细菌培养及总结汇报单解读

• Vancomycin
万古霉素
药敏卡的选择依据
• 含盖各类抗生素以及抗生素的不同代数 （包括青霉素类、头孢类、碳青霉烯类、 氨基糖苷类、氟喹诺酮类、单环内酰胺类 及叶酸代谢途径抑制剂等）
• 大部分为临床常用药物 • 满足临床约90%的用药需求 • 代表药的耐药性可预示同类抗生素的耐药
性
特殊细菌的药敏选择
微生物组现提供给临床的2组药敏卡
• AST-GN04 革兰氏阴性药敏卡
• Amikacin
阿米卡星
• Ampicillin
氨苄西林
• Ampicillin/Sulbactam 氨苄西林/舒巴坦
• Aztreonam
氨曲南
• Cefazolin
头孢唑啉
• Cefepime
头孢吡肟
• Cefotetan
肺炎链球菌
• 从脑脊液中分离的肺炎链球菌应测试青霉素、头孢噻肟或头孢 曲松、美罗培南及万古霉素的MIC值
• 对于非膜炎分离株，青霉素MIC能预报菌株对其他β－内酰胺酶 类敏感性的药物如：青霉素MICs<=0.06ug/ml（或苯唑西林抑 菌圈直径>=20mm）提示分离菌株对氨苄西林（口服或注射）、 氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、头孢地尼、头孢托仑、头孢泊肟、 头孢丙烯、头孢唑肟、头孢呋辛、亚胺培南、氯碳头孢和美罗 培南敏感。青霉素MICs<=2ug/ml提示对一下药物敏感：阿莫西 林、阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松和厄 他培南
• 标本需1h内送检，操作中应严格执行无菌技术
静脉血、脑脊液、骨髓
• 培养瓶的消毒：用70%异丙基乙醇消毒橡胶塞30s • 静脉穿刺消毒：严格按照皮肤消毒步骤
操作（酒精-碘酊-酒精）。 • 血液培养须特别注意消毒，因许多微生物，
尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处， 易造成污染。 • 天气寒冷时要注意脑脊液标本应在保温条件下送 检，以免病原菌死亡，送检要求：≤1h常温禁止冷藏 • 血培养的采样时间：在寒战出现时或发热初期采集血培养最佳 • 建议从不同部位采2-3套（一套为1瓶需氧+1瓶厌氧血培养瓶） • 如不能立即送检，应置于室温，禁止放入冰箱。 • 血培养专用瓶成人：8-10mL/瓶；婴幼儿：1-5mL/ 瓶
• 阳性结果报告 报告通常分为三级；
• 一级报告 阳性报警血培养瓶应进行涂片革兰染色， 将涂片染色结果在实验室信息系统（LIS）“预报 告处理”栏处报告危急值。电话通知临床联系人， 在“备注”栏记录“XXX培养阳性”，“革兰XX 菌”，与临床联系人姓名和检验者姓名；
• 二级报告 在实验室信息系统（LIS）“预报告处 理”栏处报告直接药敏试验结果；
• Ampicillin
氨苄西林
• Ampicillin/Sulbactam 氨苄西林/舒巴坦
• BenzyPenicillin
青霉素G
• Ciprofloxacin
环丙沙星
• Clindamycin
氯洁霉素
• Erythromycin
红霉素
• Fosfomycin
磷霉素
• Fusidic A cid
无菌体液（穿刺液、心包液、胸水、 腹水、关节液等）
• 注意彻底消毒，因许多微生物，尤 其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或 近表层处，易造成污染
• 尽可能留取多量标本 • 采集时间应在患者用抗菌药物之前，或停止用药
1～2日后，或下次用药前，或药物浓度较低时抽 取，胸水及腹水一般抽取5～10mL，心包液、关 节液一般抽取1～5mL， • 2、疑为厌氧菌感染时，取材后立即将注射器内空 气排空，无菌操作注入3～5mL穿刺液于厌氧血培 养瓶内，及时送检
细菌培养及报告单解读
医学实验中心微生物组 张云霞
内容概括
• 抗生素的概述、作用及要素 • 2010年我院标本送检率及阳性检出率 • 正确采集标本 • 实验室选择抗生素的依据 • 特殊细菌的药敏选择 • 静脉血、脑脊液、骨髓标本的处理流程 • 报告发放时限
抗生素的概述、作用及要素
• 抗生素的概述 抗生素大家实际上不陌生了，严格意义上讲，抗生素就是在非 常低浓度下对所有的生命物质有抑制和杀灭作用的药物。
实验室选择抗生素的依据
• 选用药物根据卫生部规定使用的标准， 依据CLSI（美国临床实验室标准化 委员会）标准来选择。
• 微生物组现采用两种药敏检测方法： MIC法（定量药敏）KB法（定性药敏）。
• 住院病人采用上机MIC法，商品化的药敏试卡， 卡中所包含药物的种类的是固定的，实验室会 定期更换药敏试卡，在选择试卡的过程中充分与药剂科共同沟通，尽 可能选择我院药剂科能提供的抗生素。现在临床需要实验室提供临床 常用药物敏感试验如“头孢硫醚“等这类药物但CLSI无判断标准，国 内也无相应的药敏纸片，虽临床有需求，实验室无法提供药敏实验。 同时有些分离鉴定出的细菌，对某些类抗菌药物是天然耐药的（如肠 球菌对头孢类抗生素天然耐药），实验室药敏试验则不考虑这类药物。
如何正确采集各类标本呢？
痰液
• 用温开水清洗或漱口去除口腔表面菌 • 从肺深部咳出痰液，采集到无菌容器内 • 采集量：无菌容器＞1mL • 送检要求：≤2h常温 • 对于不能自主留取标本的患者，应经抽吸获得 • 一天中仅需送检1次，无需多次重复送检相同标本 • 用于检查结核分枝杆菌时，为了提高阳性率，应
鲍曼不动杆菌
• 鲍曼不动杆菌为非发酵革兰阴性杆菌，该菌是医院感染的 重要病原菌，对常用抗生素的耐药率有逐年增加的趋势， Ab约占临床分离的不动杆菌的70%以上。Ab对第三代和 第四代头孢菌素的耐药率已达63.0%～89.9%。对三种氨 基糖苷类（庆大酶素、奈替米星、妥布霉素）和环丙沙星 的耐药率菌达96.3%。我院目前的绝大多数菌株对亚胺培 南、美罗培南等也产生了不同程度的耐药
收集24h痰液
尿液
• 在未使用抗生素之前采集标本，注意避免消毒剂 污染标本
• 最好留取早晨清洁中端尿， • 采集量：无菌管≥3mL • 送检要求:≤2h常温
• 需导尿的病人：采集前用70%异丙基乙醇消毒导
管采集部位长机采集无菌尿液5-10mL • 标本不能直接从导尿袋放出，易孳生污染菌细菌 • 一天中仅需送检1次，无需多次重复送检相同标本 • 结核分枝杆菌集菌检查：留取24h尿液，取沉淀
• 三级报告 报告细菌种属、药敏试验、结果评价和 建议，同时置警告标志；
报告发放时限
• 对于血培养，无菌体液培养、脑脊液培养 及骨髓培养报告时限为5-7天
• 一般细菌培养发放时限为3-5天 • 对于难鉴定的细菌最迟发放时限为10天 • 若10天后尚未鉴定出结果则应向临床科室
发放延时报告通知，告知情况。
• 抗生素的作用 杀灭感染我们的微生物，目的是把病原体杀灭，控制疾病，以 最终治疗疾病
• 抗生素的3要素 1选药 2用量 3用法
2010年我院标本的送检率及阳性率
2010年统计显示，标本送检率20%，阳性检出率30%， 血培养阳性检出率10%以上，呼吸道标本苛养菌的分离率5%以上。
12000
痰液
标本类型
• 实验室结合临床目前治疗措施，追加了头孢派酮/舒巴坦、 多黏菌素B、米诺环素及亚胺培南的K-B法药敏对仪器报 告结果进行补充以满足临床需求
• 由于CLSI中对头孢哌酮/舒巴坦及多粘菌素B无判断指标， 实验室只报告抑菌圈直径未标注敏感与耐药。
静脉血、脑脊液、骨髓标本的 处理流程
• 阴性结果报告 血培养如培养至第5天，未见细菌 生长，方可发出阴性报告，“经鉴定无细菌生长”
各种分泌物及导管尖
端
无菌体液 510
113
34.77% 39.48% 38.50%
14.58% 15.90 22.15%
正确采集标本
医学实验中心微生物组在保证检验质量的工作中，坚持不断的持 续改进，优化操作流程。从标本接收到及时查对，选择正确的培养基、 按要求接种、培养、分纯，仪器鉴定及药敏试验。经仪器鉴定到种的 细菌结果经组内有经验的人员判断结果，发出最终报告（准确率在 90%以上）。因细菌生长需要足够时间，故微生物组培养加药敏试验 所需时间较长，因此一份合格的标本对微生物来说显得尤为重要，高 质量的标本是质量保证的前提，只有实验室收到符合要求的标本，才 能保证后续的培养鉴定及药敏检测结果的准确性，时效性。
全年送检量 全年阳性检 阳性检出
（人次）
出量（人次） 百分比
10000 8000 6000 4000 2000
0 全年送检率
阳性检出率
尿液 无菌体液 静脉血
痰液
10811
尿液
1360
各种分泌 物及导管 尖端
1393
3759 537 752
源自文库
脑脊液及骨髓
静脉血
7452
1087
脑脊液、 1358
216
骨髓
哌拉西林
• Piperacillin/Tazobactam 哌拉西林+他唑巴坦
• Ticarcillin/Clavulanic Acid替卡西林/棒酸
• Tobramycin
妥布霉素
• Trimethoprin/Sulfa 复方新诺明
• AST-P535(22067) 葡萄球菌、肠球菌、 B组链球菌
头孢替坦
• Ceftazidime
头孢他啶
• Ceftriaxone
头孢曲松
• Cefuroxime
头孢呋辛
• Ciprofloxacin
环丙沙星
• Gentamicin
庆大霉素
• Imipenem
亚胺培南
• Levofloxacin
左氧氟沙星
• Nitrofurantoin
呋喃妥因
• Piperacillin
• Quinupristin/Dalfoprsifin 喹努普汀/达福普汀
• Rifampin
利福平
• StreptomycinHigh Level 高浓度链霉素(协同)
• Teicoplarin
替考拉宁
• Tetracycline
四环素
• Trimethoprin/Sulfamethoxazole 复方新诺明
嗜麦芽窄食单胞菌
• 其具有复杂的耐药机制，外膜通透性低，对多种 抗生素不易渗透，可产生多种B-内酰胺酶，如青 霉素酶，头孢菌素L2酶以及金属锌酶，因此对B内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类抗生素耐药， 同时对碳青酶烯类抗生素也耐药
• 由于嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性较强，依据CLSI 选择K-B法药敏实验，包括四环素类（米诺环素)、 氟喹诺酮类（左氧氟沙星）、叶酸代谢途径抑制 剂（复方新诺明）这3种药报告临床
部分送检。
粪便
• 挑取脓血、粘液部分的粪便2～3g置大便 于专用无菌培养容器内，如为稀水便，可 直接收集1～2mL于专用培养杯中，盖好塞 子，及时送检。试管中不可混入尿液等异 物及其它化学药品。
• 若做厌氧菌培养则领取专用厌氧拭子由肛 门插入约6～7cm，轻轻旋动取出大便少许， 放回厌氧拭子培养试管中，盖好塞子，灭 菌封口送检。
呋西地酸
• Gentamicin
庆大霉素
• Gentamicin High level 高浓度庆大霉素(协同)
• Imipenem
亚胺培南
• Linezolid(Zyvox)
利奈唑烷
• Moxifloxacin
莫西沙星
• Oxacillin MIC NCCLS 苯唑西林
• Oxacillin Breakpoint 苯唑西林临界点
脓汁及病灶分泌物
• 封闭性脓肿：先用碘酒或 碘伏消毒患者病灶局部的皮肤或粘膜表面，再用 75％的酒精脱碘，以无菌干燥注射器穿刺抽取， 将采集的脓汁无菌操作注入5～10mL灭菌培养管 中，如怀疑是厌氧菌应领取专用厌氧拭子做厌氧 培养并建议同时做一般细菌涂片镜检
• 开放性脓肿和病灶分泌物：对采样部位，应先用 灭菌生理盐水洗净病灶表面的污染物，对表皮、 粘膜应充分消毒，采集病灶部位脓性分泌物于灭 菌培养管或灭菌棉拭子试管内，立即送检。