免疫学实验课件：实验二直接凝集试验
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• 牛、马和骆驼于1：100稀释度，猪、山羊和 犬于1：50稀释度出现“++”以上凝集现象时， 被检血清应判定为阳性反应。牛、马和骆驼于 1：50，猪、养和犬于1：25稀释度出现“++” 以上凝集现象时，应判为可疑反应。
五、结果判定
1.玻板凝集试验的结果……. 2.试管凝集试验的结果…….
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接Baidu Nhomakorabea集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
单位(ml )
3. 结果判定：
4. 判定标准：
• 出现“++”以上的凝集现象的最高血清稀释 度为血清的凝集价
实验二 凝集试验
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清
（3）结果判定：
待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；
五、结果判定
1.玻板凝集试验的结果……. 2.试管凝集试验的结果…….
凝集反应的类型
两大类
玻片法：定性 直接凝集试验
试管法：定量
间接Baidu Nhomakorabea集试验
乳胶凝集试验 碳素凝集试验 间接血凝试验
三、实验材料
1. 玻板凝集试验
（1）玻片、移液枪、牙签等； （2）布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清 （3）待被检血清
2. 试管凝集试验
（1）试管（1 ㎝×8 ㎝ ）、试管架、恒温箱、各规格移液枪等； （2）布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清； （3）待被检血清； （4）灭菌0.5%石碳酸生理盐水。
• 未出现凝集者为阴性反应。
生理盐水
2. 试管凝集试验
（1）取试管八支，按下表加入生理盐水； （2）取布氏杆菌血清进行梯度稀释； （3）加入布氏杆菌检测抗原； （4）充分20.35混匀，置37℃ 温箱24小时。
单位(ml )
3. 结果判定：
4. 判定标准：
• 出现“++”以上的凝集现象的最高血清稀释 度为血清的凝集价
实验二 凝集试验
一、目的要求
理解凝集反应的基本原理； 掌握玻片凝集反应的操作技术与结果
判定； 掌握试管凝集反应的操作技术与结果
判定。
二、凝集反应的原理
通常，细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬 液中相互排斥而呈均匀的分散状态。 凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时， 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物，降低了抗原分子间的 静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层 的电荷，从而聚集成较大的凝集块。
四、操作方法
1. 玻板凝集试验
（1）在洁净玻片上，各加15-20ul布氏杆菌阳性血清、阴性 血清、待检血清与生理盐水。
（2）加入布氏杆菌平板抗原15-20ul，滴在血清附近，不 与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀，轻轻摇动玻板使 液滴呈旋状运动。
阴性血清
（3）结果判定：
待检 阳性 血清 血清
• 出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应；