植物无糖组培快繁技术
植物无糖培养快繁技术及其优点
传基因相同、生理一致、生长发育正常、无病无毒的 群体植株。 2. 要求植株有高的光合能力或光独立生长能力（能利用 空气中的CO2作主要的碳源）。
二、植物无糖培养快繁技术的优点
（一）缩短培养周期 通过人工控制，动态调整优化植物生长环境，为种苗繁殖
改一变、了 植碳物源无的糖供培给养途快径繁小，技即术植改变株培养表基成现分，为培养生基中长不再速含有度糖；慢、徒长、发育差、生理形态
以大豆、海棠、核桃、生姜、甘薯、香蕉等20多种植物为材料的植物无糖培养试验表明，无糖组培苗的移栽成活率可提高10%以上，培
异常、个体差异大、变异性增加、成活率降低。 养周期缩短了25%以上，生产成本降低了35%以上。
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因而可使植株长势良好，生物量较有糖培养的显著增加，污染率明显降低。 一是植物体靠光合作用进行自然生长（自养） 无糖组培工艺的简单化，流程缩短，技术和设备的集成度提高，降低了操作技术难度和劳动作业强度，更易于在工厂化生产上推广应 用。 植物无糖培养快繁技术，又称为光自养微繁殖技术，是指在植物组织培养中以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过控制影响组培苗生长 发育的环境因子，促进植株光合作用，以更接近植物自然生长状态、成本相对较低的方式生产优质种苗的一种植物组织培养技术。 海棠无糖培养与常规培养的试验对照 二、植物无糖培养快繁技术的优点
主要内容
一 植物无糖培养快繁技术 二 植物无糖培养快繁技术的优点
一、植物无糖培养快繁技术
（一）提出
植物无糖培养快繁技 术是由 设施园艺与环 境控制专家古在丰树 教授在20世纪80年代 末提出的，是一种全 新的植物组织培养技 术。
植物组培高效快繁技术
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 技术简介
• 植物非试管高效快繁技术(TERNPC)用许多植物类似 组培试管茎段、茎尖培养的 3毫米~1厘米长的微型 繁殖材料单位（包括一叶一芽），直接接种在辅助 有简易条件的大田沙床上，使大多数经济植物离体 材料在第二代后4-11天获得再生完整植株，并且成 活率高达85%至100%。每15-60天繁殖一代，可按 几何级数高效快繁。繁殖系数达到2-15以上，比许 多植物在试管内快繁系数还高。在完全离开植物组 织培养各种复杂设备条件下，实现了多种植物在试 管条件下才可能达到的高效快繁。植物非试管高效 快繁技术(TERNPC)经过在全国各地各种气候带、各 种土壤连续二十二年的研发、生产、推广，已形成 一个完整的技术体系，是一项十分成熟的技术。
背景
• 近40年来，真正面对大多数生产上急需、量大、价 格低廉的无性繁殖(vegetative propagation)种苗， 由于植物组培(tissue culture)存在一次性投资大， 成本高，技术步骤繁杂，技术易传性差，农民在生 产上不能直接利用，植物试管克隆苗成活率低，推 广难度大等缺点，该试管克隆技术在实际快繁苗木 生产中所形成的生产力还相当有限，真正形成大规 模产业化的植物品种在世界范围内不超过上百个。 至今实验室成果很多，绝大部分快繁品种的生产技 术还主要掌握在科学家手中，真正实现产业化目标 的项目寥寥无几。
取材后，要尽量在最快时间内进入下一步——育 苗材料的处理
植物非试管快速繁殖的流程
（三）育苗材料的化学处理和物理处理
在20千克水中充分溶解1克JH-1和25克多菌灵（最好逐级稀 释）。 将插穗倒入上述溶液中浸泡30-60分钟（一般常绿植物60分 钟，落叶植物30分钟）。
将材料插入沙床。根据材料的叶片大小，一般每平方米可插入 1000-1500株甚至更多，以叶片不相互重叠为宜。插入只是起到固 定作用，不必插入太深，许多植物即使不插入也能生根。
植物无糖组织培养
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植物无糖组织培养的技术特点
5、 闭锁型培养室
采用闭锁型的培养室，通过人工或自动调控 采用闭锁型的培养室，通过人工或自动调控 整个培养室环境，能周年进行稳定的生态调整优化植物生长环境， 、通过人工控制动态调整优化植物生长环境， 为种苗繁殖生长提供最佳的CO 为种苗繁殖生长提供最佳的CO2浓度、光照、 湿度、温度等环境条件，提高植株的光合 速率，促进了植株的生长发育，苗齐、苗 壮。 2、 继代与生根培养过程合二为一，培养周期 缩短了40%以上。 缩短了40%以上。 3、大幅度减少了植物微繁殖生产过程中的微 、大幅度减少了植物微繁殖生产过程中的微 生物污染率。 生物污染率。
植物无糖组织培养
主要内容
一、植物无糖组织培养的基本概念 二、植物无糖组织培养的技术特点 三、植物无糖组织培养的优势 四、植物无糖组织培养的限制因素 五、植物无糖组织培养的应用前景
植物无糖组织培养的基本概念
植物无糖组织培养技术：指在植物组织培养 植物无糖组织培养技术：指在植物组织培养 中通过输入CO 气体作为碳源，并控制影响 中通过输入CO2气体作为碳源，并控制影响 试管苗生长发育的环境因子，促进植株光 合作用，使试管苗由兼养型转变为自养型， 合作用，使试管苗由兼养型转变为自养型， 进而生产优质种苗的一种新的植物微繁殖 技术。
植物无糖组织培养的技术特点
1、CO2代替了糖作为植物体的碳源 作为小植株的唯一碳源，通过自然或 以CO2作为小植株的唯一碳源，通过自然或 强制性换气系统供给小植株生长所需CO 强制性换气系统供给小植株生长所需CO2， 促进植物的光合作用进行自养生长。
植物无糖组织培养的技术特点
2、环境控制促进植株的光合速率 在对培养容器内环境控制的基础上，根据容 在对培养容器内环境控制的基础上，根据容 器中植株生长所需的最佳环境条件来对植 器中植株生长所需的最佳环境条件来对植 株生长的微环境进行控制，最大限度地提 株生长的微环境进行控制，最大限度地提 高小植株的光合速率，促进植株的生长。 小植株的光合速率，促进植株的生长。
植物无糖组培快繁技术
植物无糖组培快繁技术植物无糖组培快繁技术降低组培成本的技术措施植物无糖组培快繁技术（Sugar-free micropropagation）又称为光自养微繁殖技术（Photoautotrophic micropropagation）是指在植物组织培养中改变碳源的种类，以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过输入CO2气体作为碳源，并控制影响试管苗生长发育的环境因子，促进植株光合作用，使试管苗由兼养型转变为自养型，进而生产优质种苗的一种新的植物微繁殖技术。
这一技术概念是在1980年提出的，其技术发明人是日本千叶大学的古在丰树教授。
20世纪90年代以后，这一技术成为植物微繁殖研究的新领域，受到广泛的关注，无糖组织培养技术也在各国开始得到推广应用。
特别是近几年来，从事这一技术领域研究的科技人员越来越多，这一技术也逐渐成熟，并开始应用于植物微繁殖工厂化生产。
1 植物无糖组培快繁的技术特点1.1 CO2代替了糖作为植物体的碳源在一般的有糖培养微繁殖中，小植物是以糖（如蔗糖、白砂糖、果糖等）作为主要碳源进行异养或兼养生长，糖被看作是植物组织培养中必不可少的物质添加到培养基中。
而无糖培养微繁殖是以CO2作为小植株的唯一碳源，通过自然或强制性换气系统供给小植株生长所需CO2，促进植物的光合作用进行自养生长。
1.2 环境控制促进植株的光合速率在传统的组织培养中，很少对植株生长的微环境进行研究，研究的重点是放在培养基的配方以及激素的用量和有机物质的添加上；而无糖组织培养技术是建立在对培养容器内环境控制的基础上，根据容器中植株生长所需的最佳环境条件（如光照强度、CO2浓度、环境湿度、温度、培养基质等）来对植株生长的微环境进行控制，最大限度地提高小植株的光合速率，促进植株的生长。
1.3 使用多功能大型培养容器在传统的组织培养中，由于培养基中糖的存在，为了防止污染，一般使用或者说只能使用小的培养容器。
而无糖培养在培养过程中不使用糖及各类有机物质，极大地避免了污染的发生，可以使用各种类型的培养容器，小至试管，大至培养室。
植物组培快繁技术流程
植物组培快繁技术流程
1.组织选择
选择健康、无病虫害的植物材料作为组织培养的起始材料。
根据不同的植物种类和培养目标，选择适当的组织或器官，如叶片、茎段、花蕾、愈伤组织等。
2.消毒处理
将选取的组织或器官进行清洗，去除表面的尘土和污物。
然后将组织放入含有消毒剂的容器中进行表面消毒，消毒剂可以使用70%酒精或0.1%升汞等。
消毒完成后，用无菌水冲洗干净。
3.培养基制备
根据不同的植物种类和培养阶段，选择适当的培养基配方。
培养基是组织培养中提供营养和生长调节物质的介质。
制备好的培养基应进行灭菌处理，以保证无菌条件。
4.组织接种
将消毒处理后的组织放入已准备好的培养基中，确保组织与培养基充分接触。
接种过程中要保持无菌操作，防止污染。
5.培养条件控制
控制好组织培养的条件，包括温度、光照、湿度等。
不同植物和不同的培养阶段对光照、温度等条件的要求不同，需根据实际情况进行调整。
6.继代培养
在适宜的培养条件下，组织开始生长，经过一段时间的培养后，需要进行继代培养，即将已经生长的组织进行分离、切割或分株，重新接种到新的培养基上，以维持组织的生长。
7.壮苗培养
为了提高移栽成活率，在移栽前需要进行壮苗培养。
根据需要调整培养条件，
促进幼苗的生长和发育。
8.移栽
当幼苗长到一定大小时，可以进行移栽。
移栽前需要对幼苗进行适当的炼苗处理，以提高其适应能力。
然后将幼苗从培养基中取出，移植到适宜的栽培环境中。
无糖组培技术的应用及发展前景_屈云慧
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专题论述
中国种业
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上； 培养 ! " #$% 开始通入气流量为 #& ’ ()* 的 +,- 混合 气体， 相对湿度 /01 +,- 浓度保持在 #$$$ " #-$$(. ’ &， 培养 ## " #0%， 光照条件 3$$$ " 0$$$ &4 5 3 只日 " 201 ； 气流量为 7& ’ ()*， 光灯 6 ， +,- 浓度可在 #$$$ " #-$$(. ’ & 保持不变，相对湿度在 /01 " 2$1 ；出苗前期在其它 条件不变的情况下， 空气流量可调至 7 " 0& ’ ()*。在整 个培养期间培养室温度保持 -$8 9 -8 。 无糖培养的组培生根苗质量显著优于常规组培生 根苗。植株生长速度快， 生长发育均匀， 根系良好， 在 工厂化组培种苗的生产中可以减化或省略驯化过程， 易于大田种植的驯化。 #$ % 自动调控专用设施的研发 在无糖培养技术中 为改善组培苗的质量，培养环境的调控是很重要的。 目前在使用箱式容器的无糖培养室内，温度由空调及 其控制器调节；光照强度取决于打开的日光灯只数 （ ；影响植株生长的湿度因子，受箱体 # " 3 只内选择） 内部的相对湿度影响，调控措施主要是增减强制性通 气的次数；人为补加的 +,- 气体通过强制性通气系统 进入箱式容器内，其浓度由限制钢瓶 +,- 气体流速及 各层的流量计来调控。在无糖培养模式中，为了确保 湿度、 温度、 植株的健壮生长， 进行培养箱内 +,- 浓度、 光照强度的自动监测及综合调控，是确保植株的健壮 生长的关键。由于各类组培种苗所需的培养条件有差 异，培养容器内环境因子对培养植物的生长及形态影 响方面还有很多问题没有弄清楚，自动调控的无糖培 养专用设施也正在研发。
植物无糖组培快繁技术
植物无糖组培快繁技术降低组培成本的技术措施植物无糖组培快繁技术（Sugar-free micropropagation）又称为光自养微繁殖技术（Photoautotrophic micropropagation）是指在植物组织培养中改变碳源的种类，以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过输入CO2气体作为碳源，并控制影响试管苗生长发育的环境因子，促进植株光合作用，使试管苗由兼养型转变为自养型，进而生产优质种苗的一种新的植物微繁殖技术。
这一技术概念是在1980年提出的，其技术发明人是日本千叶大学的古在丰树教授。
20世纪90年代以后，这一技术成为植物微繁殖研究的新领域，受到广泛的关注，无糖组织培养技术也在各国开始得到推广应用。
特别是近几年来，从事这一技术领域研究的科技人员越来越多，这一技术也逐渐成熟，并开始应用于植物微繁殖工厂化生产。
1 植物无糖组培快繁的技术特点1.1 CO2代替了糖作为植物体的碳源在一般的有糖培养微繁殖中，小植物是以糖（如蔗糖、白砂糖、果糖等）作为主要碳源进行异养或兼养生长，糖被看作是植物组织培养中必不可少的物质添加到培养基中。
而无糖培养微繁殖是以CO2作为小植株的唯一碳源，通过自然或强制性换气系统供给小植株生长所需CO2，促进植物的光合作用进行自养生长。
1.2 环境控制促进植株的光合速率在传统的组织培养中，很少对植株生长的微环境进行研究，研究的重点是放在培养基的配方以及激素的用量和有机物质的添加上；而无糖组织培养技术是建立在对培养容器内环境控制的基础上，根据容器中植株生长所需的最佳环境条件（如光照强度、CO2浓度、环境湿度、温度、培养基质等）来对植株生长的微环境进行控制，最大限度地提高小植株的光合速率，促进植株的生长。
1.3 使用多功能大型培养容器在传统的组织培养中，由于培养基中糖的存在，为了防止污染，一般使用或者说只能使用小的培养容器。
而无糖培养在培养过程中不使用糖及各类有机物质，极大地避免了污染的发生，可以使用各种类型的培养容器，小至试管，大至培养室。
花椰菜雄性不育系组培快繁及无糖培养技术
花椰菜雄性不育系组培快繁及无糖培养技术
吴丽芳;蒋亚莲;张艺萍;崔光芬
【期刊名称】《北方园艺》
【年(卷),期】2009(000)006
【摘要】以花椰菜雄性不育亲本的花球为外植体,进行组培快快繁及无糖生产技术的研究.结果表明:在MS+BA1.0 mg/L+NAA0.3 mg/L的培养基上诱导,25 d时不定芽的分化率达到96%,继代增殖在MS+BA0.6 mg/L+NAA0.1 mg/L的培养基效果最好,增殖率可达4.25倍.无糖组织培养的培养基为MS无机成分+ NAA0.1,光照4 000 lx,CO2 浓度1 000 mL/L,11 d可大量生根.通过上述方法,1个花球,在4个月可生产上万株组培苗,是一种高效快速的方法.
【总页数】2页(P57-58)
【作者】吴丽芳;蒋亚莲;张艺萍;崔光芬
【作者单位】云南省农业科学院,花卉研究所,云南,昆明,650205;云南省农业科学院,花卉研究所,云南,昆明,650205;云南省农业科学院,花卉研究所,云南,昆明,650205;云南省农业科学院,花卉研究所,云南,昆明,650205
【正文语种】中文
【中图分类】S635.303.6
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1.花椰菜自交不亲和系组培快繁技术研究 [J], 许端祥;方淑桂;陈文辉
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3.花椰菜细胞质雄性不育系及保持系中特异序列的克隆、分析 [J], 王春国;陈小强;李慧;赵前程;孙德岭;宋文芹
4.甘蓝雄性不育系组培快繁技术研究 [J], 许端祥;方淑桂;陈文辉
5.花椰菜雄性不育系种苗的组培快繁技术研究 [J], 许传怀;郭春晓;曲光炯;赵书梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
植物组培新技术无糖培养法
植物组培新技术无糖培养法
柴卫淑;谭学林;屈云慧
【期刊名称】《云南农业科技》
【年(卷),期】2003(000)006
【摘要】介绍了近年来日本学者开发的无糖培养法(光独立培养法),即在快繁阶段去掉培养基中的糖,人工输入CO2,并对组培环境条件加以调控.简要介绍了该培养法的大型培养容器及机械化系统.容器内环境因子对培养植物的生长及形态影响,有待进一步研究.
【总页数】2页(P7-8)
【作者】柴卫淑;谭学林;屈云慧
【作者单位】云南农业大学稻作所,云南,昆明,650201;云南农业大学稻作所,云南,昆明,650201;云南省农业科学院园艺所花卉研究中心,云南,昆明,650205
【正文语种】中文
【中图分类】S336
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1.植物无糖组培快繁技术的应用 [J], 侯典云;王聪睿;胥华伟;马占强;郑跃进;孔祥生
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5.观赏植物无糖组培苗炼苗技术的可行性分析 [J], 孟维娜;岳东杰;程艳荣;杨帅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
植物无糖组培快繁技术
探索无糖组培快繁技术在更多植物种类和应用领域中的潜 力，如濒危植物保护、种质资源保存、药用植物繁育等， 促进其在实践中的广泛应用。
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快速扩繁
无糖组培技术可以在短时 间内扩繁出大量的优质果 树和林木苗木，提高造林 和栽培的效率。
农作物脱毒苗的繁育与应用
脱毒苗生产
利用无糖组培技术，可以生产出 无病毒、无病原菌的农作物脱毒 苗，提高农作物的产量和品质。
病虫害防治
农作物脱毒苗具有较强的抗病抗 虫能力，可以有效减少农药的使 用量和频率，降低对环境的负面
技术原理与基本流程
基本流程 1. 选择适宜的外植体（如种子、幼苗、叶片等），进行消毒处理。
2. 将外植体接种到无糖培养基上，添加适量的激素和营养物质。
技术原理与基本流程
3. 在恒温、光照充足的培养室 内进行培养，定期观察并记录生
长情况。
4. 当植株生长至一定大小时， 进行炼苗处理，提高其适应外部
不受范围
技术优点与应用范围
农业生产
用于繁殖优良作物品种，提高农业生产效率 。
医药产业
用于繁殖药用植物，提取药物成分。
园林绿化
繁殖花卉、树木等观赏植物，丰富城市绿化 。
科研实验
用于植物生理、生化、遗传等方面的研究。
技术原理与基本流程
• 技术原理：植物无糖组培快繁技术基于植物细胞的全能性，即 植物细胞具有发育成完整植株的潜能。通过提供适宜的培养条 件和激素配比，可以诱导植物细胞或组织进行分裂、生长和分 化，最终形成完整的植株。
保持品种特性
无糖组培技术可以确保观赏植物幼 苗保持原品种的优良特性，提高观 赏价值。
果树与林木的优质苗木繁育
植物的无糖组培技术
1 2
细胞分化的概念
细胞分化是指在个体发育中，相同类型的细胞逐 渐产生在形态、结构和功能上稳定性差异的过程 。
细胞脱分化的概念
细胞脱分化是指分化成熟的细胞回复到未分化状 态的过程。
3
植物细胞分化与脱分化的调控
植物细胞分化与脱分化受到多种因素的影响，包 括植物激素、营养物质、外界环境等。
植物激素的作用
生长素的作用
生长素是促进植物生长的主要激素 之一，它能够刺激细胞的伸长生长
，促进根、茎和叶的发育。
细胞分裂素的作用
细胞分裂素能够促进细胞分裂和组 织分化，在根尖、芽尖和胚轴等部
位含量较高。
赤霉素的作用
赤霉素能够促进细胞的伸长生长和 细胞的分裂，还能够打破种子和芽 的休眠，促进萌发。
脱落酸的作用
脱落酸能够抑制植物的生长，促进 叶和果实的衰老和脱落。
随着技术的不断发展，科学家们逐渐发现 ，通过在培养基中添加适当的营养物质， 可以成功地诱导植物组织或细胞在体外生 长和发育。
经过几十年的研究和改进，无糖组培技术 已经变得相对成熟，并被广泛应用于植物 的快速繁殖、种质资源保存、作物改良等 方面。
应用领域与优势
• 应用领域：无糖组培技术广泛应用于植物的快速繁殖 、种质资源保存、作物改良等方面。例如，通过该技 术可以快速繁殖珍稀植物，拯救濒危物种；也可以在 短时间内获得大量的优质植物材料，为农业生产提供 支持。
作物新品种培育
高效育种
无糖组培技术可用于高效育种，通过对外植体进行诱导分化，筛 选优良变异株系，培育出具有优良性状的新品种。
缩短育种周期
相较于传统的育种方法，无糖组培技术可以大大缩短育种周期，提 高育种效率。
提高育种准确性
植物无糖组培快繁装置及其环境控制系统的研制_杨其长
图 3 分布式无糖组培环境控制系统 F ig. 3 D istributed contro l system.
表 1 环境控制系统传感器参数 T able 1 T he sensor param e ter o f the env ironm en tal contro l sy stem.
环境因子 t factors
的污染; 同时, 通过调控培养 容器内的 光强度、 CO2浓度以及 气流速度等来提高组培苗的光合速 率, 促进植株的生长发育和快速繁殖。与传统组 织培养方式相比, 植物无糖组织培养技术可显著 提高组培苗生长速度、增强品质、缩短培养时间 和降低运行成本。
多年来, 国 际上以日本 Koza i为代表的一批 学者一直致力于无糖组培容器的改进研究, 相继 开发出了体积不等、带有强制性通风设施的培养
图 1 培养容器结构简图 F ig. 1 T he ske tch of the cu ltura l vesse.l
a. 箱体结构; b. CO 2施放管 a. cu ltu ral vessel st ru cture; b. CO 2 d isch arge tube.
在大型培养容器的设计过程中, CO2的均匀 施放是系统设计的关键, 目前常规方法是通过输 气管直接将 CO2输入到箱体内, 输气管的排气口 通常设置在培养容器壁的边缘, 通过气体的自由 扩散来实现 CO 2的施放。由于 CO 2的分子量大于 空气分子量的平均值, 容易造成气体混合不均匀, 使不同位置产生 CO2的梯度差异。在此环境下进行 植物无糖培养, 易造成组培苗生长不一致。所以开 发更加有效的 CO2施放管 ( 图 1. b) 成为提高无 糖组培苗质量的重要内容。带孔施放装置的设计可
4期
杨其长等: 植物无糖组培快繁装置及其环境控制系统的研制
植物无糖组培快繁技术
光照、温度等环境因素对快繁效果的影响及解决方案
光照、温度等环境因素对植物无糖组培快繁效果的影响
光照强度、光照周期、温度等环境因素对植物无糖组培快繁效果具有重要影响。
解决方案
针对不同植物种类和生长阶段，调整光照强度、光照周期、温度等环境因素，以获得最 佳的快繁效果。
病虫害防治及生物安全性问题解决方案
植物材料的保存与运
保存
将植物材料放置在适宜的温度、湿度 和光照条件下保存，定期检查其生长 状况。
运输
在运输过程中，要保证植物材料的包 装完整、防止污染和失水，确保其生 命活动正常。
04
无糖组培快繁技术的操作流程
接种前的准备与消毒工作
01
02
03
设备与器材准备
准备好接种用的培养皿、 培养基、接种工具、酒精 灯等。
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将配制好的培养基分装到组培瓶 或其他容器中，以备接种使用。
培养基的优化策略与实例
根据植物种类和生长阶段调整激素比例和种类。
输标02入题
根据培养条件和目的添加其他添加物，如活性炭、抗 生素等。
01
03
实例：以某种植物为例，通过实验比较了不同激素配 比和种类对植物生长和繁殖的影响，最终确定了最佳
的激素配方和添加物种类与浓度。
消毒工作
对接种环境进行消毒，包 括空气、台面、手等，确 保无菌操作。
培养基制备
根据植物种类和生长需求 ，制备适合的培养基。
接种操作的方法与技巧
灭菌操作
用酒精棉对手部进行消 毒，再使用紫外灯对接
种环境进行灭菌。
切割与消毒
用消毒过的刀片将植物 材料切割成适合的大小 ，再放入消毒液中浸泡
消毒。
植物组织培养技术：3-任务三 植物组培快繁技术
已离体培养植株 （试管苗）
❖ 多数情况下，应尽量使用温室或人工气候室控制 培养的植物材料作为外植体来源，减少培养过程 中的微生物感染概率。同时，生长在控制条件下 的植物可以保持培养料间的一致性，提高实验的 可重复性，也便于培养技术的规范。
❖ 某些多年生植物或特殊材料，必须取自自然生长 的植物，就需要尽可能避免使用那些生长过于潮 湿和不洁净环境中的植物。对于培养过程中可能 出现内生菌污染的材料，应尽量取生长旺盛期的 生长点部位作为起始培养的材料。
任务四、植物脱毒技术
植物病毒对园艺植物的危害；脱毒技术； 脱毒苗鉴定；脱毒苗的保存和繁殖。
任务五、常见园艺植物的脱 毒与快速繁殖
马铃薯、苹果、草莓、兰花的脱毒快繁。
主要内容
1. 外植体选择与处理 2. 外植体培养 3. 试管苗驯化移栽 4. 快繁过程中出现的问题及解决办法
回顾知识点： ❖ 什么是外植体？
因此，外植体的采集尽量选用植物体最幼态的组织。
2、材料取材
(4)外植体的大小： 外植体越大，污染率越高，但也不能过小，越小成活率越 低。在通常情况下，叶片、花瓣等的面积约为5mm²，茎段 为0.5cm²，除非是用于去除病毒，否则不宜将外植体切得
过小。
一、外植体选择与处理
（二）外植体处理
1、外植体预处理 首先，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干 净，如用刷子刷洗。 把材料切割成适当大小，以能放入灭菌容器为宜。 置于自来水下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁轻度 为宜。细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。洗时可加入洗衣粉清洗， 然后用自来水清洗洗衣粉水。目的是去除轻度附着在植物表面的污 物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。最理想的清洗物 质是表面活性物质——吐温。
植物的无糖组培技术
外植体的选择
部位
外植体的选择对于无糖组培的成功至关重要。不同部位的外 植体在遗传特性、生理状态、细胞分化程度等方面存在差异 ，影响无糖组培的效果。
生理状态
外植体的生理状态也会影响无糖诱导分化，而处于休眠状态的外植体 则难以诱导分化。
花卉无糖组培技术已成功应用于多种花卉的快速繁殖和种质保存，如玫瑰、百合 、菊花等。
果树无糖组培技术
果树无糖组培技术是一种高效、环保的果树繁殖方法，可实 现种苗的快速繁殖和脱毒。
该技术已广泛应用于苹果、梨、葡萄等常见果树，以及猕猴 桃、火龙果等特色果树。
药用植物无糖组培技术
药用植物无糖组培技术可实现药用植物的快速繁殖和种质 保存，提高药材质量和产量。
无糖组培技术的应用范围
无糖组培技术主要应用于以下方面
01
02
花卉、蔬菜、水果等园艺作物的快速繁殖。
植物种质资源的离体保存，提高保存效率。
03
04
作物脱毒，提高产量和品质。
人工种子制作，加速新品种的推广。
05
06
生物反应器生产，生产次生代谢产物。
02
无糖组培的基本流程
培养基的制备
1 2
确定培养基配方
大量元素
培养基中的大量元素如氮、磷、钾、硫等对于植物细胞生长和分裂至关重要。这些元素可 以提供植物所需的基本养分，同时维持细胞内外的渗透压，使植物细胞保持正常状态。
微量元素
培养基中的微量元素如铁、锰、锌、铜等对植物的代谢过程具有重要作用。它们参与了植 物体内多种酶的催化反应，促进植物的生长发育。
有机成分
根尖等。
无糖组织培养在甘蔗快繁中的应用
无糖组织培养在甘蔗快繁中的应用淡明;李松;卢曼曼;余坤兴;刘红坚;刘丽敏;刘俊仙【摘要】[目的]研究植物无糖组织培养技术在甘蔗快繁中的应用.[方法]选用透明硬质塑料盒为培养容器,以珍珠岩和蛭石为基质,进行甘蔗无糖组织培养.在普通培养条件及高CO2浓度条件下探讨新型培养容器和基质及CO2浓度对甘蔗快繁的影响.[结果]无糖培养的甘蔗植株株高比常规培养的植株高1.03 cm,差异不显著;无糖培养的植株鲜重比常规培养的重0.73 g,差异显著;无糖培养的甘蔗生根数和根长分别为3.60根和1.08 cm,与常规培养的差异显著.[结论]用无糖培养方式培养的甘蔗组培苗在株高、鲜重、根数和根长等生长指标上优于传统培养方式.%[Objective]To study the application of sugar-free tissue culture on sugarcane rapid propagation.[Method]The sugar free tissue cul-ture of sugarcane was made by using transparent hard plastic box as a culture vessel, with perlite and vermiculite as the matrix.The effect of the new cultivable vessel and substrate and CO2 concentration on sugarcane was discussed under the conditions of normal culture and high CO 2 concentration.[Result]The plant height of sugar-free culture sugarcane plant was 1.03 cm higher than the normal culture, and the difference was not significant.The plant fresh weight of sugar-free culture was 0.73 g heavier than conventional culture, and the difference was signifi-cant.The root number and root length of sugar-free culture were 3.60 roots and 1.08 cm respectively, which were significantly different from conventional culture.[Conclusion]Compared with traditional training way, sugar-freeculture of sugarcane was superior to the traditional cul-ture in plant height, fresh weight, root number and root length.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2017(045)029【总页数】2页(P29-30)【关键词】无糖培养;甘蔗;快繁;CO2【作者】淡明;李松;卢曼曼;余坤兴;刘红坚;刘丽敏;刘俊仙【作者单位】广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007;广西农业科学院甘蔗研究所,广西南宁530007【正文语种】中文【中图分类】S566.1植物无糖培养快繁技术是在培养基不加糖的基础上，采用环境控制手段，通过对CO2浓度、光照、温度、湿度等环境因子的调节，使组培苗加强自身的光合作用，由异养型转变为自养型，从而有效降低生产成本，达到快速繁殖优质种苗的目的[1-3]。
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植物无糖组培快繁技术
一、无糖组培技术原理
无糖组培快繁技术是由日本千叶大学的古在丰树教授上世纪八十年代末发明。
它是一种全新的植物组织培养技术，是环境控制技术和组织培养技术的有机结合。
它以CO2代替糖作为植物体的碳源，利用工程技术手段调节组培微环境的空气、光照、温度、湿度等影响因子，促进植物光合作用，使组培植物由兼养型转变为自养型，从而促进植物的生长发育。
经大量实验研究证明，该项研究成果已成为世界领先技术。
目前，中国、美国、英国、韩国等国家已将该项技术应用于种苗工业化生产中。
该技术于1997年由国家外国专家局和昆明市科技局委托昆明市环境科学研究所从日本引进。
二、无糖组培技术优势
由于植物无糖组培以CO2代替糖作为植物体的碳源，对植物无糖组培微繁殖中的容器换气次数、光照强度、CO2浓度、培养基质、植物生长调节剂进行调节，并通过监测反馈结合植株生长特性建立符合植株生长要求的稳定供气系统和温度调控系统，从而解决了传统组织培养中存在的污染率高、植物生长发育不良、生长迟缓、生理功能紊乱、玻璃苗、畸形苗多等问题。
据相关资料报道，无糖组培快繁技术与传统的植物组织培养技术相比，显著提高苗的质量和产苗率，可缩短培养周期，种苗生产综合成本降低。
经大量实验研究证明，该项
研究成果已成为世界领先技术。
无糖组培生产工艺简单，流程缩短，技术和设备的集成度提高，降低了人工操作强度，更易于在规模化生产上推广应用。
三、无糖组培技术国内外研究进展
无糖组培快繁技术通过多年的试验研究和生产示范，在引进消化吸收国外先进技术的基础上，结合国情，昆明市环境科学研究所研制开发了无糖培养微繁殖生产的配套设施，获得三项专利。
目前，该项技术已初步应用于非洲菊、彩色马蹄莲、灯盏花、甘薯、葡萄、满天星等植物并获得成功。
上述研究结果表明，无糖组培技术培育出的苗具有抽叶多、植株健壮、节间距短、根系发达、干物质积累多、光合自养能力强等优良的生物学性状。
美国、韩国、英国、日本等国家已将该项技术应用于生产，并显示出了巨大的优势和良好的效果。
无糖组培快繁技术可解决传统组织培养中存在的诸多问题，显著提高种苗质量，缩短培养周期，提高产苗率，降低生产成本。
但目前，该项技术在药用植物方面的应用研究，除云南农大王荔课题组报道外尚未见其它报道。