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小鼠肝组织中CYP1A的三维深度成像
放大图
结论:NCMN组织渗透力强,组织中的CYP1A适 合用双光子深度荧光成像
3. Results and discussion
CYP1A2 CYP1A1
亚铁血 红素
铁原子
结论:三条H-bond表明-COOH在识别和对接CYP1A中的重要作用 催化效率CYP1A2大于CYP1A1
2
1. Introduction
CYP1A
人体药物新陈代谢酶,对致癌物 质活性有重要影响 活性腔中有丰富的羟基氨基酸,氢键和π-π 相互作用可能对基底的组成产生作用
传统单显微镜 荧光探针
抗干扰差
成像ຫໍສະໝຸດ Baidu果差
毒性大
3
2. Experimental section
NCMN的设计依据:CYP1Ad的底物偏好 对位有较强的脱烷基化作用
活细胞成像应用
单光子
双光子
未加抑制剂
2
加CYP1A抑制剂
结论:荧光响应是由于CYP1A调节NCMN所致。NCMN可以 11 用单光子、双光子激发成像来检测活细胞中CYP1A的活性。
NCMNe在完整细胞和细胞匀浆内检测CYP1A的量
正常 1nMTCDD 10nMTCDD
结论:NCMN可以被用于筛选有效的CYP1A诱导剂, 并检测活细胞中生 成的CYP1A的酶活性
肉眼色比
112nm红移
3.表征
结论:NCMN作为检测CYP1A的探针可行
机理
3.表征
结论:NCMN的脱甲基化具有良好的反应性和理想的 动力学行为,有潜能对复杂生物体中的CYP1A进行定 量测定。
表征
人肝微粒体中CYP1A的量化
结论:(a) (b) (c)确定了NCMN的高选择性 (d) (e) (f)表面NCMN可以作为CYP1A调节器的筛选和表征
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Thank you for your attention!
16
检测细胞色素P450 1A酶的 高选择性比率双光子荧光探针
文献出处:
DOI: 10.1021/jacs.5b09854
J. Am. Chem. Soc. 2015, 137, 14488−14495
1
Contents
1
Introduction
2
Experimental section
3 1
4
2 Results and Representation
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