文献阅读汇报1-放射敏感性方法汇总比较
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MN/1000) • MN/1000 binucleated cells (MN/1000)
三色FISH
• 肝素抗凝外周血,一份照射,一份对照;37℃培养48h • 提前2.5h加入秋水仙胺制备外周血淋巴细胞,可用70%乙醇冻存
在-20 • 1.2.4三条染色体整条涂染,DAPI复染 • 荧光显微镜下观察 • Control:score 500 metaphases ;照射:Control:score 150 metaphases • 运用软件Biomas 3.3 计算有丝分裂指数
ARKTM Kit and VECTAstain Kit ;3 anti- cH2AX at Ser139 with TSATM Kit 和 DAPI 复染 • 3-chip TDI camera ona NanoZoomer 2.0 HT分析,BrdU-positive and oxic pimonidazole-negative for γH2AX foci analysis were identified and marked. • Zeiss Axio Imager
有限稀释法(LDA)
• 克隆形成实验
software处理计数 • IRS=(G2/ G2 caffeine)*100%
细胞质阻断微核分析( cytokinesis-block micronucleus ,CBMN)Baidu Nhomakorabea
• 外周血淋巴细胞培养72h • 加入细胞松弛素B(Cytochalasin B)封闭24h • 离心,KCl处理收集淋巴细胞;固定 • DAPI 染色 • Zeiss Axio Imager Z2 microscope 拍照 • 用Metafer 4 platform 进行微核自动计数 • Lymphocytes containing MN/1000 binucleated cells (cells with
γH2AX radiation sensitivity assay
• 前列腺切除术标本,部分HE染色病理鉴定;部分放有培液的离心管 • 剪碎组织,培养皿培养20h,37℃孵箱; • 加入增殖标记物Brdu,缺氧标记物pimonidazole,4h • 体外照射,换成没有标记物的培液培养24h;固定石蜡包埋 • 三张连续3μm切片:1HE染色;2 anti-BrdU, anti-pimonidazole with
放射敏感性检测方法汇总
xx 20171113
G2染色体放射敏感性分析
• 外周血淋巴细胞培养48h; • 常温照X-ray; • 分两份,一份未处理(G2),一份咖啡因处理(G2 caffeine);
20min • 加入秋水仙胺,1h • 离心,KCl处理收集淋巴细胞;固定,Giemsa染色 • Zeiss Axio Imager Z2 microscope观察, MSearch and AutoCapt
三色FISH
• 肝素抗凝外周血,一份照射,一份对照;37℃培养48h • 提前2.5h加入秋水仙胺制备外周血淋巴细胞,可用70%乙醇冻存
在-20 • 1.2.4三条染色体整条涂染,DAPI复染 • 荧光显微镜下观察 • Control:score 500 metaphases ;照射:Control:score 150 metaphases • 运用软件Biomas 3.3 计算有丝分裂指数
ARKTM Kit and VECTAstain Kit ;3 anti- cH2AX at Ser139 with TSATM Kit 和 DAPI 复染 • 3-chip TDI camera ona NanoZoomer 2.0 HT分析,BrdU-positive and oxic pimonidazole-negative for γH2AX foci analysis were identified and marked. • Zeiss Axio Imager
有限稀释法(LDA)
• 克隆形成实验
software处理计数 • IRS=(G2/ G2 caffeine)*100%
细胞质阻断微核分析( cytokinesis-block micronucleus ,CBMN)Baidu Nhomakorabea
• 外周血淋巴细胞培养72h • 加入细胞松弛素B(Cytochalasin B)封闭24h • 离心,KCl处理收集淋巴细胞;固定 • DAPI 染色 • Zeiss Axio Imager Z2 microscope 拍照 • 用Metafer 4 platform 进行微核自动计数 • Lymphocytes containing MN/1000 binucleated cells (cells with
γH2AX radiation sensitivity assay
• 前列腺切除术标本,部分HE染色病理鉴定;部分放有培液的离心管 • 剪碎组织,培养皿培养20h,37℃孵箱; • 加入增殖标记物Brdu,缺氧标记物pimonidazole,4h • 体外照射,换成没有标记物的培液培养24h;固定石蜡包埋 • 三张连续3μm切片:1HE染色;2 anti-BrdU, anti-pimonidazole with
放射敏感性检测方法汇总
xx 20171113
G2染色体放射敏感性分析
• 外周血淋巴细胞培养48h; • 常温照X-ray; • 分两份,一份未处理(G2),一份咖啡因处理(G2 caffeine);
20min • 加入秋水仙胺,1h • 离心,KCl处理收集淋巴细胞;固定,Giemsa染色 • Zeiss Axio Imager Z2 microscope观察, MSearch and AutoCapt