人胃癌细胞中NF-kB和VEGF的定量表达

$(E&-F 孵育 (3<: # 加 入 氯 仿 $-,!38 氯
仿 G ’38.15678 %# 盖 紧 盖 子 # 用 力 摇 动
k#" 岁 l#" 岁
组织类别 原发癌组织 癌旁组织 浸润深度 达到浆膜层 未达浆膜层 分化程度 n 分化好 分化差 淋巴结转移 有 无 分期
’(H#’(E&"F 孵育 !E&3<: #)F’!"""> G 3<:
10,!2 =P1Q 表达上调可
中图分类号 !P%&C@!
文献标识码 !Q
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人胃癌细胞中 10,!2 =P1Q 和 -./0 =P1Q 的表达明显高于癌旁细胞的表达 &RTB@B3 ’% 人胃癌细胞中 10,!2
=P1Q 和 -./0 =P1Q 的表达与组织类别 $ 浸润深度 $ 分化程度 $ 淋巴结转移 $ 分期和大小有关 &RTB@B3 ’% 人胃癌
细胞中 10,!2 =P1Q 与 -./0 =P1Q 呈无显著相关性 &?UB@!34# #RUB@!!%3 ’% 结论 能与人胃癌发生 $ 发展和转移有关 % 关键词 胃肿瘤 (10,!2 ( 血管内皮生长因子 ( 荧光定量聚合酶链反应
! 海南医学 "!""# 年第 $% 卷第 & 期
文章编号 !3BB&" #&CB #!BB# $B&% B33 " B&
论
著
人胃癌细胞中 10,!2 和 -./0 的定量表达
王菊岩 !刘舒颖 ! 吴康英 ! 陈立军 "广东医学院附属医院消化内科 ! 消化内镜中心 !广东
摘要 目的 探 讨 核 转 录 因 子 &8ED:79? F9D;>? >F G9HH9 2I
合成 &
&Y 31/2 和 SA[X 31/2 的 表 达 与 组
逆 转 录 反 应 ( 取 &%8 1/2 模 织类别’浸润深度 ’分 化 程 度 ’淋 巴 结 转 移 ’ 分期和大小有关 $Ll-,-’ %$见表 ’ %&
’,!,)
板 做 逆 转 录 反 应 # 仪 器 为 LA+#--LM1 仪 # 反应体系如下 ($ 德国 ‘52[A/ 公司
-./0 与肿瘤的发生和发展有关+%*% 然而 # -./0 在胃癌表达的分子机制尚未清楚 % 10 ,!2 是 345# 年 678 和 29:;<=>?7
首次发现的为调节 小 鼠 2 淋 巴 细 胞 中 ! 轻链表达的转录因子
+#*
# 这些异常影响信号传导通路下游 # 进
3 3@3
材料与方法 一般资料和标本
人 胃 癌 细 胞 中 /X E&Y 31/2 与
-,)%8 #C/.LH $!(30 %-,!%8 E $ 华 美 %# 00TS $’-R G %8 %’%8 # KALM 水 ’’%8 # 总
体 积 !-%8 & $ 逆 转 录 ^aDD?> 成 分 ((-30
SA[X 31/2 呈 无 显 著 相 关 性 $> U -,!’+# #LU-,!!%’ %$ 见表 ! %&
距癌灶 CD= 以上的癌旁组织 % 其中男 $%
-./0 是 作 用 最 强 $ 最 特 异 $ 最 重 要 的 一
作者简介 ) 王菊岩 &34)4 * 3! ’# 女 # 山东省莱阳市人 # 副主任技师 %
万方数据
+ !! +
! 海南医学 "!""# 年第 $% 卷第 & 期
例 # 女 ’( 例 # 年 龄 &)*%+ 岁 $ 平 均 #",-# 岁 %& 所有患者术前未经过化疗或放疗 & 病理类型为黏液腺癌 ’ 管状腺癌 ’ 印戒细 胞 癌 # 其 中 高 中 分 化 癌 ’’ 例 ’ 低 分 化 癌
cE98;<;9;<J7 H>:X=7?9K7 DM9<8 ?79D;<>8
胃癌是世界上第二大的恶性肿瘤 之 一 # 其恶性程度与各种癌基因 $ 肿瘤抑制 因子及几种生长因子及其受体异常有关
’$()*
种促血管生成因子 #先前的研究同样显示
控制与分化以及对病毒感染的反应等 +%*# 但 目 前 尚 未 清 楚 10,!2 在 胃 癌 异 常 表 达的分子机制 %
例数
" 期 # 例 ’# 期 $+ 例 ’$ 期 & 例 & $,!
方法
表 !"" 胃 癌 细 胞 #$% &Y 31/2 和 SA[X 31/2 的 表 达 分组 性别 男 女 年龄
$,!,$ 1/2 的提取
组 织 块 $ 约 ’""34 % 置 匀 浆 器 # 加
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-./0 =P1Q O9K 8>; D>??7:9;7L O<;M K7‘I 9N7 <8 ME=98 N9K;?<D D98D7?YRSB@BCe@ .‘H?7KK<>8 >F 10,!2 =P1Q 98L -./0 =P1Q <8 ME=98 N9K;?<D D98D7? O9K K<N8<F<D98;:X M<NM7? ;M98 ;M9; <8 ;M7<? 9L^9D78; 8>8D98D7?>EK ;<Ka KE7KYRTB@B3e@ .‘H?7KK<>8 >F 10,!2 =P1Q 98L -./0 =P1Q O9K D>??7:9;7L O<;M M<K;>:>N<D9: N?9L7KI L7H;M >F ;E=>? <8J9K<>8I ;E=>? L<FF7?78;<9;<>8I :X=HM 8>L7 =7;9K;9K<K 98L ;E=>? K<f7 <8 ME=98 N9K;?<D D98D7?YRTB@B$e@ 1> K<N8<F<D98; D>??7:9;<>8 <8 ME=98 N9K;?<D D98D7? O7?7 F>E8L b7;O778 7‘H?7KK<>8 >F 10,!2 =P1Q 98L -./0 =Pa 1QY?UB@!$4#I RUB@!!%$e@ D(72.,&=(7& gE? ?7KE:;K KM>O ;M9; >J7?7‘H?7KK<>8 >F 10,!2 =P1Q 98L -./0 =Pa
’(E&"F 孵育样品 ’""3<: #)F’!"""> G 3<:
离心 ’"3<: # 弃上清液 #%(J 乙 醇 洗 涤 沉 淀一次 $ 至少 ’38%(J 乙醇 G 38 .15I78 %#
而累及癌细胞生物学活性几个方面包括 血管生成 $促使新生血管向胃癌细胞转化
+!,)*
% 众多的研 究 表
收集我院外科 !"") 年 3 月 A!BB) 年
% 在促血管生成的各种调节因子中#
明 #10,!2 参 与 炎 症 和 免 疫 反 应 $ 某 些 疾病的病理产生 $ 急性期反应 $ 细胞周期
5 月手术治疗标本 &! 例 # 包括癌组织及
k-,-( (#)N%N,N!p!!-(N-,-& )%%)’’,-&p’((+%%,&’ l-,-’ (!+&)(,-&p’+N+&!,#) !-%+%’,’!p’)!!!%,%’ l-,-’ #&N)+’,()p!’’+&N,’’ )()##(,N&p’()-’!,!& l-,-’ &#-#(),&-p’%!-%),&N #’%%-#,N&p’(-#’N,)l-,-’ #-&’)-,N%p’(%’-N,&# &)-%((,#)p’%!#&#,-% l-,-’ &&%+-&,’-p’#&-’!,#! #’#&#),-Np’)%’!&,&% l-,-’ #-!NN(,%Np’&%+!N,’( )-#%%%,’-p!!+--+,+#
!,!
相互关系
/XE&Y 表 达 和 SA[X 表 达 的
!’ 例 # 浸润达到浆膜层或浆膜外 ’& 例 ’
未及浆膜 ’+ 例 # 有淋巴结转移 !& 例 ’ 无 淋巴结转移 + 例 #./0 分期 # ! 期 ) 例 ’
1. LM1 试 剂 盒 %(W 逆 转 录 ^aDD?>)%8 # 上
游 引 物 $!(%0 %-,)%8 # 下 游 引 物 $!(%0 %
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离 心 ’(3<: # 取 上 清 液 至 新 的 ABB?:C7>D 管 # 加异丙醇 $",(38 异 丙 醇 G 38 .15I78 %#
LA%--- 型 LM1 扩 增 仪 扩 增 完
成 & 反 应 体 积 为 (-%8 # 反 应 体 系 (( W 定 量 LM1 ^aDD?> $ 美 国
湛江
C!)BB$ #
10 ,!2 ’ 和 血 管 内 皮 生 长 因 子 &J9KDE:9?
利用荧光定量聚合
78L>;M7:<9: N?>O;M F9D;>?I -./0 ’ 在人胃癌细胞中表达及其与临床病理特征的相关性 % 方法
酶链反应法测定 &! 例人胃癌细胞和 !C 例癌旁细胞内 10,!2 =P1Q 和 -./0 =P1Q 的定量表达 # 分析其与临 床病理特征的相关性 % 结果 人胃癌细胞中 10,!2 =P1Q 和 -./0 =P1Q 的表达与性别 $ 年龄无关 &RSB@BC ’%
荧 光 定 量 LM1 反 应( 以下反应均由荧光定量仪
.15678 $’--34 组 织 加 .1567895:;<=>74?:
公司 @!38 %# 冷冻匀浆 # 置 ABB?:C7>D 管 #
(#!)),!Np!&!#&,%+ #---!,’)p!!N’-,%% #’&-’,’!p!(--(,%# (&’N+,(-p’N+’(,-N l-,-’ (N--(,%Np!!%(N,(!N!(&,’!p’N+&-,&N l-,-’ %)’N%,(’p’##%),’) )#+&),-#p’+%-’,+) l-,-’ &+’++,!’p’-&N%,%) #%N(#,N&p!’!%-,%# l-,-’ #)(&N,%-p!&-%&,(! )’&’-,(&p’-&&-,’+ l-,-’ )-&-!,(-p’-!)%,%+ ##-(!,%!p!!)’#,## l-,-’ ###+&,!Np!’’!#,() )&(!#,#-p’%+##,+(