脂质体转染操作步骤

脂质体转染

1.当六孔板中293密度达90％时，准备转染，将无血清培养基、

Opti-MEM取出复温并注意平衡好；

2.取出细胞，将培养基换成无血清培养基，放回孵箱培养；

3.取灭菌的EP管，按要求混好质粒（约5ug/孔），每管加250ul

Opti-MEM，混匀；

4.另取EP管，加入lipofectamine 2000（10ul/孔）和Opti-MEM（250ul/

孔），轻轻混匀后室温静置5min；

5.将4中的混合液加入3的EP管中，250ul/孔，混匀；

6.室温静置20min，将lipofectamine 2000-质粒混合液滴到六孔板中，

500ul/孔；

7.将细胞放回孵箱培养，4h后换回含血清的完全培养基。