精制木醋液的安全性评价

收稿日期:2004-04-08
作者简介:张善玉(1959-),女,吉林和龙人,学士学位,副
研究员,主要从事中药研究。

精制木醋液的安全性评价
张善玉1,金光洙1,金在久1,朴惠顺1,申英爱1,朴　哲2
(1.延边大学医学院,吉林延吉133000;2.延边大学理工学院,吉林延吉133000)
摘　要　目的:通过观察实验动物使用木醋液后的急、慢性毒性反应,评估精制木醋液的安全性。

方法:①昆明种小鼠,雌雄各10只,木醋液经口灌胃1次,观察1周,并记录动物急性中毒症状及死亡情况。

②Wistar 大鼠80只,分为受试物高、中、低剂量组和空白对照组,经口灌胃30d 后,观察大鼠血液学、血液生化学及心、肝、脾、肺、肾、胃等主要脏器病理变化。

结果:①1周内小鼠未见明显中毒症状及死亡发生,最大耐受剂量为20g/kg 。

②30d 后大剂量组血清A LT 明显升高,包括对照组偶见肝细胞脂肪变性或糖源变性,但各组间没有显著性差异,其他血液学、生化学、脏器重量和病理检查等无明显变化。

结论:本品除了大剂量组出现轻微的生化毒性外,没有发现与受试物有关的其他毒性变化。

关键词　木醋液;慢性毒性实验;急性毒性实验
Evaluation of Safety on Purified Wood Vinegar
Zhang Shanyu 1,Jin G uangzhu 1,Jin Z aijiu 1,Piao Huishun 1,Shen Y ingai 1,Piao Zhe 2
(1.C ollege of Pharmacy anbian University ,Y anji 133000,China ;2.C ollege of Science and Engineering ,Y anbian University ,Y anji 133000,China )
Abstract Objective :Safety of the purified w ood vinegar was studied by the acute and chronicity toxic re 2sponse on the experiment animal.Methods :S ome tests of acute oral toxicity and thirty -day feeding were con 2ducted in order to judge the danger on man.R esult :The purified w ood vinegar belong to actually non -toxicity and and thirty -day feeding test in rat dem onstrated that it had no effect on routine blood ,biochemical index ,heart ,liver ,spleen ,lung ,kidney ,stomach and body weight.Conclution :S o the purified w ood vinegar was safe 2ty for man.
K ey w ords Purified w ood vinegar ;Acute toxic ;Chronicity toxic
木醋液是木材(以柞木为主的阔叶树)干馏而得
到的产品,是一种以乙酸(2187%)为主,含有多种物质如醇、酚、酮及其衍生物的混合物[1],具有促进植物生长,土壤消毒,杀菌,防虫,防腐,除草等多种作用,主要用于农业、畜牧业中。

但随着科技的不断发展,它的各项性能逐渐得到人们的认识,应用领域也越来越广,在韩国、日本等国还开辟了保健食品、饮料添加剂等用途[2]。

吉林省延边大学朴哲教授等多年来探讨了木醋液精制工艺,并成功提炼出用于饮
料添加剂和禽畜饲料添加剂的精制木醋液,为评价木醋液的安全性,本实验依据《食品安全性毒理学评价程序和方法》G B15193-94,将木醋液经口灌胃途径实施于大鼠及小鼠,观察了大、小鼠的急、慢性毒性反应,从而评估木醋液的安全性。

1　材料和方法
1.1　木醋液
由延边大学理工学院提供,批号1506,取原液配制成100%,33%和13.5%的溶液,备用。

1.2　实验动物
昆明种小鼠和Wistar 大鼠由延边大学医学院实验动物科提供。

—
45—第24卷第2期2005年4月 中国野生植物资源Chinese Wild Plant Resources V ol.24N o.2Apr.2005
1.3　试剂和仪器
SC OUT-半自动生化分析仪;测试盒均为中生北控生物科技股份有限公司产品;其他试剂均为分析纯。

2　实验方法
2.1　急性毒性实验
采用霍恩氏法,在预实验中测不出LD50,因而测定了木醋液对小鼠的最大耐受剂量。

取昆明种小鼠18～20g,雌雄各20只,称体重,并编号。

小鼠禁食16h后,取木醋液原液,以0.2m L/10g体重剂量灌胃1次,连续观察1周,并记录动物中毒症状及死亡情况。

2.2　30d喂养实验
取Wistar大鼠80只,体重(80±20)g,雌雄各半,各分为4组,分别为低、中、高剂量及对照组,每组20只。

根据木醋液人群推荐剂量(每人每天3g)扩大5、10、25倍分别作为实验组受试物,相应剂量分别为每千克体重3、6、15g/d。

对照组给予蒸馏水。

受试样品将经口灌胃,连续灌胃30d。

每周记录大鼠体重,第31天时,眼眶取血,分离血清,测定生化指标。

处死大鼠,解剖观察内脏,分离心、肝、脾、肺、肾,胃称重,并做组织切片检查。

3　结果
3.1　小鼠急性毒性实验结果
给药后小鼠出现嗜睡、昏迷等现象,经过3～4h 后,逐渐恢复正常,1周内动物未见其他明显中毒症状和死亡发生,其最大耐受剂量为20g/kg。

结果表明,木醋液为实际无毒级物质[3]。

3.2　大鼠30d喂养实验结果
3.2.1　一般表现　实验过程中大剂量组雌雄各死亡2只,但未见组织学病变,死因不明,中剂量、小剂量组无动物死亡,这现象说明大剂量组可能有一定毒性原因尚待研究。

除大剂量组对环境和人为的刺激反应迟缓外,其他组活动正常、毛色光泽润滑,食欲正常,别无其它异常行为表现。

3.2.2对大鼠体重和总食物利用率的影响　雌雄鼠各剂量组体重、进食量、总食物利用率与对照组比较差别无显著性(P>0105),由此表明木醋液对大鼠体重、总食物利用率无明显影响。

3.2.3　血常规及血液生化指标的影响　各剂量组雌雄大鼠血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其分类与对照组比较差别无显著性意义(P>0105),表明该样品对大鼠血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其分类无明显影响。

血液生化指标测定结果如表1。

表1　大鼠30天喂养后血液生化检查结果(x±s)
组别n A LT/U・L-1AST/U・L-1
BUN/
mm ol・L-1
T-CH O
Cre/
mm ol・L-1
G lu/
mm ol・L-1
Alb/G lo TP
♀对照组低剂量组中剂量组高剂量组♂对照组低剂量组中剂量组高剂量组10
10
10
8
10
10
10
8
35.10±11.87
40.30±6.57
43.40±8.88
53.25±13.473
46.00±15.78
53.00±14.63
52.50±14.77
52.50±12.21
211.80±32.66
227.31±31.48
220.14±18.01
217.90±8.75
233.71±41.27
234.63±26.18
219.10±19.40
230.18±15.81
5.67±0.94
5.79±1.54
5.66±0.32
5.81±1.58
6.23±1.55
7.06±1.07
6.46±1.48
6.30±1.33
3.06±1.13
3.47±1.45
3.75±0.75
3.56±1.15
3.89±0.64
3.44±1.31
4.16±0.86
3.54±1.36
119.30±11.76
122.16±5.36
121.00±5.16
124.81±8.05
117.85±10.81
121.05±20.43
120.75±7.23
121.87±4.88
6.31±0.80
7.15±2.21
6.80±0.42
6.34±0.73
7.27±0.80
7.08±0.90
7.42±0.72
7.03±0.78
38.41±2.11
36.29±1.66
40.23±2.02
36.32±3.35
35.47±2.88
38.16±5.31
35.46±3.30
35.59±1.86
69.68±3.60
64.92±3.12
71.80±2.82
73.74±8.62
63.26±3.69
56.54±18.38
64.76±2.41
61.74±5.26
　注:与对照组比较3P<0.05。

由表1可见,受试物各组A LT、AST、BUN、T C、Cre、G lu值测定结果,与对照组比较雌性大剂量组A LT有统计学上的显著性差异,其余各项差异无显著性。

而其他各实验组的各项均无显著性差异(P >0105)。

3.2.4　脏器重量及系数结果　雌雄各组脏器重量及系数结果基本一致,差异无显著性意义(P> 0105)。

3.2.5　病理检查结果　a.肉眼观察结果,空白雄性组有3只肺叶出血,小剂量雌性组有(下转第66页)
—
5
5
—
第2期 张善玉等:精制木醋液的安全性评价
5　扦　插
插条处理后随即进行扦插,按株行距4cm ×4cm ,插入深度为插条长的2/3。

插好后浇透水,并喷1/3浓度的营养液。

营养液配方(mg/L ):硝酸钙560,硝酸钾600,硫酸镁450,磷酸二氢铵120,硫酸
锰0120,硫酸锌0106硼酸0160,钼酸铵0102,FeNa -E DT A 016。

为简便起见,可配成50～200倍的浓溶
液,使用时再稀释。

6　扦插后的管理
6.1　水分
水分的管理是提高成活率的关键措施,重点是保持枝条上部湿润,而下部不积水。

有条件的可在做插床时安装电子叶自动喷雾系统,该装置可使叶片经常保持有一层水膜,保持相对湿度在95%以上。

也可用喷雾器进行人工间隙喷雾,保持叶片湿润,防止叶片失水萎蔫,以利进行光合作用,加速根系的分化与生长。

6.2　温度
温度应控制在20～22℃,最高不超过28℃。

若温度过高,会加大蒸腾和蒸发,导致插条失水;同时也容易引起插条下部腐烂。

6.3　营养液按上述配方配制的营养液,在插后每隔3～4d 喷1次1/3浓度的营养液,一般40～45d 即可开始生根,生根后改用1/2浓度的营养液。

待根系长齐后可用标准浓度,每隔7～10d 浇施1次。

6.4　光照为防止水分过多蒸发而造成叶片萎蔫,影响生根。

需用竹帘、芦帘或遮阳网挡住部分光线,待完全生根后,逐渐增加光照强度。

参考文献:
[1]　刘国民.苦丁茶的经济价值与海南岛发展苦丁的可行性分析
[J ].海南大学学报(自然科学版),1994,12(4):324.
[2]　刘国民.苦丁茶树茎段离体培养的研究[J ].海南大学学报(自
然科学版),1997,15(4):291.
[3]　才淑英.园林花木扦插育苗技术.北京:中国林业出版社,1998.2.[4]　连兆煌.无土栽培原理与技术.北京:中国农业出版社,1994.10.
(上接第55页)
1只肺气肿、1只肺叶出血,中剂量雄性组有2只肺
叶出血,大剂量雄性组有肺突变,其他心、肾、脾、肝、
胃等未见异常。

B.经过组织病理学观察发现,各组均见肝细胞脂肪变性或糖源变性,肝组织病理特点为肝小叶中央静脉和(或)小叶间静脉扩张,其周围肝窦扩张并肝细胞浆内可见大小不等的空泡,呈圆形或椭圆形,界线清,部分界线不十分清。

但是大、中、小剂量组及对照组间肝病变无明显的规律性及统计学差异,因而推测为肝脏病变不是本受试物引起。

其余心、肺、肾、脾和胃中没有观察到组织学病变。

4　结　论
木醋液用霍恩氏法测定LD 50,结果测不出LD 50,
因此直接用原液,1次性灌胃0.2m L/10g 测其最大
耐受剂量为20g/kg ,说明精制木醋液为实际无毒级物质。

30d 喂养结果显示,该受试物对雌雄大鼠体重、总食物利用率、血常规以及血液生化学指标、器官重量,系数等指标无明显影响,肝、肾、胃、肺、大肠、小肠、心脏均未见病理组织学改变。

参考文献:
[1]　朴　哲,闫吉昌.木醋液的精制及有机成分研究[J ].林产化学
与工业,2003,22(2):17-20.
[2]　潘永亮,杜金芳,孙鑫河.木醋液在农业生产上的应用与发展
[J ].中国林副特产,1999,49(2):9-10.
[3]　G B15193-95,食品安全性毒理学评价程序和方法[S].
—
66— 中国野生植物资源 第24卷。