精制木醋液的安全性评价
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收稿日期:2004-04-08
作者简介:张善玉(1959-),女,吉林和龙人,学士学位,副
研究员,主要从事中药研究。
精制木醋液的安全性评价
张善玉1,金光洙1,金在久1,朴惠顺1,申英爱1,朴 哲2
(1.延边大学医学院,吉林延吉133000;2.延边大学理工学院,吉林延吉133000)
摘 要 目的:通过观察实验动物使用木醋液后的急、慢性毒性反应,评估精制木醋液的安全性。方法:①昆明种小鼠,雌雄各10只,木醋液经口灌胃1次,观察1周,并记录动物急性中毒症状及死亡情况。②Wistar 大鼠80只,分为受试物高、中、低剂量组和空白对照组,经口灌胃30d 后,观察大鼠血液学、血液生化学及心、肝、脾、肺、肾、胃等主要脏器病理变化。结果:①1周内小鼠未见明显中毒症状及死亡发生,最大耐受剂量为20g/kg 。②30d 后大剂量组血清A LT 明显升高,包括对照组偶见肝细胞脂肪变性或糖源变性,但各组间没有显著性差异,其他血液学、生化学、脏器重量和病理检查等无明显变化。结论:本品除了大剂量组出现轻微的生化毒性外,没有发现与受试物有关的其他毒性变化。
关键词 木醋液;慢性毒性实验;急性毒性实验
Evaluation of Safety on Purified Wood Vinegar
Zhang Shanyu 1,Jin G uangzhu 1,Jin Z aijiu 1,Piao Huishun 1,Shen Y ingai 1,Piao Zhe 2
(1.C ollege of Pharmacy anbian University ,Y anji 133000,China ;2.C ollege of Science and Engineering ,Y anbian University ,Y anji 133000,China )
Abstract Objective :Safety of the purified w ood vinegar was studied by the acute and chronicity toxic re 2sponse on the experiment animal.Methods :S ome tests of acute oral toxicity and thirty -day feeding were con 2ducted in order to judge the danger on man.R esult :The purified w ood vinegar belong to actually non -toxicity and and thirty -day feeding test in rat dem onstrated that it had no effect on routine blood ,biochemical index ,heart ,liver ,spleen ,lung ,kidney ,stomach and body weight.Conclution :S o the purified w ood vinegar was safe 2ty for man.
K ey w ords Purified w ood vinegar ;Acute toxic ;Chronicity toxic
木醋液是木材(以柞木为主的阔叶树)干馏而得
到的产品,是一种以乙酸(2187%)为主,含有多种物质如醇、酚、酮及其衍生物的混合物[1],具有促进植物生长,土壤消毒,杀菌,防虫,防腐,除草等多种作用,主要用于农业、畜牧业中。但随着科技的不断发展,它的各项性能逐渐得到人们的认识,应用领域也越来越广,在韩国、日本等国还开辟了保健食品、饮料添加剂等用途[2]。吉林省延边大学朴哲教授等多年来探讨了木醋液精制工艺,并成功提炼出用于饮
料添加剂和禽畜饲料添加剂的精制木醋液,为评价木醋液的安全性,本实验依据《食品安全性毒理学评价程序和方法》G B15193-94,将木醋液经口灌胃途径实施于大鼠及小鼠,观察了大、小鼠的急、慢性毒性反应,从而评估木醋液的安全性。
1 材料和方法
1.1 木醋液
由延边大学理工学院提供,批号1506,取原液配制成100%,33%和13.5%的溶液,备用。1.2 实验动物
昆明种小鼠和Wistar 大鼠由延边大学医学院实验动物科提供。
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45—第24卷第2期2005年4月 中国野生植物资源Chinese Wild Plant Resources V ol.24N o.2Apr.2005
1.3 试剂和仪器
SC OUT-半自动生化分析仪;测试盒均为中生北控生物科技股份有限公司产品;其他试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 急性毒性实验
采用霍恩氏法,在预实验中测不出LD50,因而测定了木醋液对小鼠的最大耐受剂量。取昆明种小鼠18~20g,雌雄各20只,称体重,并编号。小鼠禁食16h后,取木醋液原液,以0.2m L/10g体重剂量灌胃1次,连续观察1周,并记录动物中毒症状及死亡情况。
2.2 30d喂养实验
取Wistar大鼠80只,体重(80±20)g,雌雄各半,各分为4组,分别为低、中、高剂量及对照组,每组20只。根据木醋液人群推荐剂量(每人每天3g)扩大5、10、25倍分别作为实验组受试物,相应剂量分别为每千克体重3、6、15g/d。对照组给予蒸馏水。受试样品将经口灌胃,连续灌胃30d。每周记录大鼠体重,第31天时,眼眶取血,分离血清,测定生化指标。处死大鼠,解剖观察内脏,分离心、肝、脾、肺、肾,胃称重,并做组织切片检查。3 结果
3.1 小鼠急性毒性实验结果
给药后小鼠出现嗜睡、昏迷等现象,经过3~4h 后,逐渐恢复正常,1周内动物未见其他明显中毒症状和死亡发生,其最大耐受剂量为20g/kg。结果表明,木醋液为实际无毒级物质[3]。
3.2 大鼠30d喂养实验结果
3.2.1 一般表现 实验过程中大剂量组雌雄各死亡2只,但未见组织学病变,死因不明,中剂量、小剂量组无动物死亡,这现象说明大剂量组可能有一定毒性原因尚待研究。除大剂量组对环境和人为的刺激反应迟缓外,其他组活动正常、毛色光泽润滑,食欲正常,别无其它异常行为表现。
3.2.2对大鼠体重和总食物利用率的影响 雌雄鼠各剂量组体重、进食量、总食物利用率与对照组比较差别无显著性(P>0105),由此表明木醋液对大鼠体重、总食物利用率无明显影响。
3.2.3 血常规及血液生化指标的影响 各剂量组雌雄大鼠血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其分类与对照组比较差别无显著性意义(P>0105),表明该样品对大鼠血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其分类无明显影响。血液生化指标测定结果如表1。
表1 大鼠30天喂养后血液生化检查结果(x±s)
组别n A LT/U・L-1AST/U・L-1
BUN/
mm ol・L-1
T-CH O
Cre/
mm ol・L-1
G lu/
mm ol・L-1
Alb/G lo TP
♀对照组低剂量组中剂量组高剂量组♂对照组低剂量组中剂量组高剂量组10
10
10
8
10
10
10
8
35.10±11.87
40.30±6.57
43.40±8.88
53.25±13.473
46.00±15.78
53.00±14.63
52.50±14.77
52.50±12.21
211.80±32.66
227.31±31.48
220.14±18.01
217.90±8.75
233.71±41.27
234.63±26.18
219.10±19.40
230.18±15.81
5.67±0.94
5.79±1.54
5.66±0.32
5.81±1.58
6.23±1.55
7.06±1.07
6.46±1.48
6.30±1.33
3.06±1.13
3.47±1.45
3.75±0.75
3.56±1.15
3.89±0.64
3.44±1.31
4.16±0.86
3.54±1.36
119.30±11.76
122.16±5.36
121.00±5.16
124.81±8.05
117.85±10.81
121.05±20.43
120.75±7.23
121.87±4.88
6.31±0.80
7.15±2.21
6.80±0.42
6.34±0.73
7.27±0.80
7.08±0.90
7.42±0.72
7.03±0.78
38.41±2.11
36.29±1.66
40.23±2.02
36.32±3.35
35.47±2.88
38.16±5.31
35.46±3.30
35.59±1.86
69.68±3.60
64.92±3.12
71.80±2.82
73.74±8.62
63.26±3.69
56.54±18.38
64.76±2.41
61.74±5.26
注:与对照组比较3P<0.05。
由表1可见,受试物各组A LT、AST、BUN、T C、Cre、G lu值测定结果,与对照组比较雌性大剂量组A LT有统计学上的显著性差异,其余各项差异无显著性。而其他各实验组的各项均无显著性差异(P >0105)。3.2.4 脏器重量及系数结果 雌雄各组脏器重量及系数结果基本一致,差异无显著性意义(P> 0105)。
3.2.5 病理检查结果 a.肉眼观察结果,空白雄性组有3只肺叶出血,小剂量雌性组有(下转第66页)
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第2期 张善玉等:精制木醋液的安全性评价