红细胞计数
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红细胞计数
正常红细胞为两面微凹的圆盘行,平均直径7.2m
μ,无核,
μ,厚约2m
具有折光性。红细胞主要成分是血红蛋白和水,其余成分为蛋白质、磷脂、
无机盐和酶。红细胞在骨髓内生成。由于红细胞系祖细胞,在红细胞生成
素(ESF)的作用下,分化发育而来,入血后的红细胞寿命为120天左右。
因此,每3~4个月完全更新一次。红细胞不断的衰老死亡,新生红细胞不
断的补充,保持着血液中红细胞数量的动态平衡。红细胞的主要功能,是
通过血红蛋白运输氧气和二氧化碳,以及维持酸碱平衡和免疫粘附作用。
●仪器型号:Sysmex KX-21型多项目自动血球计数仪器
Sysmex XE-2100型多项目自动血球分析装置
●检测原理:
吸液管定量吸取血液试样,按规定的倍率稀释后,送入各检测器容器。
在检测容器中有孔眼状细孔,在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在
稀释试样中的血球通过细孔时,电极之间的直流电阻将发生变化。根据直
流电阻的变化,血球的大小作为脉冲被检测出来,再根据电脉冲的个数可
计算出血球数。另外,可通过求该脉冲的大小,就可按血球的大小描出粒
度分布,且通过解析粒度分布,得到各种解析数据。
●试剂:
一、Sysmex KX-21
⑴稀释液
⑵WBC/HGB用溶血剂
⑶2%EDTA二钾溶液
二、Sysmex XE-2100
⑴CELLPACK(EPK)
⑵2%EDTA二钾溶液
●标本吸入量:
一、Sysmex KX-21:全血模式50lμ
二、Sysmex XE-2100:⑴手工模式130lμ
⑵自动进样器模式200lμ
●静脉血采血方法:
抽取病人静脉血2ml,于EDTA二钾抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K
2
/ML)24小时室温保存。
●操作步骤:
一、Sysmex KX-21
⑴仪器在全血模式(WB)下
⑵要在允许空白值内:
WBC RBC HGB PLT
0.3⨯109/L 0.02⨯1012/L 1g/L 10⨯109/L
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:将待测标本充分混均,然后将吸液管放进待测标本试
管中并按下开始键。蜂鸣器“笛笛”响两声之后,当LCD画面上显示“正
在测量”状态时可将试管取下。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,约1分钟左右测量
结束,被测标本的结果自动显示出来。同时LCD画面自动切换至“准备测
量”状态,此时可进行下一份标本的测量。
二、Sysmex XE-2100
⑴当机器经过电源接通和一系列自检无误后,在机器左上放状态栏显
示“READY”及确认“READY LED”(准备状态灯)呈绿色时,机器进入准备
测量状态。
⑵要在允许空白值内:
WBC RBC HGB PLT
0.3⨯109/L 0.02⨯1012/L 1g/L 10⨯109/L
⑶检测质控数值合格。
⑷标本的测量:
手工模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行
数字键输入标本的编号,按
吸液管放进待测标本试管中并按下开始键。吸液管吸液完毕后听到三声报
警声,将试管移开。
进样器自动模式:在准备测量状态下,按下屏幕最上一行
利用数字键输入标本的编号,按
工作台上。机器开始自动混均、吸引和分析标本。
⑸结果显示:标本被吸入后仪器将进行自动测量,被测标本的结果自
动显示出来。同时屏幕切换至“准备测量”状态,此时可进行下一份标本
的测量。
●检测原理:
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,在显微镜下计数
一定体积内的细胞数,经过换算求得每升血液内的红细胞数。
●试剂:
赫姆氏红细胞稀释液:氯化钠1.0g、结晶硫酸钠5.0g、氯化高汞0.5g、
蒸馏水加至200ml。
●标本吸入量:末梢血模式10lμ
●抗凝管的制备:
取上述EDTA二钾溶液10微升,加入小试管内于70℃以下干燥备用。
●末梢血采集方法:
⑴采血部位必须无冻疮、炎症、水肿、充血及循环障碍。成人以无名
指为宜,半岁以上儿童手指为好,半岁以下婴幼儿通常自拇指或足跟两侧
采血。
⑵轻轻按摩采血部位,使其自然充血,用75%乙醇棉球消毒局部皮肤
待干。
⑶紧控刺血部位,用采血针穿刺取血,动作应迅速,深度约2-3mm,
稍加挤压,以血液能流出为宜。
⑷用干棉球擦去第一滴血,毛细吸管吸血120lμ于抗凝管中混均,6
小时内测定完毕。
⑸采血完毕,用干棉球压住伤口,血止为止。
●操作步骤:
⑴取小试管1支,加红细胞稀释液1.99ml。
⑵用微量吸管准确吸取末梢血10lμ。
⑶擦去管尖外部余血,将吸管插入盛有1.99ml稀释液的试管底部,
轻轻将血放出,并吸取上清液洗吸管3次。
⑷将计数板和盖玻片擦净,用微量吸管迅速吸取已混均的细胞悬液,
充入清洁干燥的计数池与盖玻片之间的缝隙中,静置2-3分钟,待红细胞
下沉。
⑸用低倍镜或高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中五个中方格
内的红细胞数。对于压线的白细胞,应采取数上不数下,数左不数右的原
则,保证计数域的一致性,使计数准确。
●计算:
五个中方格内的红细胞数×5×10×106×200
式中:×5 表示5个中方格内红细胞数折算为1个大方格红细胞数
×10 因一个大格容积为0.1lμ,换算为1lμ
×200 血液稀释倍数
×106将1lμ换算为1L
男:4.0~5.5×1012/L
女:3.5~5.0×1012/L