吸附色谱分析案例

吸附色谱分析案例

——吸附色谱法用于茶多酚的分离提取

生物技术01班 0906070101 陈青青

吸附色谱法常叫做液－固色谱法（Liquid-Solid Chromatography，简称LSC），它是基于在溶质和用作固定固体吸附剂上的固定活性位点之间的相互作用。可以将吸附剂装填于柱中、覆盖于板上、或浸渍于多孔滤纸中。吸附剂是具有大表面积的活性多孔固体，例如硅胶、氧化铝和活性炭等。活性点位例如硅胶的表面硅烷醇，一般与待分离化合物的极性官能团相互作用。分子的非极性部分（例如烃）对分离只有较小影响，所以液－固色谱法十分适于分离不同种类的化合物（例如分离醇类与芳香烃）。

原理

吸附色谱法是利用吸附树脂，即树脂吸附剂能发生吸附一解吸作用的特点来达到物质的分离和纯化的目的的。吸附树脂对分子的吸附作用力徽弱，只要改变体系的亲水一疏水平衡器件，就可以}l起吸附的增加或解吸。树脂吸附了物质以后，一般是用甲醇等低沸点有机溶剂解嗳，特别适用于在活性炭不易再生的情况下分离回收吸附质。吸附树脂在应用上的特点介于活性炭、硅胶、硅藻土等天然嗫附剂与离子交换剂之间而兼具有它们的优点，即有粪似于活性炭的吸附能力，又比离子交换剂更易再生．可以概括为吸附选择性特殊．再生简便，稳定性高。

目前，国内外提取制备茶多酚的方法主要可分为三类：

a、有机溶剂革取法，其关键步骤为氯仿或二氯甲烷革取去除咖啡碱、色素等．然后用己酸乙酯革取茶多酚。

b、盐沉淀法，用钙盐或铝盐沉淀茶多酚以达到与水溶液中咖啡碱、单糖、氡基酸等分离的目的。

c、凝色谱法．用sephadex LH．2O，Toyof Pearl W40凝胶过滤法使茶多酚和其他物质分离。以上三种方法尽管都能达到提取茶多酚的目的，但都存在相应的问题，有机溶剂革取法牵到安全性差的有机溶剂；盐沉淀法由于在制氧化破坏，不但影响有效成分含量，还会使成品颜色加深；凝腋色谱法由于柱材料昂贵、提取收率低而无法大批量或工业化生产。

近年来，具有高度选择性的离子交换树脂和吸附树脂，在成分十分复杂的天然产物的提取和纯化方面的应用中显示出多方面的优点。如效率高、工艺简单等，因此，吸附法已成为一种独特的分离和提纯方法。

茶多酚提取流程:绿茶用10倍量约1O %含水乙醇53 ℃下漫提l小时．过滤．收集滤液，茶渣再用5倍量的乙醇漫提半小时，过滤，合并两次滤液。滤液用分离膜为平板式超滤装置超滤，吸附色谱法分离提取茶多酚，分离膜的截留分子量为4～5万道尔顿，便既可截留滤液中的大分子物质如蛋白质、多糖等，又能让茶多酚尽可能保留在超滤透过板中，一定量的超滤透过液以一定的流速通过吸附树脂柱，用水淋洗后，再用含水乙醇解吸吸附在LX-8树脂柱上的茶多酚，解吸液经减压；浓缩、真空干燥后便获得茶多酚含量高于8O %的茶多酚半精品。复合树脂制备的条件为：PA ：HCOOH=1：7 5．添加剂加量10％．PA担载量25％。PA／XDA复合树脂具有较好的吸附选择性及洗脱性能。可用于茶叶提取液中茶多酚、咖啡碱的有效分离。树脂表面包络微孔膜皮层。利用膜材料和膜结构的变化

可有效调控树腊的吸附与洗脱性能。为树脂的改性提供了一条新的有效途径。该复合工艺简单．快捷．成本低。

工艺流程图

绿茶

10倍量约1O%

含水乙醇53 ℃下

漫提l小时

过滤

以一定的流速通过

吸附树脂柱

用水淋洗

再用含水乙醇解吸吸附

解吸液

减压

浓缩

真空干燥

茶多酚半精品

吸附技术和制备色谱技术应用于化合物的分离和提取，各种色谱技术的相互贯通再加上合适的吸附剂设备及与其它技术的结合将使该技术在生化工业中以降低成本简化操作而产生广泛的吸引力。