有关葛根薄层鉴别与提取工艺的实验报告汇总
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实验一葛根药材的真实性鉴定
1.仪器与材料
1.1 仪器
生物显微镜[BA210、Motic]、镊子、载玻片、盖玻片、酒精灯、单(双)面刀片、紫外分析灯(254nm和365nm)[WFH-203B、上海精科实业有限公司]、硅胶HF254板、层析缸、天平[JH202、上海精密科学仪器有限公司]、锥形瓶、超声振荡仪[SB-5200D、宁波新芝生股份有限公司]、量筒、点样毛细管、水浴[XMTE-8112、上海精宏实验设备有限公司]。
1.2 试剂
水合氯醛试液、蒸馏水、稀甘油、甲醇[分析纯AR 批号:20120508 国药集团化学试剂有限公司]、乙酸乙酯[分析纯AR 批号:T20110822 国药集团化学试剂有限公司]、氯仿[分析纯AR 批号:20131227 国药集团化学试剂有限公司]。
1.3 材料
待鉴定天然药物及对应药材粉末各5份。5份未知药材分别为葛根(豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根)、粉葛(混乱品种:豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根)、劣质葛根、未知生药1(伪品)、未知生药2(伪品);葛根制剂愈风宁心片;葛根素对照品、葛根对照药材、粉葛对照药材。
2. 实验方法
2.1 葛根及粉葛的性状鉴定
观察并记录(文字记录及数码采集图像)药材性状特征,鉴定其是否符合2015年版《中华人民共和国药典》相关项下标准。
葛根的性状鉴别:完整的块根呈圆柱形。表面褐色,具纵皱纹,可见皮孔及须根痕。质坚实。饮片呈纵切的长方形厚片或小方块,长5-35cm,厚0.5-1cm。外皮淡棕色,有纵皱纹,粗糙。切面黄白色,纹理不明显。质韧,纤维性强。气微,味微甜。
粉葛的性状鉴定:呈圆柱形,类纺锤形或半圆柱形,长12-15cm,直径4-8cm;有的为纵切或横切的厚片,大小不一。表面黄白色或淡棕色,未去外皮的呈灰棕色。体重,质硬,富粉性,横切面可见由纤维形成的浅棕色同心性环纹,纵切面可见由纤维形成的数条纵纹。气微,味微甜。
2.2 葛根、粉葛和愈风宁心片的显微鉴定
水装片:取少许粉末,置于载玻片中央,滴适量蒸馏水,用针将粉末分散均匀,将盖玻片以45°夹角盖上,用大拇指按压盖玻片,无气泡最佳。用于观察淀粉粒。
水合氯醛装片:取少许粉末,置于载玻片中央,用解剖针将粉末分散均匀,加1-2滴水合氯醛试液,在酒精灯上透化,重复2-3次透化后加半滴甘油。将盖玻片与载玻片以45°夹角盖上,用大拇指按压盖玻片,无气泡最佳。用于观察纤维、导管形态等。
观察并记录(文字记录及数码采集图像)原料药粉末显微特征,鉴定其是否符合2015年版《中华人民共和国药典》相关项下标准,鉴定其制剂愈风宁心片是否符合该药品质量标准。
葛根的显微特征:粉末淡棕色。淀粉粒单粒球形,直径3-37μm,脐点点状,裂缝状或星状;复粒由2-10分粒组成。纤维多成束,壁厚,木化,周围细胞大多含草酸钙方晶,形成晶纤维,含晶细胞壁木化增厚。石细胞少见,类圆形或多角形,直径38-70μm。具缘纹孔导管较大,具缘纹孔六角形或椭圆形,排列极为紧密。
粉葛的显微特征:粉末黄白色。淀粉粒甚多,单粒少见,圆球形,直径8-15μm,脐点隐约可见;复粒多,由2-20分粒组成,纤维多成束,壁厚,木化,周围细胞大多含草酸钙方晶,形成晶纤维,含晶细胞壁木化增厚。石细胞少见,类圆形或多角形,直径25-43μm。具缘纹孔导管较大,具缘纹孔圆形,排列极为紧密。
2.3 葛根、粉葛及其制剂的TLC鉴别
葛根素对照品溶液、天然药物原料药及其制剂供试品溶液的制备:①对照品溶液制备:取葛根素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为蒸干,残渣加甲醇0.5ml使溶解,制成对照药材溶液。②药材供试品溶液制备:天然药物原料药(5个样品)0.1g加甲醇10ml,超声处理20min,将上清液滤出,药液置蒸发皿中水浴上蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。③制剂供试品制
备:取愈风宁心片2片,除去包衣,研细,加醋酸乙酯20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇lmL使溶解,作为供试品溶液。
点样:按照2015年版《中华人民共和国药典》一部薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验,吸取上述8种溶液各10μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,使成条状。
展开:以三氯甲烷-甲醇-水(7:2.5:0.25)为展开剂,展开,取出,晾干。
结果观察:置紫外光灯(365nm和254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应得位置上,显示相同颜色的荧光条斑。记录(数码照相)实验结果。
3.实验结果(A组)
3.1 性状鉴定
观察可得,样品A应为葛根制剂愈风宁心片,青绿色包衣片,除去包衣后显棕褐色;味微苦、甜。
样品B 样品C 样品D 样品E 样品F 外皮颜色淡棕色黄白色淡灰棕色黄白色白色或淡黄
色
形状纵切的大小
不一的小方
块纵切或斜切
的大小不一
的小方块
纵切的大小
不一的小方
块
大小不一的
不规则片状
及条状
大小不一的
小方块
断面有纵皱纹,
粗糙。切面
黄白色,纹
理不明显。横切面可见
由纤维形成
的浅棕色同
心性环纹,
纵切面可见
由纤维形成
的数条纵
纹。
有纵皱纹,
切面淡棕
色,纹理明
显,粗糙。
切面黄白
色,纹理不
明显,有细
小孔隙。
表皮纹细、
纹理不明
显,断面白
色细腻,颗
粒性。
气味气微,味微
甜。气微,味微
甜。
气微,味微
甜。
气微、味微
涩。
气微,味微
酸。