Th1Th2细胞因子谱检测在血液肿瘤患者化疗后中性粒细胞缺乏伴感染时的应用要点

Ｊ，Ｎｏｖｉｔｚｋｙ・Ｂａｓｓｏ Ｉ，Ｇｉｌｌ ＭＪ，ｅｔ ａ１．Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ｆｅ—
Ｐｒａｃｔｉｃｅ
ｂｒｉｌｅ ｎｅｕｔｒｏｐｅｎｉａ：ＥＳＭＯ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌ，２０１０，２１ ｍｄｑｌ９６．
Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ［Ｊ］．Ａｎｎ
Ｓｕｐｐｌ ５：ｖ２５２一ｖ２５６．ＤＯＩ：１０．１０９３／ａｎｎｏｎｃ／
Ａｅｔａ，２０１１，１８１３（５）：８７８４８８．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．
ｂｂａｍｃｒ．２０１１．０１．０３４．
［３］ Ａｎｄａｌｕｚ—ｏｊｅｄａ
ｏｆ Ｄ，Ｂｏｂｉｌｌｏ Ｆ，Ｉｇｌｅｓｉａｓ Ｖ，ｅｔ ａ１．Ａ ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｓｃｏｒｅ
ｔｅｎｔｉａｌ
ａｓ ａｌｌ
ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇ［Ｊ］．Ｃｒｉｔ
２４ ｈ ｈ
粒细胞缺乏时血液中Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子水平和正常体检患 者细胞因子水平无明显差异，提示中性粒细胞缺乏并不影响 Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平。当粒缺患者感染发热后，其细胞 因子ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ—ｄ和ＩＮＦ一叮水平升高，以ＩＬ－６、ＩＬ一 １０升高最为明显，说明Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱在血液肿瘤患 者化疗后粒细胞缺乏伴感染时可作为一个早期指导用药的 指标。 本研究结果也表明，脓毒血症的患者和发生感染性休克 的患者其ＩＬ－６和ＩＬ—ｌｏ水平明显高于血培养阴性者和无休 克者，这与国外一些研究相符合。Ｍｏｓｃｏｖｉｔｚ等＂１发现在具 有明显细菌感染的急症患者中，ＩＬ－６水平的测定可预测菌血 症的程度以及由于感染而导致的死亡；Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ等¨１报道 在败血症综合征患者血液中ＩＬ．１０水平增加与不利的临床 结果有关。国内研究发现ＩＬ一１０参与了感染性休克患者外 周血ＣＤ４＋淋巴细胞凋亡，而减少淋巴细胞的凋亡可以改善 脓毒血症患者的预后ｐ‘１“。这些研究都揭示了高水平ＩＬ－６ 和ＩＬ—ｌＯ是预后不良的指标，对ＩＬ－６和ＩＬ一１０水平明显升高 的粒缺伴感染患者采取更加积极的治疗，可能能改善这部分 患者的预后。 综上所述，对化疗后中性粒细胞缺乏伴感染的患者进行 Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱检测可指导临床早期用药，Ｔｈｌ／Ｔｈ２细 胞因子谱中的ＩＬ－６和ＩＬ—１０水平可作为判断病情严重程度 的指标，值得临床推广使用。
Ｋｉｔ，ＢＤ ＣＢＡ Ｈｕｍａｎ Ｔｈｌ／Ｔｈ２／Ｔｈｌ７ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ
等副作用，使得感染的发生率高且程度重，如不进行早期干
预处理，容易发生生命危险，据ｄｅ Ｎａｕｒｏｉｓ等…报道，血液肿 瘤患者粒缺合并感染的相关死亡率高达１１％。细胞因子是 指一类由多种细胞分泌的具有生物活性的小分子多肽，感染 患者血浆中细胞因子的变化要早于急性时相蛋白，与感染具 有良好的线性关系旧。，能作为感染的早期指标进行检测。笔 者对１２８例血液肿瘤患者化疗后中性粒细胞缺乏伴感染时 进行Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱测定并分析，现报告如下。
【摘要】
目的研究血液肿瘤患者化疗后中性粒细胞缺乏（简称粒缺）伴感染时的Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱的水平，探讨其
在病情发展中的意义。方法采用流式细胞微球阵列（ＣＢＡ）技术测定１２８例血液系统肿瘤化疗后粒缺伴感染患者（粒缺伴 感染组）、３０例血液系统肿瘤化疗后粒缺无感染患者（粒缺无感染组）的外周血Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱，同步进行血培养，对比 ３０例健康体检者（健康对照组），探讨Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱的临床意义。结果（１）３０例健康对照组和３０例粒缺无感染组的 Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。１２８例粒缺伴感染组ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＴＮＦ和ＩＮＦ－１水平均高 于粒缺无感染组（Ｐ＜０．０５），尤以ＩＬ－６、ＩＬ．１０升高最为明显。（２）１２８例粒缺伴感染组中血培养阳性２３例（脓毒血症患者），发 生感染性休克７例，其中血培养阳性者ＩＬ－６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ水平均明显高于血培养阴性者（Ｐ＜０．０５），感染性休克者ＩＬ－６、ＩＬ．１０ 水平均明显高于无感染性休克者（Ｐ＜０．０５）。结论（１）中性粒细胞绝对数不影响Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子水平；（２）根据Ｔｈｌ／Ｔｈ２ 细胞因子谱的改变，在血液肿瘤患者化疗后中性粒细胞缺乏伴感染时可作为一个早期指导用药的指标；（３）根据Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞 因子谱中的ＩＬ－６和ＩＬ．１０水平，可作为判断病情严重程度的指标。
万方数据
主国医垣盘查！！！！生！旦筮！！鲞筮！翅』！！翌！！！！ｇ！ｉ！！堕坠！！型塑：塑型！！！！：！尘：！！：№：！
表１各组细胞Ｔｈｌ／Ｔｈ２因子谱水平比较［ｐｇ／ｍｌ，Ｍ（Ｑ。一Ｑ，）］
２．２粒缺伴感染组中血培养阳性者和感染性休克者Ｔｈｌ／ Ｔｈ２细胞因子谱水平 １２８例粒缺伴感染组中血培养阳性
１
１资料与方法
１．１一般资料选取２０１３年４月至２０１５年１２月期间在 本院血液科住院治疗的化疗后中性粒细胞缺乏继发感染的 血液系统恶性肿瘤患者１２８例（粒缺伴感染组），男８６例，女 ４２例，年龄２９—９０（７４．１±１５．９）岁，原发病分别为急性白血 病２０例、多发性骨髓瘤４７例、骨髓增生异常综合征２８例、 恶性淋巴瘤３３例。选取同期３０例无感染的血液系统肿瘤 粒缺患者（粒缺无感染组），男１８例，女１２例，年龄２８～７９ （６６．１±１２．６）岁，原发病分别为急性白血病５例、多发性骨 髓瘤１１例、骨髓增生异常综合征８例、恶性淋巴瘤６例。另 外选取３０例同期本院体检中心健康志愿者（健康对照组）， 男２０例，女１０例，年龄３４～８２（６９．１ ４－１２．９）岁。各组性别、 年龄比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。 １．２标本及观察指标取各组对象的外周血２ ｍｌ，通过流
Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）。检验步骤如下：将２ｍｌ的外周血于无
菌条件下３７。Ｃ水浴２ｈ，之后分离备用。人Ｔｈｌ／Ｔｈ２／Ｔｈｌ７试 剂盒放置在室温１ｈ后将ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ．１０、ＴＮＦ、ＩＦＮ．１ 捕获微球混合，２００×ｇ离心５ ｍｉｎ弃上清液，加入同体积的 血清样本增强缓冲液，重悬微球避光反应３０ ｍｉｎ，每ＦＡＣＳ 管加入５０斗ｌ待测血清、５０斗ｌ混合捕获微球和标准品、５０“ｌ 藻红蛋白（ＰＥ）荧光抗体混匀。室温下避光反应３ ｈ，每管加
Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２００２，３０
ｐｒｏ・・ａｎｄ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｓ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｐｒｅ・－
ｓｅｖｅｒｅ
（１
Ｓｕｐｐ）：￥５８・￥６３．ＤＯＩ：１０．１０９７／００００３２４６－２００２０１００１－
ｄｉｃｔｉｏｎｉｎ
ｓｅｐｓｉｓ［Ｊ］．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ，２０１２，５７（３）：３３２－３３６． ［９］
析，计量数据采用中位数表示，各组ＩＬ一２、ＩＬ＿４、ＩＬ－６、ＩＬ一１０、 ＴＮＦ、ＩＦＮ一１水平的比较采用Ｗｉｌｃｏｘｏｎ秩和检验，Ｐ＜０．０５ 为差异有统计学意义。
２结果
２．１
各组Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平比较健康对照组和粒
缺无感染组的Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平比较差异均无统计 学意义（Ｐ＞０．０５）。粒缺伴感染组ＩＬ４、ＩＬ－６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ和 ＩＮＦ一＾ｙ水平均高于粒缺无感染组（Ｐ＜０．０５），尤以ＩＬ－６、ＩＬ— １０升高最为明显。见表１。
表３粒缺伴感染组中感染性休克者和无感染性休克者Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平比较
［ｐｇ／ｍｌ，Ｍ（Ｑ，～Ｑ，）］
３讨论
化疗后中性粒细胞缺乏伴感染是血液肿瘤患者经常要 面对的问题，也是导致患者死亡的重要原因之一。血液肿瘤 患者免疫力低下，中性粒细胞缺乏时感染发生率高、程度重， 如不及时干预治疗，极易发生感染性休克，甚至死亡。目前， 临床常用白细胞计数、ｃ反应蛋白、血培养作为感染指标。 因为中性粒细胞缺乏患者骨髓处于抑制状态而白细胞计数 无法反映机体实际炎症情况；ＣＲＰ是在感染和组织损伤时血 浆浓度快速急剧升高的主要急性期蛋白，是由肝脏合成、受 多种细胞因子调节的蛋白，因此滞后于细胞因子的改变；血 培养是诊断细菌或真菌感染的金标准，但是由于培养时间长 及阳性率不高，这就可能导致错失最佳的治疗时机。为提高 对中性粒细胞缺乏伴感染患者的早期诊断率和准确率，临床 亟需开发新的感染检测手段。 在机体中细胞间通过相互作用来协调各器官、组织、细 胞以抵抗各种有害物质的损害、炎症及细菌感染，细胞因子 在其中发挥了重要作用，被学者认为是评估感染性疾病的潜 在指标∞Ｊ。细胞因子包括白细胞介素、干扰素、集落刺激因 子、肿瘤坏死因子、趋化性细胞因子和生长因子六类，其中， ＩＬ－６、ＩＬ一１０及ＴＮＦ一仅是细胞因子中比较重要的指标之一，是 参与全身炎症反应综合征、脓毒血症、败血症、多器官功能障 碍综合征的重要炎性介质，当机体产生全身感染时，它们在 血液中的浓度会迅速上升Ｈ一。 Ｓｔｅｉｎｍｅｔｚ等＂１的研究发现发热前７２—４８ ｈ的ＩＬ－６水平 无明显变化，发热前２４
ｍｌ洗液，２００×ｇ离心５ ｍｉｎ，每管加３００山洗液，于４ ｈ内
ＦＡＣＳ
在流式细胞分析仪（ＢＤ
Ｃａｌｉｂｕｒ，美国）上进行检测。
用ＣＢＡ软件对检测获取的数据进行分析，计算出样本中ＩＬ． ２、ＩＬ４、ＩＬ－６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ、ＩＦＮ一１的水平。 １．４统计学处理 采用ＳＰＳＳ １９．０统计软件进行统计分
ａｎ—
ｓｅｖｅｒｉｔｙ［Ｊ］．Ｃｒｉｔ
Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，１９９４，２２
ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６［Ｊ］．Ｂｉｏ— ［８］
（７）：１１０２—１１０７．
Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ Ａ，Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ Ｃ，Ｍｏｌｄａｗｅｒ ＬＬ．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１０：Ａ ｃｏｍｐｌｅｘ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏ—
阳性者ＩＬ－６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ水平均明显高于血培养阴性者 （Ｐ＜０．０５），感染性休克者ＩＬ－６、ＩＬ一１０水平均明显高于无感 染性休克者（Ｐ＜０．０５），见表２—３。
２３例（脓毒血症患者），发生感染性休克７例。其中血培养
表２粒缺伴感染组中血培养阳性者和血培养阴性者Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱水平比较［ｐｇ／ｍｌ，Ｍ（Ｑ。～Ｑ，）］
虫国匿』匝盘麦垫！！至ｉ旦筮！！鲞筮！翅』！！婴生！！ｇ！ｉ！！堕坠Ｙ堂鱼！：丛型！！！ｉ：ｙ！！：！！：堂：！
・７３７・
・诊疗经验・
Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子谱检测在血液肿瘤患者化疗后 中性粒细胞缺乏伴感染时的应用
石岳坚郑翠苹蔡小平林弼靖 ３２５０００浙江省温州，温州市中心医院血液科
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－１３７２．２０１６．０５．０２８
ＩＬ－６水平则开始明显升高，发热后
参考文献
ＩＬ－６水平仍高于正常水平。国外研究提示ＩＬ一１０也广
［１］ｄｅ
ＮａｕｒLeabharlann Baiduｉｓ
泛参与感染性疾病，它能阻碍感染时发生的过重保护性免疫 反应引起的免疫病理损害的发展∞Ｊ。在细菌内毒素激活的 炎症级联反应中，最先激活的因子是ＴＮＦ一仪，它能诱导产生 ＩＬ．１Ｂ、ＩＬ－６和ＩＬ一８。本研究发现血液肿瘤患者化疗后中性
万方数据
生国匡盟苤查垫！鱼至！旦筮！！鲞笠！翅』！！翌堂堕垦！！！！堕！！ｚ出堂：丛型！Ｑ！！：！丛：！！：№：ｉ
［２］
Ｓｃｈｅｌｌｅｒ Ｊ，Ｃｈａｌａｒｉｓ Ａ，Ｓｃｈｍｉｄｔ—Ａｒｒａｓ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｐｒｏ—ａｎｄ ｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ ｒｅｍｉａ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅ
【关键词】Ｔｈｌ细胞／代谢；Ｔｈ２细胞／代谢；血液肿瘤／药物疗法／代谢／并发症；中性粒细胞减少／并发症／代谢；感染／
并发症／代谢 基金项目：温州市科技局课题（Ｙ２０１３０２２５） 化疗后骨髓抑制引起的中性粒细胞缺乏（简称粒缺）是 最常见的化疗毒副作用之一，由于血液肿瘤患者本身免疫力 低下，加之化疗所致的免疫抑制、中性粒细胞缺乏、黏膜损伤 式细胞微球阵列（ＣＢＡ）技术检测细胞因子水平，同步进行血 培养。 １．３细胞因子检测方法检测需要的试剂为ＣＢＡ人Ｔｈｌ／ Ｔｈ２／Ｔｈｌ７试剂盒（ＢＤ