选修三 2.2.1 动物细胞培养
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6、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代 以内，为什么？
以保持正常细胞的二倍体核型。
重点归纳
1．动物细胞培养过程解读
(1)原理：细胞增殖。 (2)将动物细胞分散成单个细胞培养的原因： ①保证细胞所需要的营养供应。 ②保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
(3)细胞株和细胞系： ①细胞株：传代培养的细胞能传到10～50代，这样的传代细 胞称为细胞株。 ②细胞系：传代培养的细胞在传到50代后，有部分细胞的遗 传物质发生了改变，获得不死性，这种具有癌变特点的细胞称为 细胞系。
2．过程
①先用_胰__蛋__白__酶__等处理贴满瓶壁的细胞，
再分瓶继续培养 传代培养②_1_0_～__5_0_代左右时，细胞增殖缓慢，甚至停止
③部分细胞_核___型__发生改变，获得不死性，能无
限增殖
3．相关概念
(1)细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。
(2)细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__
物细胞发育潜能变弱，失去了发育成完整个体的能力，所以动物
细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。
4．为什么进行动物细胞培养时，通常要添加血清？
由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有 完全搞清楚，因此，培养动物细胞时通常要添加 血清。
5、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？
控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的 蛋白质，把细胞消化掉。
经典例题
[例1] (浙江高考)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基
本过程如下图所示。下列叙述错误的是
(C )
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙―→
培养 细胞1
――丁→
培养 细胞2
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
[课堂回扣练习]
1．动物细胞培养过程的顺序是
()
①原代培养 ②传代培养 ③胰蛋白酶处理组织，形成单个细
胞，制成细胞悬液
A．①②③
B．①③②
C．②①③
D．③①②
答案：D
2．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的
是
A.动物细胞培养 B.动物细胞融合
C.单克隆抗体
D百度文库胚胎核移植
3．贴壁细胞的分裂方式具体是
A.无丝分裂
B.有丝分裂
C.减数分裂
D.增殖
4．关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细
胞分散开来 B.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养 C.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞全
部衰老死亡 D.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官
或组织
时，细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养：指动物组织消化后的_初__次__培__养_。 (4)传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现接__触__抑__制__后，需要重
新用_胰__蛋__白___酶__等处理，然后分瓶继续培养，让细胞_继__续__增__殖__
的培养过程。
4．培养条件
2．动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目 原理
植物组织培养 植物细胞的全能性
动物细胞培养 细胞增殖
固体或半固体培养基， 液体培养基，包括
包括矿质元素、蔗糖、 无机盐、葡萄糖、
区 培养基 维生素、琼脂、植物激 维生素、氨基酸、
别
素等
动物血清等
培养条件 细胞来源
再分化阶段需光 离体植物器官、组织 或细胞
D．丁过程得到的细胞具有异质性
(1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶的作用：整个培养过程中两次使用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶，第一次使用的目的是使组织细胞分散 开，第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分装后 继续培养。
(2)细胞株与细胞系的判断：从内在原因看是遗传物质是否发 生改变，从外在表现看是是否具有无限增殖能力。细胞系细胞遗 传物质发生了改变，具有无限增殖能力。
提示：用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋 白质。多数细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境 中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶 适宜用于细胞培养时的消化。
3．动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？ 提示：动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动
2.2.1 动物细胞培养
学习目标：
1、知道动物细胞工程常用的技术手段。 2、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 3、比较动物细胞培养技术与植物组织培养技术
主备人：陈幼武 议课时间：12.22
动物细胞工程常用的技术手段有：
动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 其中，▁▁动▁物▁▁细▁▁胞技培术养是其他动物细胞工 程技术的基础。
(1)无菌、无毒的环境：对_培__养__液__和所有_培__养__用__具___进行无菌
处理。
无机物：无机盐、_微__量__元__素__等
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养_动__物__血__清__、__血__浆__：补充培养液中没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和pH温pH度：：_7__3.2__6～__.5___±7__._4_0_._5_℃_
自主学习： 阅读P44—47页，思考下列问题：
1、什么叫动物细胞培养？
2、动物细胞培养的过程是怎样的？
3、动物细胞培养需要怎样的条件？ 4、动物细胞培养技术有哪些应用？
一、动物细胞培养
1．概念
从动物机体中取出相关的组织，将它分散成_单__个__细__胞__， 然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞_生__长__和_增__殖___。
不需光
胚胎或幼龄动物 组织
比较项目 过程 结果
植物组织培养 脱分化、再分化 获得新个体或细胞产物
动物细胞培养 原代培养、传代培养 获得细胞或细胞产物
①植物繁殖的新途径
①生产生物制品如病
区
②作物新品种的培育
毒疫苗、干扰素、单
别
用途
③细胞产物的工厂化生产。 克隆抗体等 如生产蛋白质、药物、香料、②检测有毒物质
生物碱等
③研究生理、药理、
病理
相同点
①都需要人工条件下的无菌操作，无菌培养 ②都是合成培养基 ③都需要适宜的温度、pH等条件 ④都进行有丝分裂
[特别提醒] (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过 程，但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化，而动物细胞培养 过程中细胞只分裂不分化。 (2)植物组织培养可获得新个体，体现了细胞的全能性，而动 物细胞培养只能得到细胞，没有体现细胞的全能性。 (3)植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子，而动物 细胞培养基中需要加入血清、血浆。
(4)气体环境OCO2：2：_细_维_胞_持_代__培__谢__养____液所__的必__需p_H_的___
5．应用[连线]
问题探究
1．为什么选用胚胎或幼龄动物组织进行细胞培养？
提示：幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力很 强，更易于培养。
2．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细 胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
以保持正常细胞的二倍体核型。
重点归纳
1．动物细胞培养过程解读
(1)原理：细胞增殖。 (2)将动物细胞分散成单个细胞培养的原因： ①保证细胞所需要的营养供应。 ②保证细胞内有害代谢产物的及时排出。
(3)细胞株和细胞系： ①细胞株：传代培养的细胞能传到10～50代，这样的传代细 胞称为细胞株。 ②细胞系：传代培养的细胞在传到50代后，有部分细胞的遗 传物质发生了改变，获得不死性，这种具有癌变特点的细胞称为 细胞系。
2．过程
①先用_胰__蛋__白__酶__等处理贴满瓶壁的细胞，
再分瓶继续培养 传代培养②_1_0_～__5_0_代左右时，细胞增殖缓慢，甚至停止
③部分细胞_核___型__发生改变，获得不死性，能无
限增殖
3．相关概念
(1)细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞_贴__附__在__瓶__壁__上。
(2)细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到_表__面__相__互__接__触__
物细胞发育潜能变弱，失去了发育成完整个体的能力，所以动物
细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。
4．为什么进行动物细胞培养时，通常要添加血清？
由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有 完全搞清楚，因此，培养动物细胞时通常要添加 血清。
5、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？
控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的 蛋白质，把细胞消化掉。
经典例题
[例1] (浙江高考)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基
本过程如下图所示。下列叙述错误的是
(C )
实验 小鼠
―甲―→
皮肤 组织
―乙―→
皮肤 细胞
―丙―→
培养 细胞1
――丁→
培养 细胞2
A．甲过程需要对实验小鼠进行消毒
B．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
C．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型
[课堂回扣练习]
1．动物细胞培养过程的顺序是
()
①原代培养 ②传代培养 ③胰蛋白酶处理组织，形成单个细
胞，制成细胞悬液
A．①②③
B．①③②
C．②①③
D．③①②
答案：D
2．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的
是
A.动物细胞培养 B.动物细胞融合
C.单克隆抗体
D百度文库胚胎核移植
3．贴壁细胞的分裂方式具体是
A.无丝分裂
B.有丝分裂
C.减数分裂
D.增殖
4．关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细
胞分散开来 B.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养 C.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞全
部衰老死亡 D.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官
或组织
时，细胞_停__止__分__裂__增__殖__的现象。 (3)原代培养：指动物组织消化后的_初__次__培__养_。 (4)传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现接__触__抑__制__后，需要重
新用_胰__蛋__白___酶__等处理，然后分瓶继续培养，让细胞_继__续__增__殖__
的培养过程。
4．培养条件
2．动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目 原理
植物组织培养 植物细胞的全能性
动物细胞培养 细胞增殖
固体或半固体培养基， 液体培养基，包括
包括矿质元素、蔗糖、 无机盐、葡萄糖、
区 培养基 维生素、琼脂、植物激 维生素、氨基酸、
别
素等
动物血清等
培养条件 细胞来源
再分化阶段需光 离体植物器官、组织 或细胞
D．丁过程得到的细胞具有异质性
(1)胰蛋白酶或胶原蛋白酶的作用：整个培养过程中两次使用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶，第一次使用的目的是使组织细胞分散 开，第二次使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，便于分装后 继续培养。
(2)细胞株与细胞系的判断：从内在原因看是遗传物质是否发 生改变，从外在表现看是是否具有无限增殖能力。细胞系细胞遗 传物质发生了改变，具有无限增殖能力。
提示：用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋 白质。多数细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境 中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶 适宜用于细胞培养时的消化。
3．动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？ 提示：动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动
2.2.1 动物细胞培养
学习目标：
1、知道动物细胞工程常用的技术手段。 2、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 3、比较动物细胞培养技术与植物组织培养技术
主备人：陈幼武 议课时间：12.22
动物细胞工程常用的技术手段有：
动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 其中，▁▁动▁物▁▁细▁▁胞技培术养是其他动物细胞工 程技术的基础。
(1)无菌、无毒的环境：对_培__养__液__和所有_培__养__用__具___进行无菌
处理。
无机物：无机盐、_微__量__元__素__等
有机物：糖、氨基酸、促生长因子
(2)营养_动__物__血__清__、__血__浆__：补充培养液中没有完全搞清
楚的成分
(3)温度和pH温pH度：：_7__3.2__6～__.5___±7__._4_0_._5_℃_
自主学习： 阅读P44—47页，思考下列问题：
1、什么叫动物细胞培养？
2、动物细胞培养的过程是怎样的？
3、动物细胞培养需要怎样的条件？ 4、动物细胞培养技术有哪些应用？
一、动物细胞培养
1．概念
从动物机体中取出相关的组织，将它分散成_单__个__细__胞__， 然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞_生__长__和_增__殖___。
不需光
胚胎或幼龄动物 组织
比较项目 过程 结果
植物组织培养 脱分化、再分化 获得新个体或细胞产物
动物细胞培养 原代培养、传代培养 获得细胞或细胞产物
①植物繁殖的新途径
①生产生物制品如病
区
②作物新品种的培育
毒疫苗、干扰素、单
别
用途
③细胞产物的工厂化生产。 克隆抗体等 如生产蛋白质、药物、香料、②检测有毒物质
生物碱等
③研究生理、药理、
病理
相同点
①都需要人工条件下的无菌操作，无菌培养 ②都是合成培养基 ③都需要适宜的温度、pH等条件 ④都进行有丝分裂
[特别提醒] (1)植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过 程，但植物组织培养过程中细胞既分裂又分化，而动物细胞培养 过程中细胞只分裂不分化。 (2)植物组织培养可获得新个体，体现了细胞的全能性，而动 物细胞培养只能得到细胞，没有体现细胞的全能性。 (3)植物组织培养中需要加入植物激素等促生长因子，而动物 细胞培养基中需要加入血清、血浆。
(4)气体环境OCO2：2：_细_维_胞_持_代__培__谢__养____液所__的必__需p_H_的___
5．应用[连线]
问题探究
1．为什么选用胚胎或幼龄动物组织进行细胞培养？
提示：幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力很 强，更易于培养。
2．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细 胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？