墩果酸还具有抗血栓形成、抗突变、抗艾滋病、抑制HIV-I 的复制作用；以及强心、利尿和抑制S180瘤株生长等作用，其毒性小，副作用低，安全范围大。

齐墩果酸还因其有抗衰老、抗突变、清除自由基的作用，还可以作为化妆品成分被广泛应用。

女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait ．的干燥成熟果实，为常用的扶正固本中药。

药理研究表明其促进免疫的主要有效成分为齐墩果酸、熊果酸及乙酰齐墩果酸。

齐墩果酸以游离态和结合成苷的形式同存于女贞子中。

经检测发现其齐墩果酸含量以幼果期（8月）含量最高，可达8.04％，随着发育成熟下降到 2.5％左右。

其在果实中的含量分布为外中果皮＞全果实＞内果皮＞种仁。

女贞子还含橄榄苦苷、D-甘露醇、硬脂酸、植物蜡等。

女贞子中主要有效成分：（1）齐墩果酸：G O F48Q，白色针状结晶（95%乙醇），mp 305-306 C。

可溶于热甲醇、乙醇、乙醚、氯仿、丙酮等，不溶于水。

齐墩果酸的提取及鉴别

齐墩果酸是从龙胆科植物獐牙菜属的青叶胆全草或女贞子的果实中分离提取而得一种五环三萜类化合物，以游离体和配糖体存在于多种植物中。

齐墩果酸在植物中存在很广泛，一般含量0.2%～2%。

葫芦科植物罗锅底含量较高为1.5%～2%，女贞子果实含量0.6%～0.7%。

齐墩果酸为白色针状结晶 (乙醇)，无臭、无味。

对酸、碱不稳定。

熔点308～310℃，[α]20D+73.3° (c=0.15，氯仿)，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。

醇提制备法：将木根皮100g切成小块或丝状，加500ml 70%乙醇回流提取3次，每次约3小时，醇提取液合并；然后蒸馏回收大部分乙醇，再加入硫酸使其浓度为15%，回流2小时，放冷后过滤滤饼用水洗3次，再用3% 氢氧化钠液煮沸2次，用水煮沸1次，每次沸腾后过滤，可得灰白色钠盐粗品。

将粗品加约8倍量85%以上乙醇，0.5%活性炭回流40分钟，过滤，滤液用HCl 调至pH=3～4放置过夜，过滤，滤饼用蒸馏水洗至无氯离子，干燥即得齐墩果酸精品。

水提制备法：取木根皮块粉碎后，用水煎煮3次，每次约1小时，合并水煎液，浓缩成稀膏状。

然后加入浓硫酸不断搅拌，使其浓度达到20%，加热约1小时，放冷后加水稀释，过滤，滤饼水洗后，用3%氢氧化钠溶液煮沸2次，水煮沸1次，每次沸腾后过滤，得钠盐粗品。

将粗品加约8倍量85%以上乙醇，0.5%活性炭，回流40分钟，过滤，滤液再用HCl调至pH=3～4，放置过夜，过滤，滤饼用蒸馏水洗至无氯离子，干燥即得本品。

鉴别方法步骤(1)取该品约50mg，加氯仿2ml溶解后，加硫酸2滴，振摇，静止，氯仿液自无色（或淡黄色）渐变为淡红色。

(2）取该品少量，加乙酸酐lml，微热使溶解，滴加硫酸1滴，即显紫红色，放置后色渐变深。

(3）取该品少量，加香草醛的冰乙酸溶液（香草醛0.5g，加冰乙酸10ml溶解，即得）0.2ml，加高氯酸0.8ml，置沸水浴中加热数分钟，显紫红色，加乙酸乙酯2ml，紫红色溶入乙酸乙酯中，放置不变色。

女贞子的成分分析及鉴定

女贞子的成分分析及鉴定胡红（阿坝师范高等专科学校08化教学号20082036）【摘要】目的为女贞子药材的质量评价提供科学依据。

方法：以固相萃取（SPE）进行样品供试液的前处理，采用RP HPLC法，分别测定齐墩果酸与熊果酸的含量，色谱柱：Kromasil KR100 5 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：［乙腈甲醇（体积比1∶1）水（体积比90∶10）］；流速：0.8 mL/min；检测波长：210 nm；柱温25 ℃；进样量：2 μL。

结果样品中齐墩果酸与熊果酸得到较好的分离；齐墩果酸在0.108～3.24 μg的范围内、熊果酸在0.060～1.800 μg范围内，与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率分别为100.50％、98.05％；11批次样品中齐墩果酸的含量为0.639～1.340 mg/g，熊果酸的含量为0.168～0.377 mg/g。

结论采用SPE进行供试品溶液前处理，能够有效消除女贞子药材中杂质成分对末段吸收波长的干扰，所建立的方法具有简便、稳定、可重复的特点，可用于女贞子药材的质量控制。

固相萃取（SPE）是一种新兴的样品前处理技术，近年来已经应用于中药含量测定方法研究［6-10］，但还未见有将此方法应用于女贞子的含量测定中。

本文报道采用此技术进行女贞子药材样品的前处理，结合反相高效液相色谱法，消除了样品中杂质对齐墩果酸、熊果酸在紫外末端测定的干扰，使样品中齐墩果酸与熊果酸在同一色谱条件下较好地得到了分离，并进行了多批次样品的含量比较，以期为女贞子药材的质量评价提供更稳定可靠的方法。

【关键词】女贞子；齐墩果酸；对羟基苯乙醇苷类和裂环环烯醚萜苷类；挥发油类；多糖；磷脂；微量元素；其它；含量测定；固相萃取；HPLC1概述女贞子为常用中药，具有滋补肝肾、明目乌发的功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等证［1］724。

女贞子中主要含有三萜类成分，其中齐墩果酸为主要的代表性成分，此外尚含有熊果酸等。

天然药物化学实验指导

实验须知 (1)第一章天然药物化学实验技术 (5)第一节经典的提取和分离方法 (5)第二节结晶和重结晶 (9)第三节层析分离方法 (11)第二章实验部分 (18)实验一中草药化学成分的鉴别法 (18)实验二薄层板的制备、活度测定及应用 (25)实验三秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取分离和鉴别 (28)实验四虎杖中游离羟基蒽醌类成分的提取分离和鉴别 (31)实验五芦丁的提取分离和鉴别 (36)实验六黄芩中黄芩苷的提取分离和鉴别 (40)实验七挥发油成分的提取和鉴别 (44)实验八穿心莲内酯的提取分离鉴别与亚硫酸氢钠加成物的制备 (48)实验九女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别 (54)实验十薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别 (57)实验十一粉防己生物碱的提取分离和鉴别 (60)实验十二绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别(设计性实验) (65)附录一中草药化学成分检出试剂配制法 (67)附录二常用有机溶媒的性质 (74)实验须知一、天然药物化学实验的特点1．实验周期长。

本实验指导中一般一个提取分离和鉴别实验需要用去8学时，时间长。

因此，在实验过程中，应该注意仪器、试剂尤其是提取物的妥善保管或者保存。

2．所用试剂和溶剂品种较多，用量较大，许多试剂易燃、有毒或有腐蚀性，在一定条件下可能会和空气会形成爆炸混合物。

许多实验需用电炉加热或进行减压操作，学生用到的热源和电器较多，因此应切实注意实验安全，严防产生触电、中毒、烫伤等意外发生，谨防发生火灾、爆炸等重大事故，并保证实验室通风良好。

二、实验规则天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和鉴定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。

养成严谨的科学态度和良好的工作作风是必不可少的教学环节。

为此，提出下列实验注意事项：1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生，若发生事故应立即报告指导教师，进行适当处理。

女贞子中齐墩果酸提取

一、女贞子中齐墩果酸提取将干燥的女贞子粉碎成粗粉( 20 目) ，用石油醚浸泡脱脂24 h，滤去石油醚，药渣挥干溶剂后，加5倍量体积分数为95%的乙醇回流提取2 次，每次1 h，合并2 次提取液，减压回收乙醇得浸膏。

浸膏以水沉降2 次，取沉降物，用自制的“YCXY －2 号”（？？虽然不知道，但是可以找替代除脂类及色素药品，你找找，我没查文献）除杂剂处理，除去脂类、类脂类及色素等杂质，过滤，不溶物用乙醇加热溶解，并加活性炭脱色30 min，趁热过滤，滤液经凝析分离（需要什么）、纯化精制，烘干得针状结晶齐墩果酸。

二、HPLC 法测定女贞子中齐墩果酸的含量（根据文献）齐墩果酸对照品甲醇（所需量比较大）95%乙醇（大量）40 目筛0. 45μm滤膜微量取样器活性炭石油醚三、提取女贞子中黄酮类化合物方法对女贞子中黄酮类化合物的提取方法进行对比研究。

［方法］分别采用溶剂浸提和超声波提取法对女贞子中黄酮类化合物进行提取研究，并以女贞子中总黄酮提取率为评价指标，运用正交分析法确定各种方法的最佳提取条件。

1．［结果］采用溶剂浸提法提取女贞子中总黄酮的最佳提取工艺为:，即浓度50%乙醇为溶剂，料液比1∶35 ( g /ml) ，浸提温度90 ℃，浸提时间1．0 h; 在此提取条件下，女贞子总黄酮的提取率为1．197%。

2. 采用超声波法提取女贞子中总黄酮的最佳提取工艺为:即选定乙醇浓度为50%，料液比为1∶70 ( g /ml) ，超声功率600 W，提取时间20 min; 在此提取条件下，女贞子总黄酮的提取率为13．61%。

［结论］超声提取女贞子中黄酮类化合物的提取率明显高于溶剂浸提法，并且操作简单易行，是一种理想的提取方法。

四、女贞子中黄酮类化合物可采用紫外分光光度计法进行定量检测需要芦丁标准品{NaNO2 A l( NO3 ) 3N aOH}少量即可。

女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究

Ningxia Normal University 本科学生毕业论文题目女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究姓名王欣荣学号2014211037论文编号院（系）化学化工学院专业化学指导教师王亚丽职称（学历）讲师完成时间2018年4月15日宁夏师范学院教务处制目录中文摘要 ................................................................................................. I II 英文摘要 ................................................................................................. IV0 前言 (1)1 实验试剂和实验仪器 (1)1.1实验试剂 (1)1.2实验仪器 (2)2 实验方法 (2)2.1标准曲线的绘制 (2)2.2超声辅助提取 (3)2.3单因素试验 (3)3 女贞子中齐墩果酸提取条件的优化 (7)3.1正交试验 (7)3.2验证试验 (9)4 结果与讨论 (9)参考文献 (10)致谢 (12)女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究摘要：本论文对女贞子的提取工艺进行优化，在单因素试验的基础上，以浸提时间、料液比、提取温度以及乙醇的浓度为自变量，通过正交试验对其提取工艺进行优化，最后得到提取女贞子中的齐墩果酸的最佳工艺条件为料液比为l：8时、提取时间为30min、提取温度为30℃、乙醇浓度为85％时，齐墩果酸的得率达到2．58％，此时的花青素提取效果最优。

关键词：女贞子；齐墩果酸；提取工艺Study on Extraction Process of Oleanolic Acid fromLigustrum lucidumAbstract: In this paper, the extraction process of Ligustrum lucidum was optimized. On the basis of single factor test, extraction time, material-liquid ratio, extraction temperature and ethanol concentration were taken as independent variables, and the extraction process was optimized through orthogonal test. The optimum conditions for the final extraction of oleanolic acid in Ligustrum lucidum were obtained when the solid-liquid ratio was 1:8, the extraction time was 30 min, the extraction temperature was 30°C, and the ethanol concentration was 85%. The yield reached 2.58%, and the anthocyanin extraction effect was optimal at this time.Key words: Ligustrum lucidum; Oleanolic acid; Extraction process0 前言中药女女贞子属于木樨科女贞、大叶女贞的成熟之后的经过干燥的果实，主要分布在江浙一带。

齐墩果酸 2019.07.09

理化性质
基本信息中文名称：齐墩果酸中文别名：齐墩果酸水合物；土当归酸；石竹素；土当归酸水合物；英文名称：oleanolic acid 英文别名：oleanoic acid; Olean-12-en-28-oic acid, 3-hydroxy-, CAS号：508-02-1 分子式：C30H48O3 分子量：456.70000 物化性质外观与性状：淡黄色密度：1.1 g/cm3 熔点：>300 ℃(lit.) 沸点：553.5 ℃ at 760 mmHg 闪点：302.6 ℃ 折射率：1.557 稳定性：Stable at normal temperatures and pressures. [2] 储存条件：2-8 ℃ 溶解性：几乎不溶于水，微溶于乙醇和氯仿。
主要提取来源木犀科植物齐墩果olea europaea l.的叶；女贞ligustrum lucidum ait.果实；龙胆科植物青叶胆swertia mileensis t.n.he et w.l.shi全草；川西獐牙菜s. mussotii franch.；伞形科植物大星芹astrantia major l.的叶、根；五加科植物楤木aralia chinensis l.的根皮及茎皮；葫芦科植物大籽雪胆 hemsleya macrosperma c.y.wu、可爱雪胆hemsleya amabilis diels、中华雪胆hemsleya chinensis cogn.（金龟莲、罗锅底) 的块根。
药物原理
6．抑制肝纤维增生：经齐墩果酸治疗的肝纤维化的大鼠，肝纤维增生严重并明显减轻，肝胶原蛋白含量减少，提示具有防治肝硬化的作用。
7．齐墩果酸对小鼠单核吞噬细胞系统、巨噬细胞吞噬功能和实验性关节炎有明显抑制作用，但对异性体液免疫功能和抗原结合细胞有影响。增强免疫和抑制S180瘤株生长。

女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究

女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究女贞子是一种常见的中草药材，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌等多种药理作用。

其中一种重要的有效成分是齐墩果酸。

因此，对女贞子中齐墩果酸的提取工艺进行研究具有重要的理论和实际意义。

本文将从女贞子的选择、提取工艺、齐墩果酸的分离纯化等方面进行综述。

首先，在女贞子的选择方面，应该选择高品质的女贞子作为原料。

优质的女贞子应该有鲜亮的色泽、完整的果实、无虫蛀和霉变的情况。

同时，还要注意女贞子的收获时间，一般认为女贞子的果实成熟度在9月中旬至10月初，此时女贞子中齐墩果酸的含量相对较高。

其次，在提取工艺方面，可以采用水煎提取和超声波辅助提取两种方法。

水煎提取是传统的提取方法，可以通过加水煮沸的方式将女贞子中的齐墩果酸提取出来。

而超声波辅助提取则是通过超声波的作用，加速提取物与溶剂之间的质量传递，提高提取效果。

研究表明，超声波辅助提取的提取效率较高，且对女贞子中齐墩果酸的保护效果较好。

接着，在齐墩果酸的分离纯化方面，可以采用柱层析和高效液相色谱等技术。

柱层析是一种常用的分离方法，可以通过选择不同的吸附剂和溶剂，实现对齐墩果酸的纯化。

高效液相色谱则是一种在小柱中进行快速分离的方法，可以通过选择合适的填料和溶剂体系，实现高纯度的齐墩果酸的得到。

最后，在齐墩果酸的分析方面，可以采用紫外分光光度法和高效液相色谱等技术。

紫外分光光度法是一种简单常用的光谱分析方法，可以通过齐墩果酸的最大吸收波长进行定量分析。

高效液相色谱则是一种高分辨率的色谱分析方法，具有分离效果好、快速高效等优点。

综上所述，女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究具有重要的意义。

通过选择优质的女贞子原料，采用适当的提取工艺和分离纯化技术，可以得到高纯度的齐墩果酸。

同时，齐墩果酸的分析方法也是研究的重要内容。

这些研究成果将有助于女贞子的开发利用和产业化生产。

女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别

女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait．的干燥成熟果实。

甘、苦，凉。

归肝、肾经。

能补肝肾阴，乌须明目。

主治眩晕耳鸣，腰膝酸软，须发早白，目暗不明，视力减退，阴虚发热。

为常用的扶正固本中药。

药理研究表明其提高免疫的主要有效成分为齐墩果酸、熊果酸及乙酰齐墩果酸。

齐墩果酸以游离态和结合成苷的形式同存于女贞子中。

女贞子还含有橄榄苦苷、D-甘露醇、硬脂酸、植物蜡等，其他成分尚有特女贞子苷、女贞苦苷、女贞子酸、芹黄素、甘露醇、葡萄糖、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、槲皮素和β-谷甾醇等。

一、实验目的1．掌握三萜类化合物的提取分离原理和操作方法；2．掌握三萜类化合物的结构和一般性质的关系；3．熟悉三萜类化合物的基本鉴别方法。

二、仪器与试药（一）仪器RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵 HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（500mL） ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）分液漏斗（125mL）（二）试药女贞子乙醇氢氧化钠盐酸氯仿 pH试纸活性炭醋酐浓硫酸苯甲酸乙酯甲酸甲醇甲苯乙酸乙酯冰醋酸三、主要成分的结构与性质表9－1 黄芩中主要成分的物理性质RO COOH COOHO H齐墩果酸 R=H 熊果酸乙酰齐墩果酸 R=COCH 3四、实验原理1．利用齐墩果酸，乙酰齐墩果酸可溶于95%乙醇的性质进行提取；2．在碱性条件下水解乙酰齐墩果酸，然后酸化，用氯仿将萃取出已游离的齐墩果酸；3．用无水乙醇－水对齐墩果酸进行重结晶。

五、实验内容（一）齐墩果酸的提取分离和精制女贞子粗粉100g回流提取1小时，过滤回流提取1小时，过滤加入10%氢氧化钠适量调pH 至10-11，分钟，残渣（弃去）上清液pH2～3，用氯仿萃取3次（30、20、20mL ）回收氯仿至干，用无水乙醇20mL 多次将残留物转溶出来，放在小烧杯中，滴加蒸馏水，产生大量沉淀，过滤，滤渣用热蒸馏水洗3～5次滤液加热溶解后，加活性炭1g回流3～5次在沉淀中加入无水乙醇约20mL水浴加热溶解，再滴加蒸馏水，产生大量沉淀，放冷析晶，过滤，抽干齐墩果酸纯品（二）鉴别实验1．化学检识（1）醋酐-浓硫酸反应：取少量样品，加1mL醋酐溶解，再加5滴浓硫酸，观察颜色变化，可产生黄红紫蓝等颜色变化，最后变为褐色。

齐墩果酸提取分离纯化及含量测定的研究概述

齐墩果酸提取分离纯化及含量测定的研究概述赵强;刘喜纲【摘要】齐墩果酸在自然界广泛分布,具有多种药理作用,常作为一些中药材及其制剂的指标性成分.目前,齐墩果酸提取、分离纯化及含量测定方法众多,本文对近几年的相关文献加以综述,为齐墩果酸的进一步研究提供更多的科学依据.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2017(029)006【总页数】4页(P68-71)【关键词】齐墩果酸;提取;分离纯化;含量测定;研究进展【作者】赵强;刘喜纲【作者单位】河北省中药研究与开发重点实验室,承德医学院中药研究所,承德067000;河北省中药研究与开发重点实验室,承德医学院中药研究所,承德067000【正文语种】中文【中图分类】R92齐墩果酸(oleanolic acid，OA)是一种五环三萜类化合物，以游离酸或与糖基结合的形式存在，广泛分布于约60个科190种植物中[1]。

齐墩果酸无毒，具有抗菌[2]、抗氧化[3]、抗糖尿病[4]、抗动脉粥样硬化[5]和抗肿瘤[6]等多种药理作用，近年研究发现，齐墩果酸还有对抗人类免疫缺陷病毒(HIV)病毒[7]的作用。

根据生物药剂分类系统(BCS, biopharmaceutics clas-sification system)，OA属于Ⅳ类[8]，具有较低的渗透性和溶解性[9]，传统剂型开发有一定困难，因此，市场上常见的除齐墩果酸片外，其余剂型应用较少。

然而，许多中药材如枇杷叶、山楂、连翘、木瓜、女贞子及复方制剂如咽炎颗粒、六味地黄胶囊、枇杷膏中多选择齐墩果酸作为其指标性成分进行相关研究。

合适的提取、分离纯化及含量测定方法不仅为相关成分研究提供重要参考，同时也对新剂型设计具有重要参考价值[10]。

本文拟对近几年文献中相关药材及其新剂型中齐墩果酸的提取分离纯化、含量测定方法等加以概述，为齐墩果酸的进一步研究提供更多的科学依据。

1 提取分离纯化方法研究1.1 提取方法齐墩果酸的提取方法主要有超声波辅助提取法、醇/酯溶剂回流提取法、渗漉法、索氏提取法、冷浸提取法和微波辅助提取法等[11]。

HPLC法测定女贞子中齐墩果酸的含量

HPLC 法测定女贞子中齐墩果酸的含量李梦　(山东日照市药品检验所,山东日照276826)摘要　研究HP LC 法测定女贞子中齐墩果酸的含量。

测定结果发现,齐墩果酸的进样量为0.17～3.50μg ,峰面积与进样量之间线性关系良好,平均回收率为95.4%。

该方法可用于测定女贞子中齐墩果酸的含量,结果准确,重复性好。

关键词　女贞子;齐墩果酸;HP LC;含量测定中图分类号　S567.23+9 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2008)24-10519-01Determination of Oleanolic A cid in F ructus Ligustri Lucidi w ith H P LC M ethod LI M eng (Institute for Drug C ontrol of Rizhao ,Rizhao ,Shand ong 276826)Abstract In this paper ,we developed an RP 2HP LC m eth od for simultaneous determ ination of olean olic acid in Fructus Ligustri Lucidi.T he result sh owed there were g ood linearity between peak area and injection quantity of olean olic acid in the range of 0.17～3.50μg.T he average recovery was 95.4%for olean olic acid.T he m eth od could detect olean olic acid in Fructus Ligustri Lucidi.K ey w ords Fructus Ligustri Lucidi ;Olean olic ;HP LC;Determ ination of content 女贞子收载于《中华人民共和国药典》(2005年版一部),是常用中药材,具有滋肝补肾、明目乌发的功效,临床用于治疗眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白和目暗不明等症。

女贞子中齐墩果酸的提取工艺及测定方法研究进展

女贞子中齐墩果酸的提取工艺及测定方法研究进展女贞子中的齐墩果酸是一种重要的活性成分，具有多种药理作用。

因此，针对齐墩果酸的提取工艺及测定方法进行研究具有重要意义。

本文将对女贞子中齐墩果酸的提取工艺及测定方法的研究进展进行综述。

提取工艺的研究目前，女贞子中齐墩果酸的提取工艺主要有水提法、乙醇提法、超临界萃取法等。

水提法：水提法是一种简单易行且不具有毒性的提取方法，可以有效提取女贞子中的齐墩果酸。

该方法的优点是操作简单易行、成本低廉，但提取效率较低，需要较长的提取时间和温度较高的条件。

在实际应用中，应综合考虑各种方法的优缺点，选择合适的提取工艺提取女贞子中的齐墩果酸。

测定方法的研究目前，女贞子中齐墩果酸的测定方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法等。

高效液相色谱法：高效液相色谱法是当前女贞子中齐墩果酸测定的主要方法之一。

该方法具有灵敏度高、分离度好、操作简便等优点，但存在难以准确测定糖基齐墩果酸的问题。

气相色谱法：气相色谱法是一种较为常用的测定方法，适用于测定齐墩果酸及其甲基酯等。

该方法的测定结果稳定，准确度高，但需要对样品进行脱水处理。

紫外分光光度法：紫外分光光度法也常用于女贞子中齐墩果酸的测定，该方法的优点是操作简单、测定时间短、准确度高，但灵敏度较低。

在实际应用中，应根据样品的性质和需要测定的齐墩果酸类型选择合适的测定方法，并结合相关的预处理方法提高测定的准确度和灵敏度。

总之，女贞子中齐墩果酸的提取工艺及测定方法的研究对提高女贞子的药用价值和开发利用具有重要意义。

随着技术不断进步和完善，相信未来将会出现更高效、更准确、更环保、更经济的提取工艺和测定方法，并推动女贞子的应用和发展。

女贞子中齐墩果酸的提取工艺及其抗氧化活性

女贞子中齐墩果酸的提取工艺及其抗氧化活性中药材女贞子是木樨科女贞、大叶女贞的干燥成熟果实，主要分布在浙江省、江苏省、湖南省等地。

女贞子中含有齐墩果酸、多糖、熊果酸、氨基酸、挥发油等成分，其中重要的生物活性成分齐墩果酸具有护肝肾、抗病毒、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤、降血糖以及镇静等作用，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域[1-5]。

本研究以女贞子为原料，以乙醇溶液为溶剂，采用单因素和正交试验对女贞子中齐墩果酸的提取工艺进行了优化，并研究了齐墩果酸的抗氧化活性。

1材料与方法11材料111原料处理本试验采用来自浙江省温州市经炮制过的女贞子原料。

在60 ℃条件下真空干燥，采用多功能粉碎机粉碎，过20目筛，密封贮藏，备用。

112试剂与仪器齐墩果酸标准品（色谱纯HPLC≥98%，成都艾科达化学试剂有限公司），其余试剂均为市售分析纯。

HK-02A多功能粉碎机（上海烨昌食品机械有限公司）、*****电子天平（赛多利斯）、KH-400KDV数控超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）、UV754N紫外-可见分光光度计（上海精科仪器有限公司）、RE-52旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、HH-1数显恒温水浴锅（金坛市杰瑞尔电器有限公司）、M100 10 ～100 μL移液枪（宁波市群安实验室仪器有限公司）12方法121标准曲线的绘制根据邸金明等对齐墩果酸含量测定方法的研究，本试验选择紫外分光光度法测定齐墩果酸的含量，选定的检测波长为215 nm。

准确称取齐墩果酸标准品0060 0 g至100 mL容量瓶中，用甲醇溶解后定容，摇匀，作为标准品溶液（浓度为060 mg/mL）。

分别移取齐墩果酸标准品溶液050、100、150、200、250 mL至10 mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀。

在215 nm处分别测定其吸光度。

以齐墩果酸标准品浓度（mg/L）对吸光度绘制标准曲线，进行线性回归得标准曲线方程，D215 nm=0005 6C+0021 6，r2=0995。

HPLC法测定女贞子中齐墩果酸的含量

ＤｅｅｍｉａｉｎｏｔｒｎｔｏｆＯｌａｏｃＡｃｄｉＦｕｔｓＬｉｕｔＬｕｉｗｉＨＰｅｎＨｉｎｒｃｕｇｓｎｃ￣ｔｈＬｃＭｅｈｄｔｏ
ＬＭｅｇ（ｎｔｕｏＩｎＩｓｉｔｒＤｕｏｔｌｆｉａ，ｉａ，ｈｎｏｇ２６２）ｔｅｆｇＣｎｒＲｚｏＲｚｏＳａｄｎ７８６ｏｏｈｈ
李梦（东照药检所山日２８）山日市品验，东照７６６２
摘要研究ＨＬＰＣ法测定女贞中齐墩果酸的含量。测定结果发现，子齐墩果酸的进样量为０１ — ．，面积与进样量之间线性关系．３５７０峰良好，平均回收率为量，５４结果准确，重复性好。关键词女贞子；齐墩果酸；ＰＣ含量测定ＨＬ；中图分类号￥６．文献标识码Ａ５７２９３文章编号０１ — ６￣０） —１５ — １５７６ｕ（９２０１０８４９
女贞子购自Ｅ照真诚大药房有限公司健康药店，日市中ｔ经照
医院田兆兴主任中药师鉴定。１２色谱条件．色谱柱：ｅｓＩ（．ｒ５．ｍ，ＢｔｉＣ８４６ｍｎ×１００ｍ５ａｌ柱
ｔｎ；ａ）流动相：乙腈．（５５；水９：）检测波长：１ｍ；２０ｎ灵敏度：．０１００
图１齐墩果酸对照品及女贞子色谱图
№ ．眦１ＩｄｒｎｔｇａｏｏａｏｃａｍｔｌｎＩＩｇｓｒｌ￣ａｏｒｍｆｌｎｌｄｄｅａｏａｄｎＩａｕｔｅｉｒｃｉ

女贞子质量标准及检验操作规程

XXXXXX有限公司原料质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：女贞子1.2 汉语拼音：Nvzhenzi2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。

6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：甲醇、水、甲酸、三氯甲烷、齐墩果酸对照品、乙醇、女贞苷对照品、硫酸。

7.2 仪器与用具：水浴锅、恒温鼓风干燥箱、马福炉、高效液相色谱仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别：取本品粉末0.5g，加三氯甲烷20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(附录7)试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(40 : 1 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5 检查：7.5.1杂质：不得过3.0％（附录12）测定。

7.5.2水分：不得过8.0％（附录15第二法）。

7.5.3总灰分：不得过5.5％（附录17）。

7.5.4二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6浸出物：照醇溶性浸出物测定法（附录19）项下的热浸法测定，用30％乙醇作溶剂，不得少于25.0％。

7.7 含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（40 : 60）为流动相；检测波长为224nm。

理论板数按特女贞苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备取特女贞苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。