第15章色谱分析方法导论优秀课件

3. 按两相状态分
分类
方法
固定相
平衡类型
气 气液色谱
液体吸附于固体 气液间分配
相 气固色谱
固体吸附剂
吸附
色 气相键合色谱 有 机 组 份 键 合 于 液 体和 键合 体
谱
固体表面
表面间的分配
液液色谱
液体吸附于固体 不 相溶 液体 间
的分配
液 固 ( 吸 附 ) 色 固体吸附剂
吸附
液谱
相 液相键合色谱 有 机 组 份 键 合 于 液 体和 键合 体
为分配系数。
K
溶 溶
质 质在 在流 固动 定相 相中 中的 的浓 浓 cc度 度ms
3.K 只与固定相和温度有关，与两相体积、柱管特性和所用仪器无关。
V0 t0Fco
其中，Fco为柱出口的载气流速（mL/min)，其值为：
FcoF0
Tc Tr
•
p0 pw p0
F0-检测器出口流速；Tr-室温；Tc-柱温；p0-大气压；pw-室温时水蒸汽压。
e. 保留体积Vr：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相
的体积。
V0 tr •Fco
f. 调整保留体积
通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。
c. 调整保留时间
t
' r
：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组
份在固定相中的滞留时间。即
t'r tr t0
由于时间为色谱定性依据。但同一组份的保留时间与流速有关，因ห้องสมุดไป่ตู้有时
需用保留体积来表示保留值。
d. 死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙 和检测器间隙的总和。勿略后两项可得到：
色谱分类方法： 1. 按固定相外形分：
柱色谱（填充柱、空心柱）、平板色谱（薄层色谱和纸色谱。 2. 按组份在固定相上的分离机理分：
吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱（尺寸排阻色谱）不同尺寸分子在固定相上的渗透作用。
V
' r
：某组份的保留体积扣除死体积后的体积。
V r' V rV 0t'r•F co
g. 相对保留值r2,1：组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比。
注意：r2,1只与柱r2,1温和tt'r'r21固定VVrr''21相性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动 相流速无关，因此，在色谱分析中，尤其是GC中广泛用于定性的依据！
3）保留值(Retention value, R)
a. 死时间(Dead time, t0) ：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时 的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，
其流速与流动相的流速相近。据 t0 可求出流动相平均流速 u
u
柱长 死时间
L t0
b. 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相
具体做法：固定一个色谱峰为标准s，然后再求其它峰 i 对标准峰的相对保留值
，此时以 表示：
t
' r
(
i
)
t
' s
(
s
)
>1, 又称选择因子(Selectivity factor)。
h. 区域宽度：用于衡量柱效及反映色谱操作条件下的动力学因素。通常有 三种表示方法： 标准偏差：0.607倍峰宽处的一半。 半峰宽W1/2：峰高一半处的峰宽。W1/2=2.354 峰底宽W：色谱峰两侧拐点上切线与基线的交点间的距离。W= 4
第15章色谱分析方法导论
8.1 概述 化学分析方法的基本要求是其选择性要高。即，在分析过程中，待
测物与潜在的干扰物的分离是最为重要的步骤！ 20 世纪中期，大量采用一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和萃取
现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色谱方法 是最为有效的分离手段！其应用涉及每个科学领域。 历史：1903年，俄国植物学家Mikhail Tswett 最先发明。他采用填充有固 体 CaCO3 细 粒 子 的 玻 璃 柱 ， 将 植 物 色 素 的 混 合 物 ( 叶 绿 素 和 叶 黄 素 chlorophylls & xanthophylls) 加 于 柱 顶 端 ， 然 后 以 溶 剂 淋 洗 ， 被 分 离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱 (希腊语中
“chroma”=color; “graphein”=write) 。
50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展；复杂组分分 析发展的要求。
1937-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的！
色谱分离基本原理： 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超临界流体）通过一固定于
柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。样品中各组份在两相中进行不 同程度的作用。与固定相作用强的组份随流动相流出的速度慢，反之，与固定 相作用弱的组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差异，使得混合组 份最终形成各个单组份的“带(band)”或“区(zone)”，对依次流出的各个单组份 物质可分别进行定性、定量分析。
色
固体表面
表面间的分配
谱 离子交换色谱 离子交换树脂
离子交换
凝胶渗透(尺寸 液 体 附 于 多 孔 聚 分配/筛析
排阻)色谱
合物
超临界
有机组份键合于 超临界流体和
流体
固体表面
键合相间分配
8.2 色谱流出曲线（色谱图） 混合组分的分离过程及检测器对各组份在不同阶段的响应
色谱术语： 1）基线：在实验条件下 ，色谱柱后仅有纯流动相 进入检测器时的流出曲线 称为基线，S/N大的、稳定 的基线为水平直线。 2）峰高：色谱峰顶点与 基线的距离。
色谱流出曲线的意义： ✓ 色谱峰数=样品中单组份的最少个数； ✓ 色谱保留值——定性依据； ✓ 色谱峰高或面积——定量依据； ✓ 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； ✓ 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。
8.3 色谱法基本原理 两组份峰间距足够远：由各组份在两相间的分配系数决定，即由色谱过程的
热力学性质决定。 每个组份峰宽足够小：由组份在色谱柱中的传质和扩散决定，即由色谱过程
动力学性质决定。 因此，研究、解释色谱分离行为应从热力学和动力学两方面进行。
一、描述分配过程的参数
1. 分配系数(Distribution constant, K)：
2. 描述组份在固定相和流动相间的分配过程或吸附-脱附过程的参数，称