何首乌有效成分对大鼠骨癌痛的镇痛效果

何首乌有效成分对大鼠骨癌痛的镇痛效果现代研究中,何首乌的多种化学成分具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等作用。何首乌中的2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷具有抗炎镇痛的作用,可能与抑制局部炎症介质如前列腺素和5-羟色胺

的释放、直接抑制PGE2和COX-2合成有关。

骨癌痛是一种典型的癌痛,以爆发痛(Breakthrough)、持续性背景痛(Onging pain)、痛觉超敏(Allodynia)和痛觉过敏(Hyperalgesia)为主要临床表现。临床上阿片类药物仍然是主要镇痛药,但长时间使用会引起细胞表面阿片受体减少,同时也会产生的严重不良反应如呼吸抑制、恶心呕吐等。

目的为了探讨中药何首乌有效成分是否有镇痛作用、镇痛效果如何等问题,通过建立大鼠胫骨骨癌痛模型,从行为学、体重变化和大鼠机械痛阈等三方面改变来验证模型建立是否成功,选择成功的骨癌痛大鼠模型进行何首乌提取物二苯乙烯苷、大黄素和儿茶素灌胃实验,并与盐水灌胃作对照,观察何首乌提取物的镇痛效果。方法1.骨癌痛大鼠模型建立及评价36只雌性SD大鼠随机分成三组:A 组为正常空白对照,6只;B组为大鼠建模注射无菌生理盐水,6只;C组为大鼠左后腿胫骨注射乳腺癌细胞(walker256)建立骨癌痛模型,共24只。

大鼠机械痛阈(Paw Withdrawal Threshold,PWT)使用von-Frey纤维丝测量。在术前1天、术后第1天,术后第3、5、7、10、14天对所有大鼠进行左后腿痛阈测量,并同时观察大鼠行为学改变即行走有无跛脚、手术侧脚趾舔舐次数,记录大鼠体重变化,观察其进食情况并注意毛发颜色等情况的改变。

在术后第14天测量结束后每组随机处死一只大鼠,取左后腿骨组织进行切片、HE染色,观察对比肿瘤细胞对骨组织的侵袭、破坏情况。2.观察中药何首乌

不同成分灌胃对大鼠机械痛阈的影响在建模后的饲养过程中,由于C组出现8只大鼠死亡,故只选取余下的16只大鼠继续进行实验。

C组16只大鼠按灌胃药物的不同随机分成C1、C2、C3、C4四组,每组4只。建模后第14、15、16天连续对C1～C4组大鼠分别灌胃生理盐水(2ml)、二苯乙烯苷(60mg/ml,2ml)、大黄素(60mg/ml,2ml)和儿茶素(60mg/ml,2ml);每次灌胃前、灌胃后0.5h、灌胃后1.0h测量大鼠左脚掌痛阈值。

测量结束后对其行为学改变进行短暂的观测,观察手术侧脚趾舔舐次数、进食情况和毛发色泽。结果结果显示:(1)癌痛模型喂养自第5天起,与A、B两组比较,C组大鼠食欲减退、行为学出现明显改变,包括部分大鼠出现跛脚,舔舐撕咬

手术侧大鼠情况增加,大鼠攻击性变强甚至部分大鼠出现死亡、机械痛阈值降低(P<0.05);(2)第10天可见C组大鼠食欲明显减退,毛发变暗,体重维持不变甚至减轻少许,左后腿肿瘤明显可见,行走出现明显障碍;(3)第14天病理组织切片显示骨质明显破坏,癌细胞浸润严重,骨小梁等结构排列混乱;且A、B两组大鼠食欲正常、行为学未出现明显改变、机械痛阈值无明显差异及骨质结构正常

(P>0.05)。

(4)骨癌痛大鼠后期将伴随严重的骨质破坏等现象,因此灌胃时机选择模型

建立后第14天至16天进行干预。在连续三天灌胃实验中,C2二苯乙烯苷组大鼠各时点的机械性痛阈值均较C1灌胃生理盐水、C3大黄素、C4大黄素组明显增加(P<0.05)。

C2组大鼠模型灌胃0.5h和灌胃后1.0h后与灌胃前机械性痛阈值相比明显

升高(P<0.05),但灌胃0.5h和灌胃后1.0h后的机械性痛阈值无统计学意义,灌胃结束后,C2组食欲出现好转,但体重变化不明显。结论1.C组大鼠骨癌痛模

型建立成功,机械痛阈、行为学、体重、食欲和外观与A、B两组大鼠出现明显不同;2.二苯乙烯苷灌胃可以有效提高骨癌痛大鼠痛阈,缓解疼痛,降低痛觉过敏,效果强于大黄素、儿茶素和生理盐水。

综上所述,本研究提示:何首乌可有效降低大鼠的骨癌痛,其有效单体成分是二苯乙烯苷。