兽医生物制品学

兽医生物制品学：是以预防兽医学和生物工程学理论为基础，研究动物传染病和寄生虫病的免疫预防、诊断和治疗用生物行制品的制造理论和技术、生产工艺、制品质量检验与控制及保藏和使用方法，以增强动物机体特异性和非特异性免疫力，及时准确诊断动物疫病，并给予特异性治疗，防止疫病传播的综合性应用学科。

兽医生物制品：是根据免疫学原理，利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质，专供相应的疫病诊断、治疗或预防之用。

疫苗：凡接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗，包含细菌性疫苗、病毒性疫苗和寄生虫行疫苗。

兽医生物制品学的应用：免疫预防；诊断；治疗

生物制品安性质分类：疫苗、类毒素、诊断制品、抗病血清、微生物制剂、副免疫制品。

疫苗安抗原的性质和制备工艺分为：活疫苗、死疫苗、基因疫苗

活疫苗与死疫苗的优缺点比较：活疫苗可以在免疫动物体内繁殖，能刺激机体产生全面的系统免疫反应和局部免疫反应；免疫力持久，有利于清除局部野毒；产量高，生产成本低。但是该类疫苗残毒在自然界动物群体内持续传递后有毒力增强和返祖危险；有不同抗原的干扰现象；要求在低温、冷暗的条件下运输和储存。死疫苗不能在免疫动物体内繁殖，比较安全，不发生全身性副作用，无毒力返祖现象；有利于多价或多联等混合疫苗；制备稳定，受外界环境影响小，有利于保存和运输。但该类疫苗生产成本高，需多次免疫。而且一般只能诱导机体产生体液免疫和免疫记忆，故常需用佐剂或携带系统来增强其免疫效果。

灭活：指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性，但尽可能不影响其免疫原性。或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性，以避免补体对诊断试验的干扰作用。用于灭活微生物的化学试剂或药物。

微生物致弱：是指通过各种方法使病原微生物的致病性降低或丧失，但其它生物学活性以及免疫原性并未发生本质性改变。

灭活剂：用于灭活微生物的化学试剂或药物

灭活剂的种类：

1.甲醛溶液

2.常用烷化剂：

3.苯酚：

4.结晶紫\甲基青莲\甲紫

5.β-丙酰内酯

影响灭活作用的因素

（1）灭活剂特异性（2）微生物种类与特性（3）灭活剂浓度（4）灭活剂温度（5）灭活时间（灭活时间与灭活剂浓度和作用温度密切相关）（6）酸碱度（在微酸性时灭活速度慢，抗原性保持较好；碱性时灭活速度快，担抗原性易受破坏（7）有机物存在。

保护剂：又称稳定剂，指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。保护剂是保护微生物和寄生虫等活力和免疫力及酶和激素等生物活性的一类物质，还包括细菌或病毒的营养液、赋形剂和抗氧化剂。

疫苗冻干保护剂组成

1. 营养液：

可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分；可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，增加溶解度

2. 赋形剂：防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度。

3. 抗氧化剂：抑制冻干制品中的酶作用，增加生物活性物质在冻干后贮存期间的稳定性，如维生素C、维生素E和硫代硫酸钠等。

①防止活性物质失去结构水及阻止结构水形成结晶而导致生物活性物质的损伤；

②降低细胞内外的渗透压差、防止细胞内结构水结晶，以保持细胞的活力；

③保护或提供细胞复苏所需的营养物质，有利于生活力的复苏和迅速修复自身。佐剂：传统讲：当一种物质先于抗原或与抗原混合或同时注射于动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥其辅佐作用者，都称之为佐剂新概念：凡是可增强抗原特异性免疫应答的物质均称为佐剂。

佐剂种类：

1. 按佐剂物理性质：颗粒型佐剂、非颗粒型佐剂

2. 按佐剂的生物学性质（即Ballanti分类法）：微生物及其组分、非微生物物质

3. 按佐剂在体内存留的时间：贮存型佐剂、非贮存型

油乳佐剂：属于一种储存型佐剂，是指一类由油类物质和乳化剂按一定比例混合形成的佐剂。

乳剂：是将一种溶液或干粉分散成细小的微粒，混悬于另一不相溶的液体中所成的分散体系。被分散的物质称为分散相（内相），承受分散相的液体称连续相（外相），两相间的界面活性物质称为乳化剂。

乳化剂的种类：1.天然乳化剂：来自植物、动物2.人工合成乳化剂：分离子型（阴离子型、阳离子型）和非离子型：多元醇或聚合多。

油乳佐剂的制备（以制备白油佐剂为例）：

1、白油佐剂制备：取7号白油470ml，司本-80 30ml，硬脂酸铝10g，混合后用力振摇，116度高温灭菌，取30-40ml，冷却至50度左右，再用力振摇至透明均质状，即为白油佐剂。

2、乳化：（1）、取自制的组织灭活液5ml，加入2~4%的吐温-80混匀。（2）、将白油佐剂与水按3:1~2:1混匀。（3）、用匀浆机或者注射器乳化（4）、取乳化后的乳剂滴入水中，检测乳化效果。

生物制品菌（毒）种标准：生物学特性明显、历史清楚；遗传学上相对纯一与稳定；反应原性与免疫原性优良；毒力应在规定范围以内

弱菌（毒）种选育

自然弱毒株的选育：1.同源动物（如ND LaSota 株）、2.异源动物（如MD FC126株）人工诱变致弱： 1.化学途径：亚硝基胍、醋酸铊、洗衣粉 2.物理途径：高温、紫外线3.生物途径：适应非易感动物或细胞；杂交减毒

细菌培养技术

（一）细菌分离与培养

1.需氧菌的分离培养：常用营养琼脂平板分离

方法：划线接种法；倾注培养法

2.厌氧菌的分离培养：多数在二氧化碳条件下进行。最简便的培养方法使用有盖玻璃容器，放入接种的培养物后，点燃蜡烛，加盖密闭容器，由于燃烧产生二氧化碳，燃烛即刻熄灭。此时容器内含有较高的二氧化碳浓度，再将容器放入适宜温度培养即可。

（二）细菌的规模化培养

1.种子接种量：通常为1%~2%

2.培养时间：多数在对数繁殖后期至稳定前期活菌数量高，生命力最强，宜于收获。

3.培养方法：⑴固体表面培养法⑵液体静置培养法适于一般性细菌疫苗生产⑶液体深层通气培养发法⑷透析培养法