多肉植物玉露的组培快繁技术研究

多肉植物玉露的组培快繁技术研究

作者：王莉

来源：《乡村科技》2017年第24期

[摘要] 为了提高多肉植物玉露的繁殖效率，满足多肉植物玉露产业快速发展的需求，以多肉植物草玉露叶片为试验材料进行组织培养与快速繁殖的研究。结果表明：玉露不定芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽分化率最高（达到95%）；不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽增殖分化率最高（达到380%）；生根诱导效果最佳的培养基是1/2MS+IBA 2 mg/L，生根率最高，达到95%以上。

[关键词] 玉露；组织培养；快速繁殖

[中图分类号] S682.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-7909（2017）24-56-2

植物组织培养也称离体培养，是指将植物体各部分组织，如叶肉组织、胚乳、薄壁组织等进行培养，从而获得再生植株；也指在培养过程中从各组织上得到愈伤组织，愈伤组织经过再分化形成再生的完整植株。

1 材料与方法

1.1 试验材料

草玉露作为原材料，以草玉露幼嫩的叶片为外植体进行诱导分化不定芽试验，以2 cm左右的组培苗进行生根试验。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的取得和灭菌处理。用剪刀剪取草玉露幼嫩的叶片作为外植体，放入烧杯中，再将其放在水龙头下流水冲洗30 min，然后在洗衣粉水中浸泡7～10 min，最后用自来水冲洗干净。在无菌室内的超净工作台上，外植体先用75%酒精进行表面消毒2～5 s，再用无菌水冲洗一两次，然后放入2%次氯酸钠溶液中消毒5～10 min，再用无菌水漂洗两三次，用无菌滤纸吸干表面水分。将灭菌后的叶片切成0.5 cm切段，分别接种于预先灭菌的培养基上。为了减少出现杂菌，要在火焰旁进行接种。

1.2.2 培养基及培养条件。以MS培养基作为基本培养基，外加蔗糖30 g/L、琼脂6 g/L，再根据试验要求加入不同量的植物激素制成试验所需的培养基，调节pH值到5.8。

培养温度为（25±2）℃，恒温，培养光照为2 000 Lx，每天光照时间不少于10 h。丛生芽的快速增殖和生根培养条件与此相同。

1.2.3 诱导分化培养基的筛选。本试验以MS培养基为基本培养基，培养基配方根据两个因素两个水平正交试验进行设计：其中，A因子为6-BA，设1.5、3.0、4.5 mg/L 3个水平，B 因子为NAA，设0.0、0.1、0.2 mg/L 3个水平。将切好的玉露外植体接种到培养基中，每瓶接种4个外植体，每个处理接种10瓶。接种后按照上述培养条件进行培养，30 d后进行统计。根据叶片外植体上再生出的不定芽数量及生长状况，经过比对，得出最适分化培养基配方。

2 结果与分析

2.1 不同激素浓度配比对芽诱导分化的影响

本试验探讨了6-BA与NAA的不同浓度配比对玉露不定芽分化的影响。结果表明（见表1）：当6-BA的浓度不变时，随着NAA浓度的增加，不定芽增殖率大体趋势是增加的；当NAA的浓度不变时，随着6-BA浓度的增加，不定芽增殖率大体趋势是增加的，但也有一定的浓度范围。部分培养基出现了污染的情况，外植体在该培养基上萌芽较快，不定芽分化率最高（达到95%），每个外植体诱导出的单芽数最多为12.2，单芽形态粗壮且正常。经过10 d左右的培养，玉露叶片外植体明显增厚变大，部分切口还出现了绿色的愈伤组织，但也有部分外植体愈伤组织不明显，30 d左右会从外植体边缘分化，形成不定芽。不定芽诱导培养的最佳培养基配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L，pH=5.8。

2.2 不同激素浓度配比对芽增殖的影响

不定芽增殖不同处理的培养结果如表2所示。结果表明：当6-BA的浓度不变时，随着NAA浓度的增加，不定芽增殖率大体趋势是增加的；当NAA的浓度不变时，随着6-BA浓度的增加，不定芽增殖率大体趋势是增加的，但也有一定的浓度范围。培养30 d后，在不定芽的基部可继续分化并形成8～10个单芽，这样每个外植体的不定芽都得到了大量增殖，不定芽增殖培养的最优培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L，

pH=5.8，不定芽在该培养基上增殖分化率最高（达到380%），每个外植体诱导增殖出的不定芽平均数达到11.5个，不定芽的平均长度达到1.1 cm，单芽生长状况最好，不定芽粗壮，部分芽也可长成小苗。

2.3 不同IBA浓度对芽生根的影响

本试验将长至2 cm以上的无根试管苗，转接到生根培养基中。以不加激素的1/2MS培养基为参照，对比添加不同浓度的IBA后，统计不定芽的生根率，得出最优配比。由表3可以得出，在未加激素的1/2MS培养基中，不定芽也会分化出根，但生根率较低，仅为23.3%，每个芽上诱导出的根数很少，平均只有1条，根长平均1.81 cm。加入一定浓度的IBA可以促进于玉露不定芽分化形成根，以1/2MS+IBA 2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L（pH=5.8）的生根培养基效果最佳，此条件下玉露每个芽上诱导出的平均根数为4条，根长平均3.64 cm，试管苗的生根率高，达到95%以上。

3 结论

本研究结果表明：草玉露不定芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L，不定芽分化率最高，达到95%；不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0

mg/L+IBA 0.1 mg/L，不定芽增殖分化率最高，达到380%；试管苗的生根培养试验，生根效果最佳的培养基是1/2MS+2 mg/L IBA，生根率最高，达到95%以上。