肿瘤基因治疗简介
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2.研究意义：基因治疗是以改变遗传物质为基础的生物医学治疗，
是将正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入靶细胞，直接针 对疾病的根源,即异常的基因本身而发挥治疗作用。肿瘤基因治疗因具 有特异性、有效性的特点而受到越来越多的关注，而且许多实验取得 了满意的效果，虽然临床治疗的效果不够理想，但是对随着癌变机制、 癌细胞信号转导、癌细胞遗传特征研究的深入，大批新基因新靶标的 发现以及基因操作新技术的发展，肿瘤基因治疗将会有大的突破，这 为我们征服肿瘤带来了新的希望。
Presenter: XXX
1.研究背景：肿瘤是严重影响人类身体健康的重大疾病之一，恶性
肿瘤传统疗法如放疗、化疗、手术治疗的局限性促使人们寻找新的抗 肿瘤方法。随着对肿瘤发生发展分子机制认识的深入，人们已意识到 肿瘤是一种基因病，肿瘤的发生发展是一个复杂的、涉及到众多基因 的过程，纠正发生缺陷的基因可为肿瘤的治疗提供新的希望。肿瘤的 基因治疗已经成为肿瘤治疗的研究热点之一。
在很多实验中验证了RNAi的可行性和有效性，但用于临床还需要进一步的研 究。
研究方法与结果：以 Effects of DNAzyme siRNA targeting AKT1 on the growth of human T leukmic cells 为例简要说明。
Method： In the present study, we used DNAzyme and siRNA technology to inhibit AKT1 expression and evaluated the effects of DNAzymes and siRNA as therapeutic agents to treat leukemic cells. We designed two AKT1 specific DNAzymes (DRz1 and DRz2) and siRNA to test their effects on the apoptosis of leukemic cells.
抑癌基因(tumor suppress gene)也称为抗癌基因。在被激活的情况下它们具有 抑制细胞增殖的作用，但在一定情况下被抑制或丢失后可减弱甚至消除抑癌 作用。 p53基因（与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因，分子量53KD）及p16基 因的研究是热点。
研究进展： Avery—Kiejda等发现人黑色素瘤p53基因异常表达不能调控细胞凋 亡和细胞周期，并且能导致黑色素瘤细胞的增殖。 Senatus等 发现了一种p53 羧基末端肽。可重新恢复p53的瘤细胞吞噬作用，而对其他的良性肿瘤及人外 周骨髓瘤细胞的作用较小。p16是1993年发现的抑癌基因，主要在G1期至S期 的转换过程中发挥对细胞周期的调节作用，同cyclinD1 竞争与周期依赖性蛋白 激酶CDK4/CDK6结合，抑制其激酶的活性，阻止细胞从G1期进入S期,从而抑制 细胞增殖。王磊等利用基因重组技术将p53、p16基因构建成一个表达载体转 染肝癌细胞后可抑制肝癌细胞增殖过度。
百度文库
RNA干扰(RNA interference，RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来 病毒侵犯的防御机制，是指内源性或外源性与靶基因的转录产物mRNA存在同 源互补序列的双链RNA(dsRNA)在细胞内特异地降解该mRNA，从而致使特异性 的基因有效封闭的过程，是一种序列特异性的转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing，PTGS)
1.肿瘤基因治疗的原理是将目的基因用基因转 移技术导入靶细胞，使其获得特定的功能，继 而执行或介导对肿瘤的杀伤和抑制作用或保护 正常细胞免受化学治疗与放射治疗的严重伤害。
2.肿瘤基因治疗的主要策略包括：基因沉默治 疗、抑癌基因治疗、免疫基因治疗、自杀基因 疗法、抑制肿瘤血管生成基因治疗、肿瘤多药 耐药基因治疗、抗端粒酶疗法和多基因联合疗 法等。
与p53基因相比，p16基因异常率高，且特异性作用于CDK4／CDK6，且其基因 长度仅为p53基因的1/4,便于重组与导入。对p16基因及其家族成员的不断深 入研究将为人类对肿瘤发生、发展及治疗的作用机制提供新的思路和线索。
一些重要的信号通路和基因在肿瘤的发生发展中起关键作用，RNAi主要通过 降低这些信号通路里的关键分子及一些重要癌基因的表达水平来达到治疗目 的。
研究进展：最初将dsRNA应用于哺乳动物细胞时，当转入的dsRNA长度>80nt 时，会导致细胞死亡。所以实际应用过程中选择短链RNA，即siRNA。 Brummekamp等用病毒载体将siRNA导入人的胰腺癌细胞，可特异且稳定地抑 制癌基因K-RASV12的表达，该基因的受抑使得肿瘤生长能力及恶性程度降低。 Ding 等将人工合成的 siRNA转染乳腺癌细胞，降低VEGF（vascular endothelial grow factor）表达水平，抑制肿瘤内微血管的形成。Braicu 等利用RNAi技术， 抑制三阴乳腺癌人类细胞株（Hs578TH）中p53蛋白(一种肿瘤抑制蛋白，人类 乳腺癌细胞表达突变型p53蛋白具有抗凋亡作用。)的表达。结果发现,p53 表 达明显下调，促进肿瘤细胞的凋亡，抑制肿瘤细胞增殖。
Zhang等针对丝/苏氨酸激酶基因（在多种肿瘤中高表达的激酶，参与肿瘤的 生长、分化、转移和生存）将一段siRNA转染白血病患者的体外细胞，检测出 ATK基因（AKT1 is a member of the serine{丝氨酸}/threoine{苏氨酸} AGC protein kinase{激酶} family involved in cancer‘s metabolism{新陈代谢}, growth, proliferation{扩散}, and survival. It is a potential target for cancer gene therapy.） 的mRNA和蛋白质表达水平显著下调。
是将正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入靶细胞，直接针 对疾病的根源,即异常的基因本身而发挥治疗作用。肿瘤基因治疗因具 有特异性、有效性的特点而受到越来越多的关注，而且许多实验取得 了满意的效果，虽然临床治疗的效果不够理想，但是对随着癌变机制、 癌细胞信号转导、癌细胞遗传特征研究的深入，大批新基因新靶标的 发现以及基因操作新技术的发展，肿瘤基因治疗将会有大的突破，这 为我们征服肿瘤带来了新的希望。
Presenter: XXX
1.研究背景：肿瘤是严重影响人类身体健康的重大疾病之一，恶性
肿瘤传统疗法如放疗、化疗、手术治疗的局限性促使人们寻找新的抗 肿瘤方法。随着对肿瘤发生发展分子机制认识的深入，人们已意识到 肿瘤是一种基因病，肿瘤的发生发展是一个复杂的、涉及到众多基因 的过程，纠正发生缺陷的基因可为肿瘤的治疗提供新的希望。肿瘤的 基因治疗已经成为肿瘤治疗的研究热点之一。
在很多实验中验证了RNAi的可行性和有效性，但用于临床还需要进一步的研 究。
研究方法与结果：以 Effects of DNAzyme siRNA targeting AKT1 on the growth of human T leukmic cells 为例简要说明。
Method： In the present study, we used DNAzyme and siRNA technology to inhibit AKT1 expression and evaluated the effects of DNAzymes and siRNA as therapeutic agents to treat leukemic cells. We designed two AKT1 specific DNAzymes (DRz1 and DRz2) and siRNA to test their effects on the apoptosis of leukemic cells.
抑癌基因(tumor suppress gene)也称为抗癌基因。在被激活的情况下它们具有 抑制细胞增殖的作用，但在一定情况下被抑制或丢失后可减弱甚至消除抑癌 作用。 p53基因（与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因，分子量53KD）及p16基 因的研究是热点。
研究进展： Avery—Kiejda等发现人黑色素瘤p53基因异常表达不能调控细胞凋 亡和细胞周期，并且能导致黑色素瘤细胞的增殖。 Senatus等 发现了一种p53 羧基末端肽。可重新恢复p53的瘤细胞吞噬作用，而对其他的良性肿瘤及人外 周骨髓瘤细胞的作用较小。p16是1993年发现的抑癌基因，主要在G1期至S期 的转换过程中发挥对细胞周期的调节作用，同cyclinD1 竞争与周期依赖性蛋白 激酶CDK4/CDK6结合，抑制其激酶的活性，阻止细胞从G1期进入S期,从而抑制 细胞增殖。王磊等利用基因重组技术将p53、p16基因构建成一个表达载体转 染肝癌细胞后可抑制肝癌细胞增殖过度。
百度文库
RNA干扰(RNA interference，RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来 病毒侵犯的防御机制，是指内源性或外源性与靶基因的转录产物mRNA存在同 源互补序列的双链RNA(dsRNA)在细胞内特异地降解该mRNA，从而致使特异性 的基因有效封闭的过程，是一种序列特异性的转录后基因沉默(posttranscriptional gene silencing，PTGS)
1.肿瘤基因治疗的原理是将目的基因用基因转 移技术导入靶细胞，使其获得特定的功能，继 而执行或介导对肿瘤的杀伤和抑制作用或保护 正常细胞免受化学治疗与放射治疗的严重伤害。
2.肿瘤基因治疗的主要策略包括：基因沉默治 疗、抑癌基因治疗、免疫基因治疗、自杀基因 疗法、抑制肿瘤血管生成基因治疗、肿瘤多药 耐药基因治疗、抗端粒酶疗法和多基因联合疗 法等。
与p53基因相比，p16基因异常率高，且特异性作用于CDK4／CDK6，且其基因 长度仅为p53基因的1/4,便于重组与导入。对p16基因及其家族成员的不断深 入研究将为人类对肿瘤发生、发展及治疗的作用机制提供新的思路和线索。
一些重要的信号通路和基因在肿瘤的发生发展中起关键作用，RNAi主要通过 降低这些信号通路里的关键分子及一些重要癌基因的表达水平来达到治疗目 的。
研究进展：最初将dsRNA应用于哺乳动物细胞时，当转入的dsRNA长度>80nt 时，会导致细胞死亡。所以实际应用过程中选择短链RNA，即siRNA。 Brummekamp等用病毒载体将siRNA导入人的胰腺癌细胞，可特异且稳定地抑 制癌基因K-RASV12的表达，该基因的受抑使得肿瘤生长能力及恶性程度降低。 Ding 等将人工合成的 siRNA转染乳腺癌细胞，降低VEGF（vascular endothelial grow factor）表达水平，抑制肿瘤内微血管的形成。Braicu 等利用RNAi技术， 抑制三阴乳腺癌人类细胞株（Hs578TH）中p53蛋白(一种肿瘤抑制蛋白，人类 乳腺癌细胞表达突变型p53蛋白具有抗凋亡作用。)的表达。结果发现,p53 表 达明显下调，促进肿瘤细胞的凋亡，抑制肿瘤细胞增殖。
Zhang等针对丝/苏氨酸激酶基因（在多种肿瘤中高表达的激酶，参与肿瘤的 生长、分化、转移和生存）将一段siRNA转染白血病患者的体外细胞，检测出 ATK基因（AKT1 is a member of the serine{丝氨酸}/threoine{苏氨酸} AGC protein kinase{激酶} family involved in cancer‘s metabolism{新陈代谢}, growth, proliferation{扩散}, and survival. It is a potential target for cancer gene therapy.） 的mRNA和蛋白质表达水平显著下调。