蛋白质化学

组卷测试
一：填空题
1.确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用________________，然后用________________技术分离水解后的混合肽段。

2.我国于________________年由________________、________________和________________等单位在世界上首次合成了具有生物活性的蛋白质--牛胰岛素。

3.1953年________________第一次用化学方法合成了具有生物活性的多肽--催产素，因而获得诺贝尔奖。

4.维持蛋白质构象的化学键有________________、________________、________________、
________________、________________和________________。

5.一个带负电荷的蛋白质可牢固地结合到阴离子交换剂上，因此需要一种比原来缓冲液
pH________________和离子强度________________的缓冲液，才能将此蛋白质洗脱下来。

6.肌球蛋白本身具有________________酶的活性，所以当ATP释放能量时，就引起肌肉收缩。

7.一般来说，球状蛋白质的________________性氨基酸侧链位于分子内部，________________性氨基酸侧链位于分子表面。

8.许多钙结合蛋白都存在有________________图象，即它们的钙结合位点都由一个________________的结构单位构成。

9.人工合肽时常用的缩合剂有________________。

10.范斯莱克(V anSlyke)法测定氨基氮主要利用________________与________________作用生成
________________。

11.糖蛋白的糖基大多结合在蛋白质的________________残基、________________残基与
________________残基上。

12.当蛋白质的非极性侧链避开水相时，疏水作用导致自由能________________。

13.当溶液中盐离子强度低时，可增加蛋白质的溶解度，这种现象称________________。

当溶液中盐离子强度高时，可使蛋白质沉淀，这种现象称________________。

14.常用的肽链N端分析的方法有________________法、________________法、________________法和________________法。

C端分析的方法有________________法和________________法等。

15.当疏水侧链折叠到蛋白质分子内部时，环境中水的熵________________。

16.用________________试剂可区分丙氨酸和色氨酸。

17.利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有________________和
________________。

18.影响血红蛋白与氧结合的因素有________________、________________、________________和
________________等。

19.通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的________________、
________________和________________三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。

20.蛋白质的生理价值可用下式表示：________________×100。

21.氨基酸在等电点时，主要以________________离子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以
________________离子形式存在，在pH<pI的溶液中，大部分以________________离子形式存在。

22.凝集素能专一地识别细胞表面的________________并与之结合，从而使细胞与细胞相互凝集。

23.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱(NaOH)来滴定
________________上放出的________________。

24.R.Y aloW的主要贡献是建立了________________。

25.DEAE-纤维素是一种________________交换剂，CM-纤维素是一种________________交换剂。

26.蛋白质的二级结构有________________、________________、________________、________________和________________等几种基本类型。

27.胰岛素原转变为胰岛素的过程是在________________(细胞器)进行。

分泌颗粒中的胰岛素是通过
________________离子与________________氨酸残基侧链上的氮原子配位，形成________________聚体。

28.Henderson-Hasselbalch方程为________________。

29.氨基酸的等电点(pI)是指________________。

30.最早提出蛋白质变性理论的是________________。

31.________________不是α-氨基酸，它经常改变肽链折叠的方式。

32.氨基酸的结构通式为________________。

33.肽链的形式有________________、________________、和________________三种，其中以
________________最常见。

34.测定蛋白质浓度的方法主要有________________、________________、________________和
________________。

35.在生理条件下(pH7.0左右)，蛋白质分子中的________________侧链和________________侧链几乎完全带正电荷，但是________________侧链则带部分正电荷。

二：是非题
1.[ ]多数寡聚蛋白质分子其亚基的排列是对称的，对称性是四级结构蛋白质分子的最重要的性质之一。

2.[ ]血红蛋白与肌红蛋白均为氧载体，前者是一个典型的别构(或变构)蛋白，因而与氧结合过程中呈现协同效应，而后者却不是。

3.[ ]免疫球蛋白是一种糖蛋白，它由两条重链和两条轻链组成。

4.[ ]只有在很高或很低pH时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。

5.[ ]从理论上说，可用Edman降解法测定任何非封闭多肽的全部氨基酸顺序。

6.[ ]亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。

7.[ ]胰岛素原(Proinsulin)是信使核糖核酸(mRNA)翻译后的原始产物。

8.[ ]在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。

9.[ ]变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的。

10.[ ]蛋白质的亚基(或称亚单位)和肽链是同义的。

11.[ ]测定别构酶的相对分子质量可以用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

12.[ ]水溶液中蛋白质分子表面的氢原子相互形成氢键。

13.[ ]蛋白质所含的天冬酰胺及谷氨酰胺两种残基是生物合成时直接从模板中译读而来。

14.[ ]疏水作用是使蛋白质空间结构稳定的一种非常重要的次级键。

15.[ ]羧肽酶A的分子外部主要是α-螺旋构象，分子内部主要是β-折叠的构象。

16.[ ]蛋白质的氨基酸顺序(一级结构)在很大程度上决定它的构象(三维结构)。

17.[ ]血红蛋白和肌红蛋白的功能都是运输氧。

18.[ ]一个化合物如能和茚三酮反应生成紫色，说明这化合物是氨基酸、肽或蛋白质。

19.[ ]蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。

20.[ ]转铁蛋白是一种糖蛋白。

三：单选题
1.[ ]一个谷氨酸溶液，用5m1 1mo1/LNa0H来滴定，溶液的pH从1.0上升到7.0，下列数值中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸的毫摩尔数?
A.1.5
B.3.0
C.6.0
D.12.0
E.18.0
2.[ ]进行疏水吸附层析时，以下哪种条件比较合理
A.在有机溶剂存在时上柱，低盐溶液洗脱
B.在有机溶剂存在时上柱，高盐溶液洗脱
C.低盐条件下上柱，高盐溶液洗脱
D.高盐溶液上柱，按低盐，水和有机溶剂顺序洗脱。

E.低盐缓冲液上柱，低盐洗脱
3.[ ]下列氨基酸中除哪种外都是哺乳动物的必需氨基酸？
A.苯丙氨酸
B.赖氨酸
C.酪氨酸
D.亮氨酸
E.甲硫氨酸
4.[ ]下列有关α-螺旋的叙述哪个是错误的?
A.分子内的氢键使α-螺旋稳定减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定
B.减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定
C.疏水作用使α-螺旋稳定
D.在某些蛋白质中，α-螺旋是二级结构中的一种类型
E.脯氨酸和甘氨酸残基使α-螺旋中断
5.[ ]下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转?
A.丙氨酸
B.甘氨酸
C.亮氨酸
D.丝氨酸
E.缬氨酸
6.[ ]维持蛋白质三级结构主要靠
A.氢键
B.离子键
C.疏水作用
D.范德华力
E.二硫键
7.[ ]下列哪组反应是错误的?
A.葡萄糖－莫利希(Molisch反应)
B.胆固醇－李-伯(Libermann-Burchard)反应
C.色氨酸－坂口(Sakaguchi)反应
D.氨基酸－茚三酮反应
E.多肽－双缩脲反应
8.[ ]血红蛋白的氧合曲线呈
A.双曲线
B.抛物线
C.S形曲线
D.直线
E.钟罩形
9.[ ]蛋白质一级结构与功能关系的特点是
A.相同氨基酸组成的蛋白质，功能一定相同。

B.一级结构相近的蛋白质，其功能类似性越大。

C.一级结构中任何氨基酸的改变，其生物活性即消失。

不同生物来源的同种蛋白质，其一级结构相同
D.不同生物来源的同种蛋白质，其一级结构相同。

E.以上都不对。

10.[ ]下列关于多肽Glu-His-Arg-V al-Lys-Asp的叙述，哪个是错的?
A.在pH12时，在电场中向阳极移动
B.在pH3时，在电场中向阴极移动
C.在pH5时，在电场中向阴极移动
D.在pH11时，在电场中向阴极移动
E.该多肽的等电点大约在pH8
四：多选题
1.[ ]下述原因中哪些会导致血红蛋白与氧亲和力的下降?
(1).提高红细胞内2，3-二磷酸甘油酸的水平
(2).酸中毒
(3).提高的水平
(4).一分子氧和脱氧血红蛋白分子四个结合位中的一个结合
A.1,2,3
B.1,3
C.2,4
D.4
E.1,2,3,4
2.[ ]下列哪些是结合蛋白质?
(1).粘蛋白
(2).细胞色素C
(3).血红蛋白
(4).清蛋白
A.1,2,3
B.1,3
C.2,4
D.4
E.1,2,3,4
3.[ ]下列关于γ-免疫球蛋白的叙述哪些是正确的?
(1).每一个免疫球蛋白作为抗体分子含有两个与抗原结合的部位
(2).多发性骨髓瘤患者排泄的尿中含有不完整的免疫球蛋白(本琼氏蛋白)
(3).免疫球蛋白重链和轻链的C-末端氨基酸顺序是恒定的，而N-末端的氨基酸顺序是可变的
(4).使免疫球蛋白肽链连接的唯一化学键具有非共价键的性质
A.1,2,3
B.1,3
C.2,4
D.4
E.1,2,3,4
4.[ ]下列氨基酸中哪些具有分支的碳氢侧链?
(1).缬氨酸
(2).组氨酸
(3).异亮氨酸
(4).色氨酸
A.1,2,3
B.1,3
C.2,4
D.4
E.1,2,3,4
5.[ ]下列哪些蛋白质具有四级结构?
(1).血红蛋白
(2).烟草斑纹病毒外壳蛋白
(3).乳酸脱氢酶
(4).肌红蛋白
A.1,2,3
B.1,3
C.2,4
D.4
E.1,2,3,4
五：问答题
1.凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交链的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快?
2.若细胞色素C，β-乳球蛋白，一种未知蛋白质和血红蛋白用凝胶过滤分离时，其洗脱液体积分别为118、58、37与24m1，试问未知蛋白质的相对分子质量。

(假定所有蛋白质都是球形的，相对分子质量都在凝胶过滤的分级分离范围内。

)
3.正常人血红蛋白(HbA)的β-链经胰蛋白酶水解可得一肽段为:V a1-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys镰刀状贫血病血红蛋白(HbS)的β-链经胰蛋白酶水解可得一肽段为：V a1-His-Leu-Thr-Pro-V al-Glu-Lys试讨论:<br>(1)在pH5.0和8.0时，这两个八肽的电泳行为。

<br>(2)若正常的八肽被一个六肽取代，N端的5个
氨基酸不变，在pH8.0时，此六肽在电场中不移动，问C端是什么氨基酸才会有这种电泳行为。

各解离基团的pK值如下：末端7.0，末端C00H3.4，咪唑基6.0，γ-COOH4.0，ε-10.8。

4.用阳离子交换树脂分离下列氨基酸对，用pH7.0的缓冲液洗脱时那种氨基酸先被洗脱下来?(l)Asp和Lys(2)Arg和Met(3)Glu和V a1(4)Gly和Leu(5)Ser和A1a
5.(1)一个A1a、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合液在pH3.9时进行纸电泳，指出哪些氨基酸向阳极移动?哪些氨基酸向阴极移动?<br>(2)带相同电荷的氨基酸如G1y和Leu在纸电泳时常常稍能分开，解释其原因。

<br>(3)假如有一个A1a、V al、Glu、Lys和Thr的混合液，在pH
6.0进行电泳，然后用茚三酮显色。

画出电泳后氨基酸的分布图。

分别标明向阳极或阴极移动、停留在原点和分不开的氨基酸。

6.血红蛋白(Hb)是由两个α亚基和两个β-亚基组成的四聚体，它的α-和β-亚基的结构很类似于肌红蛋白(Mb)。

但是Mb中许多亲水残基在Hb中却被疏水残基取代。

<br>问(1)这种现象怎样与疏水残基折叠到分子内部的原则相-致?<br>(2)在维持Hb四级结构的作用力方面，你能得出什么结论?。