蟾酥的现代研究

蟾酥的现代研究

主要成分

蟾酥中含有大量的蟾蜍毒素类物质，该类物质均有强心活性，在化学上属甾族化合物（Steroids），其C17上再接一α-吡喃酮基，则凡具有此种骨架的物质，总名蟾蜍二烯内酯（Bufadienolide），是蟾蜍浆液、蟾酥的主要有效成分．蟾酥中所含的蟾蜍二烯内酯有：蟾蜍它灵（Bufotalin）、华蟾蜍精（Cinobufagin）、华蟾蜍它灵（Cinobufotalin）、蟾蜍灵（Bufalin）、远华蟾蜍精（Telocinobufagin）、日本蟾蜍它灵（Gamabufotalin，亦名日本蟾蜍甙元Gamabufo- genin）、去乙酰华蟾蜍它灵（Desacetyl cinobufotalin）、惹斯蟾蜍甙元（Resibufogenin）、华蟾蜍它里定（Cinobufotalidin）、蟾蜍它里宁（Bufotalinin）、华蟾蜍精醇（Cinobufaginol）、沙蟾蜍精（Arenobufagin）、异沙蟾蜍精（Bufarenogin）、去乙酰华蟾蜍精（Desacetyl cinobufagin）、去乙酰蟾蜍它灵（Desacetyl bufotalin）、蟾蜍它里定（Bufotalidin，即嚏根草甙元Hellebrigenin）、惹斯蟾蜍精（Resibufagin）等．中国蟾蜍蟾酥中分出的华蟾蜍毒素（Cinobu- fotoxin），酸解后产生华蟾蜍精、辛二酸（Suberic acid）和精氨酸．辛二酸可与蟾蜍甙元结合．从蟾酥中曾分离华蟾蜍精、惹斯蟾蜍甙元、蟾蜍灵和日本蟾蜍它灵的3-辛二酸酯。

蟾蜍浆液及蟾酥中的甙元，都是有强烈药理作用的甾族化合物，然浆液及蟾酥中尚有不少的无甚药理作用的甾族化合物,如胆甾醇（Cholesterol）、7α-羟基胆甾醇（7α-Hydroxy- cholesterol）、β-谷甾醇（β-Sitosterol）、菜油甾醇（Campesterol）．通常它们亦与蟾蜍甙元合称为蟾蜍甾族化合物（Bufosteroids）．

蟾蜍浆液及蟾酥中尚含有一定药理作用的吲哚系碱类成分，如5-羟色胺（Serotonine）、蟾蜍色胺（Bufotenine）、华蟾蜍色胺（Cinobufotenine）、蟾蜍特尼定（Bufotenidine）、蟾蜍硫堇（Bufothionine）、去氢蟾蜍色胺（Dehydrobufo- tenine）、色胺（Try ptamine）。

此外，蟾蜍还含有肾上腺素（Adrenaline）、γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric acid）、辛二酸．从蟾酥中还分出吗啡（Morphine）。

理化鉴别

（1）该品断面沾水，即呈乳白色隆起。

（2）取该品粉末0.1g，加甲醇5ml ，浸泡1小时，滤过，滤液加对二甲氨基苯甲醛固体少量，滴加硫酸数滴，即显蓝紫色。

（3）取该品粉末0.1g，加氯仿5ml ，浸泡1 小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酐少量使溶解，滴加硫酸，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。

（4）取该品粉末0.2g，加乙醇10ml，加热回流30分钟，滤过，滤液置10ml量瓶中，加乙醇至刻度，作为供试品溶液。另取蟾酥对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。再取脂蟾毒配基及华蟾酥毒基对照品，加乙醇分别制成每1ml 含1mg 的溶液，作为对照品溶液

。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述4 种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷－氯仿－丙酮（4:3:3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个绿色及一个红色斑点。药理作用

1、强心作用

蟾蜍-样本

蟾毒配基类和蟾蜍毒素类化合物均有强心作用，但蟾毒配基类化合物作用更为明显，其化学结构与强心作用有一定的关系。对猫离体心脏乳头肌标本，蟾毒灵及日蟾毒它灵的强心作用的最低有效浓度为10（-8）g/ml；脂蟾毒配基、华蟾毒精的强心作用的最低有效浓度为10（-7）g/ml。华蟾毒与化蟾毒精的作用相似，以适宜浓度灌注蛙心，可使其停止于收缩期，给麻醉猫、狗静脉注射引起心博减慢，收缩振幅变大，心律不整，继而心动过速而死亡；在麻醉狗所得的心电图呈现P-R间期延长、心室率变慢、异性节律、期外收缩、束枝传导阻滞、T波变平或倒置，继而室性心动过速，室性纤维而死亡；认为蟾毒配基对心脏的作用系通过迷走神经中枢或末梢，并可直接作用于心肌，与洋地黄相比，可能因无糖基存在，蟾毒配基与蟾毒的强心作用较弱并缺乏持久性，因此无积蓄作用，亦有报告精氨酸能延长其强心作用。六神丸的强心作用提示，它能加强心肌功能，随着剂量的变化而呈现反向转向的调节效应，对改善局部组织和修复是有益的。实验证明，蟾毒配基及蟾毒的强心作用主要表现在增大心肌收缩力，增加心博出量，减低心率，消除水肿与呼吸道困难。在日本它主要作为呼吸兴奋剂用于临床，而在中国以兴奋呼吸、升压药物用于临床。它增强心肌收缩力的作用不是反射性的，而是直接作用于心肌细胞的结果，多数认为蟾毒配基能加强心肌收缩力是由于蟾毒配基抑制心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶，从而使心肌细胞内的Na+浓度相对增高，钙离子则通过Na+-Ca2+交换而进入心肌细胞、结果使心肌收缩力加大。亦有实验证明，蟾酥能增加人体单核白细胞的环磷腺苷的水平，而由于环磷腺甙的增加，提高心肌磷酸化酶激酶的活性，在磷酸化酶激酶的作用下，使无活性的磷酸化酶b转变成有活性的磷酸化酶a，因此促进糖元分解，促使产生更多的ATP，ATP作为心肌收缩的原动力，使心肌充分发挥作用。

2、对呼吸、血压的作用

蟾蜍灵、华蟾蜍精、惹斯蟾蜍甙元、华蟾蜍它灵及日本蟾蜍它灵静脉注射（0.05毫克/公斤），均可引起麻醉兔的呼吸兴奋和血压上升。呼吸兴奋是中枢性的。惹斯蟾蜍甙元除对兔外

，对猫也能兴奋呼吸，其作用比尼可刹米、戊四氮、洛贝林等还强，并能拮抗吗啡的呼吸抑制。它们升高血压的作用以蟾蜍灵最强，其次为华蟾蜍精、惹斯蟾蜍甙元、华蟾蜍它灵，而以日本蟾蜍它灵最差。惹斯蟾蜍甙元的升压作用主要是末梢性的，但也有中枢性成分。正常人静脉注射蟾蜍它灵0.25～0.5毫克，升高收缩压而不影响舒张压，说明主要由于心脏兴奋。在麻醉狗，还可看到在血压上升时内脏血管收缩，此作用不受肾上腺素阻断剂的影响。蟾蜍色胺与上者不同，它能引起肾上腺素释放，且使动物对肾上腺素更加敏感。蟾蜍特尼定与它相似；但由于其毒性很强，超过5微克/公斤即可引起兔血压下降。在蛙腹直肌、脊髓猫、竖毛肌轴素反射、离体兔肠标本上，均可证明它有烟碱样作用，而且比烟碱本身还强。华蟾蜍色胺能兴奋神经节，故能升高麻醉猫及去脑狗的血压。

3、对Na+、K+ -ATP酶抑制作用

蟾蜍皮肤分泌液对Na+、K+ -ATP酶有强烈的抑制作用，这是由于Na+ K+ -ATP酶位于细胞膜上，Na+在膜内侧与酶结合，促进酶与ATP反应、使酶在膜内侧磷酸化，这时酶产生构象变化，与钠结合的部位转向膜外侧；磷酸化的酶对Na+亲和力降低，而对K+亲和力增高，因而在膜外侧释放Na+，而与K+结合：K+与磷酸化的酶结合后，促进酶的脱磷酸化，因而酶的构象又产生变化，与K+结合的部位转向膜内侧，使K+在膜内侧被释放。这样，在Na+、K+、Mg2+的参与下，Na+被排出，K+被带入细胞，其反应可以表示如下：ATP+酶Na+、Mg2+酶-p+ADP；酶-P+H2O K+、Mg2+ 酶+Pi而蟾蜍皮肤的分泌液对Na+、K+ -ATP酶的作用在于酶的磷酸化中间