热原的基本知识课件

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二、污染热原的途径
（一）生产过程中的污染
1.从溶剂中带入
是热原污染的主要途径，主要指配制注射液用的注射用水， 尽管水本身并非使微生物良好的培养基，但易被空气或含
尘空气中的微生物污染。虽经蒸馏可将热原除去，但若操
作不当或蒸馏设备结构不合理，水蒸气中带有细小的水滴 则可将热原带入。
另外，注射用水储存不当或储存时间过长被微生物污染也 可产生热原。
家兔法监测内毒素的灵敏度约为0.001mg/mL， 试验结果接近人体真实情况。
但该法操作繁琐费时，不能用于注射剂生产过 程中的质量控制，且不适用于放射性药物、肿 瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。
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（二）细菌内毒素检查法
细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化革 兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细 菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。细菌 内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。
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（三）热原的性质
1.耐热性
一般在 60 ℃加热1小时不受影响，100 ℃会有少 量不耐热的热原被破坏，只有在180℃、2小时， 250℃、30分钟或650℃、1分钟可使热原彻底破 坏。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ须引起注意：在通常注射剂的灭菌条件下，往 往不足以使热原破坏。
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2.可滤过性
热原体积小，约在1～5nm之间，故一般滤器、 微孔滤膜均不能截留，一些超滤设备可以滤除部 分热原。
故注射用水应新鲜使用，多效蒸馏水机质量要好，环境应
洁净。
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2.从原辅料中带入
一些原辅料因包装损坏、受潮而污染微生物可产 生热原。另外，用生物方法制备的药品如水解蛋 白及中药提取物易带入致热物质。
3.从容器、用具、管道和装置中带入
如未按GMP要求认真清洗处理，常易导致热原 污染。
一、热原的概念、组成与性质 二、污染热原的途径 三、除去热原的方法 四、检查热原的方法
一、热原的概念、组成与性质
（一）热原的概念
热原：是由微生物代谢产生的微量即能引起恒
温动物体温异常升高的致热物质。
大多数细菌都能产生热原，霉菌、酵母菌、真 菌，甚至病毒也能产生热原。在产生热原的微 生物中，致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌的 产物，其次是革兰氏阳性杆菌类，革兰阳性球 菌则较弱。
鲎是节肢动物门、螯肢亚门肢口纲剑尾目的一种 海生动物，又称鲎珠。
鲎的血细胞溶解物与内毒素之间产生凝聚反应。 鲎试剂即鲎的血细胞溶解物。
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细菌内毒素检查法包括凝胶法和光度测定法两种方 法：
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三、除去热原的方法
1.高温法
耐高温的注射器、针头或器皿，在洗涤干燥后， 于250℃加热30分钟以上，可以破坏热原。
2.蒸馏法
热原能溶于水但不挥发，因此制备注射用水时， 需经蒸馏，纯化水中的热原可被除去。
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3.活性炭吸附法
活性炭对热原有较强的吸附作用，同时有助滤 、脱色作用，所以在注射剂中使用较广。常用 量为0.1%~0.5%，但应注意吸附可能造成主药 的损失。
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热原反应：含有热原的注射剂注入人体可引起发
热反应，使人体产生发冷、寒战、体温升高、出 汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至40℃，
严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及 生命。
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（二）热原的组成
热原是微生物的一种内毒素（内毒素：革兰氏阴性 细菌细胞壁的组成成分，细菌在生活时不能释放出
家兔法作为热原检查法，仍是目前各国药典法 定的方法。因家兔对热原的反应与人基本相似 ，试验成本相对比较低。对供试家兔的要求、 试验前的准备、检查法、结果判断药典均有具 体规定。
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检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的 状况、实验室条件和操作的规范性。
供试验用家兔应按药典要求进行选择，以免影 响结果。
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4.制备过程中的污染
如室内空气、环境、人员卫生条件达不到要求， 操作时间过长、产品灭菌不及时或灭菌不合格等 均会增加微生物的污染而产生热原。
5.产品密闭不合格，在储存中被污染
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（二）使用过程中的污染
临床使用的器具如输液器、注射针筒针头、配 药器具等的污染会带入热原，中心配药室或临 床科室配药过程，由于环境、操作、用品、混 入的其他药品等因素的污染也可能带入热原。
7.超滤法
一般用3.0~15nm孔径的超滤膜除去部分热原。
8.其他
如采用离子交换法、反渗透法等，也可通过吸附
或滤过作用除去部分热原。
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四、检查热原的方法
中国药典现行版本规定热 原检查采用：
（一）家兔法 （二）细菌内毒素检查法
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（一）家兔法
《中国药典》现行版规定热原检查法系将一定 量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间 内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品 中所含热原的限度是否符合规定。
来，当细胞死亡而溶解或用人工方法破坏菌体时才 释放出来）。
内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物
，其中脂多糖是内毒素的主要成分，具有特别强的 热原活性，因而可以近似的认为：
热原=内毒素=脂多糖
脂多糖的化学组成因菌种不同而异（主要含有多种
糖类，类脂化合物，有机磷和其它一些成分）；热
原的分子量一般为1×学1习0交6流左PPT 右。
此外，还可用活性炭与白陶土合用除去热原。
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4.酸碱法
玻璃、搪瓷等耐酸容器及用具，可用重铬酸钾 硫酸清洁液或稀氢氧化钠液处理破坏热原。
5.环氧乙烷气体杀灭法
临床使用的一次性注射器、输液器都普遍使用该 方法，效果可靠、产品具有较长的有效期。
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6.凝胶过滤法
热原分子量为1×106左右，采用二乙氨基乙基葡 聚糖凝胶(分子筛)可去除部分热原。
3.水溶性
由于磷脂结构上连接有多糖，所以热原能溶于 水，在水或水溶液中呈分子状态。
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4.不挥发性
热原本身不挥发，但必须注意在蒸馏时，防止随 水蒸气雾滴带入药液或注射用水中，因此在配制 罐和蒸馏水室的蒸发器上部设隔沫装置，以分离 蒸汽和雾滴。
5.其他性质
热原能被活性炭吸附，也能被强酸、强碱、强氧 化剂破坏，超声波亦能破坏热原。