组织切片精品PPT课件
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组织切片制作PPT课件
载玻 片
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九 、烤 片 40℃需烤1天或1昼夜；60℃烤0.5至1小时，放在酒精
灯上烤片（必须来回晃动），或70℃左右的温度烤片， 只需3至5分钟即可。
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十、 染 色 1 苏木精（素）－伊红染色方法
具体步骤：
（1）二甲苯 I
（10 min）
（2）二甲苯II
（5 min）
1 切片前的准备 （1）切片前必须了解切片机的基本结构和性能。装刀架、刀片。检验刀片是否锋利。 （2）载玻片、盖玻片的处理：洗液浸泡24小时后用自来水充分洗涤，95％酒精中浸泡，
再用软绸布或纱布擦干待用 。 （3）为了使切出的薄片能粘贴在载玻片上，可用蛋清与甘油（1:1）混合物均匀抹在载玻
片上，再使切片附贴在玻片上。 （4）另外，准备水浴锅、蓬松的中号毛笔，眼科镊，水槽等物。
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2 切片制作过程
（1）冷冻组织蜡块，固定刀架、刀片 和蜡块。 （2）切片 ：切片厚度：5μm；转速： 40至50次/分钟。 （3） 展片 （4）捞片 、烫片（45o ）、捞片
（5）切片过程中，固定好蜡块、刀片，注意刀与蜡块的角度（5o ）。出现蜡片上卷、裂隙、 刀痕等立即移动刀片或切片刀，换至刀刃锋利处。毛笔必须由下向上拔动，烫片时水温不宜 过高等等。
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二、固 定
固定就是将采取的新鲜组织，放入固定液内，借助化学药品的作用使细胞内 的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成份沉淀保存下来。同时，使组织硬化不变形， 有利于固定以后的处理。
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1
固定液的用量
应充足，一般为组织块体积的10倍左右。
2
固定时间
应根据组织的种类、性质、大小，固定液的种类、性质、渗透力的强弱而定。
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九 、烤 片 40℃需烤1天或1昼夜；60℃烤0.5至1小时，放在酒精
灯上烤片（必须来回晃动），或70℃左右的温度烤片， 只需3至5分钟即可。
第19页/共25页
十、 染 色 1 苏木精（素）－伊红染色方法
具体步骤：
（1）二甲苯 I
（10 min）
（2）二甲苯II
（5 min）
1 切片前的准备 （1）切片前必须了解切片机的基本结构和性能。装刀架、刀片。检验刀片是否锋利。 （2）载玻片、盖玻片的处理：洗液浸泡24小时后用自来水充分洗涤，95％酒精中浸泡，
再用软绸布或纱布擦干待用 。 （3）为了使切出的薄片能粘贴在载玻片上，可用蛋清与甘油（1:1）混合物均匀抹在载玻
片上，再使切片附贴在玻片上。 （4）另外，准备水浴锅、蓬松的中号毛笔，眼科镊，水槽等物。
第17页/共25页
2 切片制作过程
（1）冷冻组织蜡块，固定刀架、刀片 和蜡块。 （2）切片 ：切片厚度：5μm；转速： 40至50次/分钟。 （3） 展片 （4）捞片 、烫片（45o ）、捞片
（5）切片过程中，固定好蜡块、刀片，注意刀与蜡块的角度（5o ）。出现蜡片上卷、裂隙、 刀痕等立即移动刀片或切片刀，换至刀刃锋利处。毛笔必须由下向上拔动，烫片时水温不宜 过高等等。
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二、固 定
固定就是将采取的新鲜组织，放入固定液内，借助化学药品的作用使细胞内 的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成份沉淀保存下来。同时，使组织硬化不变形， 有利于固定以后的处理。
第5页/共25页
1
固定液的用量
应充足，一般为组织块体积的10倍左右。
2
固定时间
应根据组织的种类、性质、大小，固定液的种类、性质、渗透力的强弱而定。
动物解剖生理—组织切片观察(动物解剖生理课件)
细胞
骨原细胞
成骨细胞 骨细胞 破骨细胞
骨基质
有机成分
大量的胶原纤维 少量无定形物质分
红细胞
白细胞 血小板
三、肌组织
• 骨骼肌 • 平滑肌 • 心肌
不同肌组织的比较
1、分布在头、颈、躯 干和四肢 2、骨骼肌收缩快而有 力 3、属于随意肌
骨骼肌纤维的光镜结构 • 1.细胞长圆柱形 • 2.细胞核扁椭圆形，数目多
功能：支持，屏障，修复与再生， 吞噬，运输与营养，隔离与绝缘， 摄取递质和分泌，神经系统发育等
由神经元的长突起和包 绕其外的神经胶质细胞 构成。根据包裹轴突的 神经胶质细胞是否形成 完整的髓鞘，分为： 有髓神经纤维 无髓神经纤维
胞体 轴索 少突胶质细胞 神经膜细胞
神经元模式图
• 有髓神经纤维
• 无髓神经纤维
• 致密结缔组织的组成与疏松结缔组织基本相同 • 两者的主要区别是,致密结缔组织中的纤维成分
特别多,而且排列紧密,细胞和基质成分很少 。 除弹性组织外,绝大多数的致密结缔组织中以粗 大的胶原纤维束为主要成分,其中含少量纤维细 胞,小血管和淋巴管 。 • 分布于真皮、骨膜、软骨膜、肌腱和韧带等处
（一）规则致密组织 如肌腱、腱膜
个树突
双极神经元：轴突和树突各
一个
假
假单极神经元：从胞体发出
单 极
一个突起，但在不出现分支 神
，一支进入中枢神经统，另
经 元
一支分布到周围的其他器官
多
双
极
极
神
神
经
经
元
元
2. 突起 树突：有一个或多个；
能够接受刺激、将 神经冲动传给胞体
树突
轴突：只有一个； 将神经冲动由胞体
《病理检验技术》课件——石蜡包埋组织切片
6.切片时室温不宜过高，一般先把组织蜡块面朝下 放在冰块上冷冻数分钟后才切片，可切出较薄的切 片。
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
病理学组织切片课件PPT
病理学在医学领域中具有广泛的 应用，包括临床诊断、法医学鉴 定、药物研发、生物医学研究等 。
病理学的发展历程和未来趋势
发展历程
病理学的发展经历了古代形态观察、近代病理学的建立和发展、现代病理学的 数字化和智能化等阶段。
未来趋势
随着科技的不断进步，病理学将朝着数字化、智能化、精准化和个性化等方向 发展，如数字化病理切片技术、人工智能辅助诊断等。
细胞大小、形状、染色深浅等 发生变化，可能提示病理状态
。
细胞数量改变
细胞增多或减少，可能与肿瘤 、炎症等病理过程相关。
细胞排列改变
细胞排列紊乱、排列密集或稀 疏，可能提示病变。
组织结构改变
组织结构破坏、萎缩或增生， 可能与器官功能异常或疾病有
关。
组织切片的分析步骤和注意事项
观察切片整体
观察病变特征
病理学组织切片课件
contents
目录
• 病理学概述 • 组织切片基础知识 • 病理学组织切片分析 • 病理学组织切片实例分析 • 病理学组织切片的诊断与鉴别诊断 • 病理学组织切片的教学与培训
01 病理学概述
病理学的定义和重要性
病理学定义
病理学是一门研究疾病病因、发病机 制、病理变化和结局的医学学科，旨 在揭示疾病的本质和发生发展规律。
损伤组织切片分析
损伤组织切片是用于观察和分析各种原 因引起的组织损伤的样本类型。
损伤组织切片的观察和分析有助于了解 损伤的性质、程度和范围，以及损伤对
周围组织的影响。
损伤组织切片的分析过程包括观察损伤 细胞的形态变化、坏死和凋亡情况，以 及损伤后修复和再生的情况，对于评估 疾病的预后和治疗方案具有指导意义。
应用
组织切片在病理学诊断、研究、教学等方面具有广泛的应用 ，是医学领域中非常重要的技术手段。
病理学的发展历程和未来趋势
发展历程
病理学的发展经历了古代形态观察、近代病理学的建立和发展、现代病理学的 数字化和智能化等阶段。
未来趋势
随着科技的不断进步，病理学将朝着数字化、智能化、精准化和个性化等方向 发展，如数字化病理切片技术、人工智能辅助诊断等。
细胞大小、形状、染色深浅等 发生变化，可能提示病理状态
。
细胞数量改变
细胞增多或减少，可能与肿瘤 、炎症等病理过程相关。
细胞排列改变
细胞排列紊乱、排列密集或稀 疏，可能提示病变。
组织结构改变
组织结构破坏、萎缩或增生， 可能与器官功能异常或疾病有
关。
组织切片的分析步骤和注意事项
观察切片整体
观察病变特征
病理学组织切片课件
contents
目录
• 病理学概述 • 组织切片基础知识 • 病理学组织切片分析 • 病理学组织切片实例分析 • 病理学组织切片的诊断与鉴别诊断 • 病理学组织切片的教学与培训
01 病理学概述
病理学的定义和重要性
病理学定义
病理学是一门研究疾病病因、发病机 制、病理变化和结局的医学学科，旨 在揭示疾病的本质和发生发展规律。
损伤组织切片分析
损伤组织切片是用于观察和分析各种原 因引起的组织损伤的样本类型。
损伤组织切片的观察和分析有助于了解 损伤的性质、程度和范围，以及损伤对
周围组织的影响。
损伤组织切片的分析过程包括观察损伤 细胞的形态变化、坏死和凋亡情况，以 及损伤后修复和再生的情况，对于评估 疾病的预后和治疗方案具有指导意义。
应用
组织切片在病理学诊断、研究、教学等方面具有广泛的应用 ，是医学领域中非常重要的技术手段。
病理组织切片制作技术PPT课件
病理组织切片制作技术
• 病理组织切片制作技术概述 • 样本的收集与处理 • 组织切片的制备 • 病理组织切片的观察与诊断 • 病理组织切片制作技术的发展趋势
01
病理组织切片制作技术概述
切片制作的意义和目的
诊断疾病
教学质量
通过对病理组织进行切片制作，可以 观察组织结构和细胞形态，协助医生 诊断疾病。
环境控制
制作切片的实验室应保持清洁、干燥， 防止灰尘、温度等因素对切片质量造 成影响。
02
样本的收集与处理
样本的采集
手术切除
对于需要病理诊断的病例， 医生会进行手术切除病变 组织。
活检
通过穿刺或钳取的方式获 取少量病变组织用于病理 诊断。
尸检
对于死亡病例，通过尸检 获取病变组织。
样本的处理
清洗
利用人工智能技术对病理组织切片进行图像识别和分类，辅助医生 快速诊断。
辅助诊断系统
基于人工智能技术的辅助诊断系统，能够根据病理组织切片的特征， 提供初步诊断结果。
Hale Waihona Puke 预测模型利用人工智能技术构建预测模型，根据病理组织切片的特征预测疾病 发展趋势和预后情况。
THANKS
感谢观看
切片的染色
染色原理
染色是通过化学或物理方法使组织切 片着色，以突出或显现组织中的不同 结构。
常用染色方法
苏木精-伊红染色（HE染色）是病理 组织切片中最常用的染色方法，能较 好地显示细胞核和细胞质的结构。
切片的封固
封固剂选择
根据不同的染色方法选择合适的封固剂，如中性树胶、香柏 油等。
封固步骤
在染色和脱水完成后，用封固剂将切片固定在载玻片上，以 防止切片在观察和保存过程中发生脱落或损坏。
• 病理组织切片制作技术概述 • 样本的收集与处理 • 组织切片的制备 • 病理组织切片的观察与诊断 • 病理组织切片制作技术的发展趋势
01
病理组织切片制作技术概述
切片制作的意义和目的
诊断疾病
教学质量
通过对病理组织进行切片制作，可以 观察组织结构和细胞形态，协助医生 诊断疾病。
环境控制
制作切片的实验室应保持清洁、干燥， 防止灰尘、温度等因素对切片质量造 成影响。
02
样本的收集与处理
样本的采集
手术切除
对于需要病理诊断的病例， 医生会进行手术切除病变 组织。
活检
通过穿刺或钳取的方式获 取少量病变组织用于病理 诊断。
尸检
对于死亡病例，通过尸检 获取病变组织。
样本的处理
清洗
利用人工智能技术对病理组织切片进行图像识别和分类，辅助医生 快速诊断。
辅助诊断系统
基于人工智能技术的辅助诊断系统，能够根据病理组织切片的特征， 提供初步诊断结果。
Hale Waihona Puke 预测模型利用人工智能技术构建预测模型，根据病理组织切片的特征预测疾病 发展趋势和预后情况。
THANKS
感谢观看
切片的染色
染色原理
染色是通过化学或物理方法使组织切 片着色，以突出或显现组织中的不同 结构。
常用染色方法
苏木精-伊红染色（HE染色）是病理 组织切片中最常用的染色方法，能较 好地显示细胞核和细胞质的结构。
切片的封固
封固剂选择
根据不同的染色方法选择合适的封固剂，如中性树胶、香柏 油等。
封固步骤
在染色和脱水完成后，用封固剂将切片固定在载玻片上，以 防止切片在观察和保存过程中发生脱落或损坏。
组织切片染色技术ppt课件
2．特殊染色
特殊染色就是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分，是常 规染色的必要补充，也是染色技术中不可缺少的部分。它在病理 诊断中起到辅助作用。
3．单一染色
选用一种染料进行的染色，如用铁苏木素染睾丸生精细胞等。
4．复染色
用两种不同性质的染料进行染色的方法，如用苏木素和伊红分别 使细胞核及胞质染成两种颜色。
精选ppt课件2021
38
* 苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木 素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性。
有橘黄G、刚果红、俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。
（4）醌亚胺类：含有两个发色团，一个是印胺基（-N=）、一个 是醌型苯环，如硫堇、美蓝、甲苯胺蓝O、硫酸尼罗蓝、中性红和 碱性藏红花O、焦油紫等。
（5）苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘、浅绿、碱性品 红、酸性品红、结晶紫和甲基缘等。
（6）山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁和伊红Y等。
精选ppt课件2021
25
六、染色前后处理
（二）染色后的处理
1．脱水 95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min→100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min。 2．透明 二甲苯Ⅰ、Ⅱ各5min透明。 3．封固 通常用中性树胶或加拿大树胶加盖玻片封固。
精选ppt课件2021
26
七、染色的注意事项
1．切片脱蜡应彻底。
2．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶 反应的组织固定更应严格。凡用含升汞固定液固定的组织， 切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落。
5．多种染色
选用两种以上的染料的染色，如Mosson三色染色法。
精选ppt课件2021
21
六、染色前后处理
（一）染色前处理 1．脱蜡至水
特殊染色就是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分，是常 规染色的必要补充，也是染色技术中不可缺少的部分。它在病理 诊断中起到辅助作用。
3．单一染色
选用一种染料进行的染色，如用铁苏木素染睾丸生精细胞等。
4．复染色
用两种不同性质的染料进行染色的方法，如用苏木素和伊红分别 使细胞核及胞质染成两种颜色。
精选ppt课件2021
38
* 苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木 素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性。
有橘黄G、刚果红、俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。
（4）醌亚胺类：含有两个发色团，一个是印胺基（-N=）、一个 是醌型苯环，如硫堇、美蓝、甲苯胺蓝O、硫酸尼罗蓝、中性红和 碱性藏红花O、焦油紫等。
（5）苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘、浅绿、碱性品 红、酸性品红、结晶紫和甲基缘等。
（6）山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁和伊红Y等。
精选ppt课件2021
25
六、染色前后处理
（二）染色后的处理
1．脱水 95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min→100%乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min。 2．透明 二甲苯Ⅰ、Ⅱ各5min透明。 3．封固 通常用中性树胶或加拿大树胶加盖玻片封固。
精选ppt课件2021
26
七、染色的注意事项
1．切片脱蜡应彻底。
2．常规染色、特殊染色等，组织要进行固定处理，做酶 反应的组织固定更应严格。凡用含升汞固定液固定的组织， 切片脱蜡后，应经脱汞处理，同时要慎防切片脱落。
5．多种染色
选用两种以上的染料的染色，如Mosson三色染色法。
精选ppt课件2021
21
六、染色前后处理
（一）染色前处理 1．脱蜡至水
人体显微形态学切片课件：肌肉组织
心肌超微结构
线粒体 闰盘
平滑肌 (大肠，HE, x40)
平滑肌纵切面 (大肠，HE, x100)
平滑肌纵切面 (大肠，HE, x400)
平滑肌横切面 (大肠，HE, x400)
Байду номын сангаас
肌肉组织
骨骼肌 (膈肌，HE, x40)
肌束膜 肌内膜 骨骼肌纤维 肌外膜
骨骼肌横切 (膈肌，HE, x400)
肌原纤维束 骨骼肌细胞核
肌浆网
肌丝
骨骼肌超微结构（横切面）
骨骼肌纵切面 (膈肌，HE, x40)
骨骼肌纤维 肌束膜
骨骼肌纵切面 (膈肌，HE, x400)
骨骼肌细 胞核 横纹 肌内膜
肌原纤维束 肌束膜
H带 I带 A带 Z线 M线
骨骼肌超微结构
心肌纵切面 (心肌，HE, x100)
闰盘 心肌细胞核
闰盘
心肌纵切面 (心肌，HE, x400)
N：细胞核 C：毛细血管.
心肌横切面 (心肌，HE，x400)
N：细胞核 E：心内膜 C：毛细血管.
心肌横切面 (心肌，HE，x400)
组织切片技术课件
组织切片技术课件
2.1.2 动物组织标本的取材
动物的处死方式一般为活杀，组织标本来源较新鲜， 10min内即可完成固定和冷冻保存，脑组织和神经组织应 采用灌注固定后，再进行后固定。
制片所需的材料要求越新鲜越好，尤其是细胞学方面 的研究对材料的新鲜程度要求更严。因此，要从活的动物 体上采取材料，在一般情况下，要对动物施行麻醉，然后 再割取材料加以固定。所用的麻醉药品，必须以不影响细 胞结构为原则。
组织切片技术课件
二、组织学制片技术的分类
组织学制片技术有很多不同的制片方法，一般可分为切 片Fra bibliotek与非切片法两大类：
切片法：石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等。 非切片法：铺片、涂片、压片、磨片、整装片等。
组织切片技术课件
1、非切片法
即不用切片机，不经切片手续而制成切片的方法， 根据材料性质的不同，有不同的处理方法，该类方法 操作简单快捷，其中铺片法，封藏法可使原有组织结 构不被破坏，涂片法，压片法弥补了用包埋，切片法 所不可能观察清楚的不足，因此是组织标本制备中常 用的手段。
组织切片技术课件
2.3 组织脱水、透明
脱水(Dehydration): 由于石蜡不溶于水，因而，组织经固定和水洗后含大
量水分，需先用乙醇类试剂进行脱水。脱水是用一种既 能与水又能与透明液混合的液体来逐渐置换样品中游离 的水。如用浓度逐渐升高的酒精 (70-100%)将组织中的 水完全置换出来。
组织切片技术课件
组织切片技术课件
（1）甲醛固定液：
是一种还原剂，呈酸性，原液浓度为37%～40%，配成 固定液的浓度为4%，习惯上称为10%，配制时取甲醛原液 10ml，加蒸馏水（D.W）或缓冲液至100ml，为甲醛固定液 （10％福尔马林） 。
2.1.2 动物组织标本的取材
动物的处死方式一般为活杀，组织标本来源较新鲜， 10min内即可完成固定和冷冻保存，脑组织和神经组织应 采用灌注固定后，再进行后固定。
制片所需的材料要求越新鲜越好，尤其是细胞学方面 的研究对材料的新鲜程度要求更严。因此，要从活的动物 体上采取材料，在一般情况下，要对动物施行麻醉，然后 再割取材料加以固定。所用的麻醉药品，必须以不影响细 胞结构为原则。
组织切片技术课件
二、组织学制片技术的分类
组织学制片技术有很多不同的制片方法，一般可分为切 片Fra bibliotek与非切片法两大类：
切片法：石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等。 非切片法：铺片、涂片、压片、磨片、整装片等。
组织切片技术课件
1、非切片法
即不用切片机，不经切片手续而制成切片的方法， 根据材料性质的不同，有不同的处理方法，该类方法 操作简单快捷，其中铺片法，封藏法可使原有组织结 构不被破坏，涂片法，压片法弥补了用包埋，切片法 所不可能观察清楚的不足，因此是组织标本制备中常 用的手段。
组织切片技术课件
2.3 组织脱水、透明
脱水(Dehydration): 由于石蜡不溶于水，因而，组织经固定和水洗后含大
量水分，需先用乙醇类试剂进行脱水。脱水是用一种既 能与水又能与透明液混合的液体来逐渐置换样品中游离 的水。如用浓度逐渐升高的酒精 (70-100%)将组织中的 水完全置换出来。
组织切片技术课件
组织切片技术课件
（1）甲醛固定液：
是一种还原剂，呈酸性，原液浓度为37%～40%，配成 固定液的浓度为4%，习惯上称为10%，配制时取甲醛原液 10ml，加蒸馏水（D.W）或缓冲液至100ml，为甲醛固定液 （10％福尔马林） 。
病理组织切片技术课件
取材
取材是病理组织切片制作的第一步，也是至关重要的一步。 取材时，应选择具有代表性的组织，并注意避免组织自溶和 腐败。同时，要确保取材器械的清洁和消毒，以避免污染和 交叉感染。
取材时，应根据不同的病理类型和病变情况，选择适当的取 材方法和取材量。对于小块病变组织，应尽量取全；对于大 块病变组织，应根据病变特点和部位，选择具有代表性的部 分取材。
固定
固定是病理组织切片制作中不可缺少的一步，其目的是使组织保持其生前的状态 ，防止组织自溶和腐败。常用的固定方法有：甲醛固定法、乙醇固定法和混合固 定法等。
固定液的浓度和固定时间对固定效果有很大影响。一般来说，固定液的浓度越高 、固定时间越长，固定效果越好。但固定时间过长会导致组织变硬，影响切片质 量。因此，应根据具体情况选择适当的固定液和固定时间。
切片质量
切片的质量直接影响到显 微镜观察的结果，因此制 备过程中需要保证切片的 平整、均匀和无气泡。
切片技术分类
01
02
03
04
石蜡切片
将样品包埋在石蜡中，然后进 行切片和染色，是最常用的切
片技术之一。
冰冻切片
将样品快速冷冻后进行切片， 主要用于快速病理诊断。
苏木素-伊红染色
对切片进行染色，以便在显微 镜下观察细胞的形态和结构。
脱水
脱水是病理组织切片制作中非常重要的一步，其目的是去 除组织中的水分，为后续的浸蜡和包埋做准备。常用的脱 水方法有：自然干燥法和人工脱水法等。
脱水液的选择和使用对脱水效果有很大影响。一般来说， 脱水液的浓度越高、脱水时间越长，脱水效果越好。但脱 水时间过长会导致组织变脆，影响切片质量。因此，应根 据具体情况选择适当的脱水液和脱水时间。
H&E染色
组织学与胚胎学切片图课件PPT
畸形胚胎切片图
先天性缺陷
介绍常见的先天性缺陷疾病，如 唐氏综合征、先天性心脏病等，
并展示相关切片图。
遗传性疾病
展示遗传性疾病的病理切片图， 如囊性纤维化、镰状细胞贫血等。
胚胎致死性畸形
介绍一些严重的畸形导致胚胎无 法存活的情况，如无脑儿、严重
心脏畸形等。
04
切片图在医学研究中的应用
病理学研究
病理学是研究疾病发生、发展和转归规律的学科，切片图是 病理学研究中常用的工具之一。通过观察切片图，可以了解 病变组织的形态学特征，为疾病的诊断和治疗提供依据。
肝脏组织结构切片图
展示肝脏的肝小叶、肝窦等结构，用于学习肝脏的形态和功能形态和功能。
肺组织结构切片图
展示肺泡、支气管等结构，用于学习肺的形态和功能。
细胞组织结构切片图
01
02
03
细胞膜结构切片图
展示细胞膜的磷脂双分子 层、膜蛋白等结构，用于 学习细胞膜的结构和功能。
切片图的重要性
切片图对于研究生物组织和器官的结构、功能以及发育过程 具有重要意义。通过切片图，可以观察到细胞、组织、器官 的细微结构，为理解生命活动的本质提供基础资料。
切片图的制作过程
取材
选取需要观察的生物组 织或器官，进行固定。
切片制备
将固定后的组织或器官 进行石蜡包埋、切片和
贴片。
染色
对切片进行染色，以便 更好地观察其结构。
观察与成像
通过显微镜观察染色后 的切片，并使用成像设
备记录图像。
切片图的观察与解读
观察要点
注意观察细胞、组织、器官的结 构特点，包括细胞核、细胞质、 细胞器的形态和分布。
解读技巧
结合理论知识，对切片图进行深 入分析，理解其结构与功能的关 系，以及发育过程中的变化。
《组织切片技术》课件
生态学研究
在生态学研究中，组织切片技术可用于分析生物群落的结构、功能 和演化，了解生物与环境之间的相互作用。
CHAPTER 04
组织切片技术的优缺点
优点
高分辨率
组织切片技术能够提供高分辨率的细胞和 组织结构细节，有助于研究者深入了解细
胞和组织的微细结构。
广泛适用性
组织切片技术适用于各种类型的细胞和组 织，包括动物、植物和微生物，因此具有
解药物对细胞和组织的影响，加速新药的研发进程。
生物医学研究
03
在基础生物学、生理学和病理学研究中，组织切片技术为科学
家提供了深入探究细胞和组织结构和功能的机会。
对未来医学与科技的影响
精准医疗
组织切片技术将有助于实现精准医疗，通过对个体患者的组织切片 进行精确诊断和治疗，提高医疗质量和效果。
医学教育
CHAPTER 05
组织切片技术的发展前景
技术创新与突破
1 2 3
自动化与智能化
通过引入人工智能和机器学习技术，实现组织切 片的自动化识别、处理和分析，提高工作效率和 准确性。
高分辨率成像技术
利用超分辨光学、电子显微等技术，实现组织切 片的超高分辨率成像，为深入研究细胞结构和功 能提供有力支持。
广泛的应用范围。
直观性
通过组织切片，研究者可以直接观察到细 胞和组织的形态、排列和分布情况，有助 于直观地理解细胞和组织的生理功能。
可重复性
组织切片技术是一种成熟的实验方法，具 有较高的可重复性，有利于实验结果的稳 定性和可靠性。
缺点
损伤性
制作组织切片需要对细胞和组 织进行切割，这可能会对细胞 和组织的结构和功能造成一定
观察细胞的大小、形状、染色深浅等特征，分析细胞的类型和功能。
在生态学研究中，组织切片技术可用于分析生物群落的结构、功能 和演化，了解生物与环境之间的相互作用。
CHAPTER 04
组织切片技术的优缺点
优点
高分辨率
组织切片技术能够提供高分辨率的细胞和 组织结构细节，有助于研究者深入了解细
胞和组织的微细结构。
广泛适用性
组织切片技术适用于各种类型的细胞和组 织，包括动物、植物和微生物，因此具有
解药物对细胞和组织的影响，加速新药的研发进程。
生物医学研究
03
在基础生物学、生理学和病理学研究中，组织切片技术为科学
家提供了深入探究细胞和组织结构和功能的机会。
对未来医学与科技的影响
精准医疗
组织切片技术将有助于实现精准医疗，通过对个体患者的组织切片 进行精确诊断和治疗，提高医疗质量和效果。
医学教育
CHAPTER 05
组织切片技术的发展前景
技术创新与突破
1 2 3
自动化与智能化
通过引入人工智能和机器学习技术，实现组织切 片的自动化识别、处理和分析，提高工作效率和 准确性。
高分辨率成像技术
利用超分辨光学、电子显微等技术，实现组织切 片的超高分辨率成像，为深入研究细胞结构和功 能提供有力支持。
广泛的应用范围。
直观性
通过组织切片，研究者可以直接观察到细 胞和组织的形态、排列和分布情况，有助 于直观地理解细胞和组织的生理功能。
可重复性
组织切片技术是一种成熟的实验方法，具 有较高的可重复性，有利于实验结果的稳 定性和可靠性。
缺点
损伤性
制作组织切片需要对细胞和组 织进行切割，这可能会对细胞 和组织的结构和功能造成一定
观察细胞的大小、形状、染色深浅等特征，分析细胞的类型和功能。
实验一显微镜构造与使用及组织切片的观察 PPT
❖ (一)显微镜得基本结构:显微镜得中部有一弯曲得柄,称镜臂, 基部为镜座。用右手握紧镜臂,将其自镜箱(或镜柜)中取出,左 手托住镜座,保持镜体直立,轻放于桌上,观察各部分构造。镜 座上得短柱叫镜柱。镜座与镜柱之间有一倾斜关节(在较新 得显微镜无此倾斜关节),可使显微镜在90°角范围内随意倾斜 成任何角度。
调焦器,小得叫细调焦器。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍 镜调焦;细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦:接物镜有低 倍与高倍之分。较短得就是低倍,一般放大10倍(10X);较长得 就是高倍,一般放大40倍(40X)。、油物镜放大100倍(100X)。 接目镜也有高低倍之分,较长得就是低倍,一般放大10倍。显
大家应该也有点累了,稍作休息
大家有疑问得,可以询问与交流
10
❖ 在镜臂基部有一个方形或圆形得平台,就是载物台 (或称镜台)。台得中央有一圆孔,可通过光线。两侧 有压片夹,用以固定玻片标本。现代得显微镜具镜台 X-Y驱动器,用以固定与移动玻片标本。在圆孔得下 面,有由一片或数片透镜所组成得聚光器,有集射光 线于物体得作用。聚光器附有一组由金属片组成得 可变光阑,其侧面伸出一杠杆,可前后移动使光阑开 闭。光阑开大则光线较强,适于观察色深得物体;光 阑缩小则光线较弱,适于观察透明(或无色)得物体。 在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此 镜一面平,一面凹。凹面具有较强得互光性,多用于 光线较暗得情况下;光线较强时用平面镜即可。内光 源显微镜得光源位于镜座靠后方,在镜座右侧有光源 按钮,此按钮可前后移动,使光阑开闭,用以调节光线 得强弱。
❖ (二)实验用得一切工具,在使用前应核对清楚,实验后清洗干净, 查点清楚,原样放回。
❖ (三)观察及绘图务求精细准确,独立思考,独立完成。 ❖ (四)每次得实验报告应在教师指定时间内完成。 ❖ (五)实验结束,于离开实验室前,应清理好自己得实验桌,要轮
调焦器,小得叫细调焦器。粗调焦器升降镜筒较快,用于低倍 镜调焦;细调焦器升降镜筒较慢,用于高倍镜调焦:接物镜有低 倍与高倍之分。较短得就是低倍,一般放大10倍(10X);较长得 就是高倍,一般放大40倍(40X)。、油物镜放大100倍(100X)。 接目镜也有高低倍之分,较长得就是低倍,一般放大10倍。显
大家应该也有点累了,稍作休息
大家有疑问得,可以询问与交流
10
❖ 在镜臂基部有一个方形或圆形得平台,就是载物台 (或称镜台)。台得中央有一圆孔,可通过光线。两侧 有压片夹,用以固定玻片标本。现代得显微镜具镜台 X-Y驱动器,用以固定与移动玻片标本。在圆孔得下 面,有由一片或数片透镜所组成得聚光器,有集射光 线于物体得作用。聚光器附有一组由金属片组成得 可变光阑,其侧面伸出一杠杆,可前后移动使光阑开 闭。光阑开大则光线较强,适于观察色深得物体;光 阑缩小则光线较弱,适于观察透明(或无色)得物体。 在聚光器下方有反光镜,可将光线反射至聚光器。此 镜一面平,一面凹。凹面具有较强得互光性,多用于 光线较暗得情况下;光线较强时用平面镜即可。内光 源显微镜得光源位于镜座靠后方,在镜座右侧有光源 按钮,此按钮可前后移动,使光阑开闭,用以调节光线 得强弱。
❖ (二)实验用得一切工具,在使用前应核对清楚,实验后清洗干净, 查点清楚,原样放回。
❖ (三)观察及绘图务求精细准确,独立思考,独立完成。 ❖ (四)每次得实验报告应在教师指定时间内完成。 ❖ (五)实验结束,于离开实验室前,应清理好自己得实验桌,要轮
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复习题
1 制片方法归结为哪几类? 2 制片是否成功的标准？
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
25
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
300×，细菌、血球、精子
第一章 概 述
一、显微制片技术的发展概况
标本制备技术：
固定方面 ： 单一固定剂
混合固定剂
19世纪，氯化汞、铬酸、冰醋酸、酒精、重 铬酸钾、四氧化锇、甲醛 Flemming、Bouin
染色方面： 藏红花 胭脂红、苏木精
1862年，Beneke，苯胺染料
组织学革命
切片技术方面： 徒手切片法
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（一）切片法的一般过程（石蜡包埋切片法为例） 2. 冲洗与保存
据所使用固定剂的不同选用适当的溶剂将固定剂洗净。 70%Alc（长期保存可在70%Alc中加10%甘油）中保存 。
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（一）切片法的一般过程（石蜡包埋切片法为例） 3. 脱水： 有利于保存或后面的透明和透蜡处理 。 70%Alc中可长期保存，在80%Alc中可隔夜。 4.透明：将脱水剂替换出来，便于下一步透蜡。 5.透蜡、包埋
第三篇 电子显微镜技术
第四篇 其它现代实验技术
组织芯片技术 显微切割技术 流式细胞术 鱼虾贝细胞培养技术
第一篇 显微制片技术的一般原理与方法
第一章 概述 第二章 固定与固定剂 第三章 染色、染料及染色剂 第四章 脱水、透明与封固 第五章 非切片法 第六章 切片法 第七章 特殊制片技术
第一章 概 述
一、显微制片技术的发展概况
生物学
研究方法
研究工具 标本制备技术
显微镜
固定 染色 切片技术
第一章 概 述
一、显微制片技术的发展概况
0.2μm
显微镜发展：20世纪30年代，光学显微镜分辨率达到极限
1590
Janssen
1665
Robert Hooke Cella
（cell）
1667
Leeuwenhoek
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（一）切片法的一般过程（石蜡包埋切片法为例） 6.切片、贴片
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（一）切片法的一般过程（石蜡包埋切片法为例） 7. 染色
8. 脱水、透明、封片
纤毛虫
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（二）非切片法 1. 整体制片法 2. 涂片法
血涂片
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（二）非切片法 3.分离法 4.铺片法 5.压片法 6.滴片法
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述 切片是否合格（即制片成功与否）的标准？
• 制片是否保持原有的形态，不能有人工假象 • 染色对比是否明显 • 脱水是否干净 • 透明是否达到光学标准 • 颜色是否能长期保存
？ 生物实验技术
方法学
生物显微技术
生物学研究的基础 实验方法
研究生物体在形态学和功能方 面的基础研究方法。目的是为 在显微镜下有效地观察生物体 提供适当的标本。
淋巴囊肿病毒病
光镜技术
电镜技术
组织化学技术
免疫组织化学技术
大竹蛏肠上皮
碱性磷酸酶 酸性磷酸酶
课程结构与内容：
第一篇 显微制片技术的一般原理与方法 第二篇 显微镜与显微摄影技术
暗视野显微镜 相差显微镜
微分干涉显微镜
荧光显微镜
数字摄影显微镜
显微操纵系统 （倒置显微镜）
激光扫描共聚焦显微镜
新型扫描显微成像系统 • 克服了光镜与电镜的不足 •具有纵向分辨率，对样品进行
无损伤的“光学切片” ，“显微CT” • 对每一层面的信息进行处理和分析 • 三维结构的重组和立体结构的分析 • 具备时间分辨力，可对观察标本进行动态观察
石蜡包埋切片法
切片机
厚2μm
第一章 概 述
一、显微制片技术的发展概况源自显微镜发展：超薄切片技术
• 1934年，第一台电镜诞生（德国） • 1939年，德国Siemens公司生产第一台商品电镜（10nm）
• 我国1958年开始制造电镜 点分辨率优于0.3nm
• 上世纪50-70年代，制成多种用途显微镜
SUCCESS
THANK YOU
2020/12/13
可编辑
13
扫描探针显微镜
扫
硅表面结构
描
隧 道 显 微 镜 原
Bining 和 Rohner （1982）， 获得了1986年的诺 贝尔奖 分辨率10-9m
理
第一章 概 述
二、制片方法的种类
1. 非切片法：在制片过程中不经过切片机切片而制成
标本。 如：整体制片法，涂片法，浸泽分离法，压片法等
2. 切片法：用一些具有支持能力又便于切割的介质浸
透到组织内部，起填充和支持作用，形成 具有一定硬度的包埋块，再在切片机上切 片，叫包埋切片法 。 如：石蜡包埋切片法、冰冻切片法、碳蜡切片法 等
第一章 概 述
三、制片技术的一般概述
（一）切片法的一般过程（石蜡包埋切片法为例）
1. 杀死、取材、固定 哺乳动物：氯仿、乙醚等麻醉，或断头法、空气栓塞法等 海产无脊椎动物：薄荷冰、水合氯醛、硫酸镁、淡水等麻醉 固定方法： 浸泡固定，注射或灌流法固定，活体原位固定或微波固定等