转基因食品检测
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根据转基因食品来源的不同可分为植物性转基因食品,动物性转基因食品和微生 物性转基因食品。
转基因食品具有很多优点,如:可增加作物产量,可以降低生产成本,可增强作 物抗虫害、抗病毒等的能力;提高农产品耐贮性。但转基因食品在安全性以及环 境污染等问题使转基因食品一直存在争议。
• 二、转基因食品检验流程
实验室样品到样验收(确定是否具备检验的工作条件)
四、转基因食品检测实验室仪器配置
仪器设备 PCR基因扩增仪 实时荧光定量PCR仪 微波炉 电泳仪 电泳槽 凝胶成像系统 高温干燥箱 高压灭菌锅 微量移液器 冰箱 纯水机 制冰机 耗材 功能用途 用于相关基因的扩增分析 用于相关基因的快速、定量分析。 用于琼脂糖凝胶的制备。 用于PCR扩增产物的电泳分离。 凝胶电泳系统的核心部分。 用于PCR电泳后观察、拍照、记录和分析。 用于样品、器皿的干燥。 灭菌试剂的制备、器皿灭菌。 用于PCR板的移液操作。常用实验量程为0.2μ L~2.0μ L, 2μ L~20μ L, 20μ L~200μ L, 200μ L~1000μ L。 2~8℃冰箱,-20℃冰箱和-80℃冰箱。用于样品、试剂、标本的储存。 实验用纯水、超纯水的制备。 用于实验室冰块的制备。 PCR反应管,离心管(1.5mL,2mL,15mL,50mL),移液器枪头,PE手套等
5、旋涡振荡器。
6、恒温金属浴(或恒温水浴锅):恒温范围为室温~100℃ ,精度为 ±0.5℃ 。
7、台式高速离心机,低温冷冻高速离心机,微型离心机。
五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)
实验仪器配置:
8、 DNA 浓缩仪。
10、PCR 仪。 12、凝胶分析成像系统。
9、核酸蛋白分析仪。
11、电泳仪、电泳槽 13、PCR超净工作台或生物安全柜。
获取测试样品 核酸和(或)蛋白等目标物质的提取 (包括扩增和产物分析)和(或)蛋白质检测 结果表述,出具检验报告。
混样
测试样品的制备(待检状态) PCR实验 结果判定
• 三、转基因食品检验实验室工作区域的设置
四、转基因食品检测实验室仪器配置
仪器设备 电子天平(感量1mg) 粉碎机 液氮罐 磁力搅拌器 旋涡振荡器 恒温金属浴 台式离心机 高速冷冻离心机 微型离心机 pH计 核酸蛋白分析仪 超净工作台 生物安全柜 功能作用 用于样品的称量。 样品粉碎。 储存液氮。 用于含沉淀物液体样品或固液混合物的加热混匀。 用于试样的振荡混匀。 用于试样的恒温孵育过程,温浴温度常为37℃和65℃。 用于样品离心,选用普通高速离心机即可。 用于样品离心。 用于样品快速微量离心。 用于pH测量。 用于DNA浓度和纯度测定。 用于PCR扩增区加样过程,提供局部超净工作环境。(垂直流) 用于用于PCR扩增区加样过程,保护人员、样品和环境。
五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)
实验仪器配置:
1、电子天平:感量为0.001g与0.0001g。
2、粉碎机。 3、鼓风干燥箱。
4、微量移液器:体积范围是0.20μ L~2.0μ L, 2μ L~20μ L, 20μ L~ 200μ L, 200μ L~1000μ L,枪头用前应高压灭菌处理。
DNA提取
DNA 浓度与纯度测定
天平、干燥箱、粉碎机、 真菌DNA提取试剂盒、 移液器、旋涡振荡器、 金属浴、高速台式离心 机、高速冷冻离心机
3、PCR反应热循环参数的设置: 变性—退火—延伸,热循环。 4、PCR扩增产物的电泳检测 (PCR扩增仪、电泳仪、凝胶成像系统)
谢 谢 聆 听
五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)
主要食用菌(如杏鲍菇、红菇、姬松茸、香菇、草菇、牛肝菌、鸡腿菇、金 针菇、双孢蘑菇、猪肚菇、凤尾菇、小平菇、秀珍菇、猴头菇、金顶侧耳、 茶树菇、竹荪、黑木耳、白木耳等)中转基因成分的检测。
实验原理: 样品经过提取 DNA 后,针对转基因食用菌所导入的常见外源基因的基因 序列设计引物,通过 PCR技术,对外源基因的 DNA 片段进行特异性 扩增,根据实验结果,判定该食用菌样品是否含有外源基因成分。
14、微波炉。
16、PH 计。 18、纯水机。
15、高压灭菌锅。
17、制冰机。 19、低温冰箱(-20℃以下)。
20.真菌NDA提取试剂盒。
五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)
实验主要操作步骤: 1、PCR反应体系
核酸蛋白分析仪
2、PCR反应体系对照的设置: 阳性对照、阴性对照、空
目录
• 一、转基因食品简介
• 二、转基因食品检验流程 • 三、转基因食品检验实验室工作区域的设置
• 四、转基因食品检测实验室仪器配置
• 五、主要食用菌中转基因食品检测(举例)
• 一、转基因食品简介
转基因食品, 就是通过基因工程技术将一种或几种外源性基因转移到某种特定 的生物体中,并使其有效地表达出相应的产物(多肽或蛋白质),此过程叫转基 因。以转基因生物为原料加工生产的食品就是转基因食品。