疯牛病症状及检测方法

临床症状：

临床检查最常见的精神症状是神经状态失常，运动障碍和感觉障碍。神经异常表现为焦虑不安、恐惧、狂躁、神志恍惚、磨牙、两耳一只向前伸另一只位置正常或向后。病畜由于胆怯、恐惧，当有人靠近或追逼时往往出现攻击行为。运动障碍主要表现为共济失调。感觉障碍最常见的症状是对触摸和声音过敏，表现惊恐甚至倒地。50%的病例在挤奶时乱踢乱蹬，部分病例抗拒检查，特别是抗拒头部检查。绝大多数病畜食欲良好，但79%的病畜体重减轻，60%的乳量减少。病初6~8周病势发展较快，病情加重。病程一般为1~4月，少数长达1年左右。病牛以死亡而告终。

检测方法： 1 组织病理学检测

组织病理学检测主要是对BSE感染的脑超薄切片进行电子显微镜观察，从而确诊BSE疾病的方法。该法是最早应用于检测的方法之一。但一般只是在疾病发展的后期进行，难以实现BSE的活体检测。

2生物学方法

该方法是将待检动物的脑组织匀浆接种实验动物，经过一定的潜伏期，观察实验动物是否发病，但涉及到接种剂量、接种次数以及潜伏期长等原因，不适合快速、大量检测。

3免疫学方法目前应用效果比较好，能够迅速检测大量样品，其主要原理是抗原抗体的反应。

3.1免疫印记法

主要原理是PrPSC在蛋白酶K的作用下产生PrP27-30，而PrP

C会被完全消化，用PrP27-30抗血清与PrP27-30进行免疫反应即可检测出。该法灵敏度稍差，但试验只需几个小时，可用于大规模的疯牛病检测中。

3.2酶联免疫吸附法

此法是在免疫印记法基础上建立的。将酶促反应的高效率和免疫反应的高效专一性有机地结合起来，可对各种微量有机物进行测定，具有灵敏度高、特异性强、方便快速、对仪器设备要求不高的优点，非常适合大批量的BSE标本筛选工作。

3.3免疫组织化学法（IHC）

该法灵敏度高，且具有较高的解剖学分辨率，能够在福尔马林固定和石蜡包埋的材料上进行。既可以对PrPSC进行定性、定量研究，还能够定位。虽然只能用于死后诊断，但此法是特异性检测朊病毒的第一个方法，被当作是检测疯牛病的标准方法。

4毛细管电泳法

其原理是将抗原抗体竞争实验与毛细管电泳结合起来，检测标本中微量的蛋白质，该法灵敏度很高，可用于检测PrPSC含量很低的脑外组织，如血液等。缺点是难以标准化，结果的判断信号比，并不是实际的PrPSC 含量。5双色强荧光目标扫描法

其原理是运用共聚焦双色荧光相关分光镜技术检测微量的朊病毒。该法特异性很好、灵敏度极高，可检测到2pmol的蛋白质。检测采样早期大都是基于机体脑部组织，随着检测研究的深入及灵敏度的提高，逐渐发展了其他组织检测。

6荧光RT-PCR检测法

荧光RT-PCR技术是近几年建立起来的比较成熟的检测技术之一，该技术的原理是在普通PCR反应的基础上引入了更加特异的荧光探针，通过有无荧光释放以及荧光强度来检测，因而与普通PCR相比，具有更加快速敏感和特异的优势。

7高效液相色谱

有报道显示可以利用高效液相色谱检测与PrPSC相关的疾病。一般先对待测品进行PCR，然后用高效液相色谱检测（大概需30min），且高效液相色谱一次能测192个样品。因此，该法具有快速、可用于早期、灵敏和大批量等优点。

8同位素测定

德国科学家采用同位素测定动物的毛、骨等，检测牛是否喂饲动物蛋白饲料。作为可疑牛的辅助诊断手段。9其他尿液检测、心电图检测等